高效液相色谱法测定金强油中诺氟沙星的含量
作者：李先荷 聂俊军
作者单位：黄石市第五医院，湖北 黄石 435005
《时珍国医国药》 2007年 第10期
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【摘要】
目的建立高效液相色谱（HPLC）法测定金强油中诺氟沙星的含量。 方法色谱柱为Dimonsil C18色谱柱(5μm, 4.6 mm×250 mm)；流动相为乙腈－0.05 mol·L-1枸橼酸钠溶液（用三乙胺调节pH值3.0）（80∶20）；流速为1 ml·min－1；检测波长为278 nm；柱温30℃。结果诺氟沙星在8～80 μg·ml-1浓度范围内线性关系良好，r＝1.0000，回收率（n＝9）为100.1%（RSD＝0.8%）。结论该方法灵敏度高，线性范围广，具有较高的专属性，快速简便，重现性好，适合于该制剂的含量测定和质量控制。
【关键词】 金强油 含量测定 高效液相色谱法
金强油为我院治疗溃烂性创面的经验方，临床应用十几年，效果良好。金强油由诺氟沙星、地塞米松磷酸钠、盐酸丁卡因等常用药组成，配伍合理，疗效确切，应用方便且无明显不良反应。目前，金强油质量标准中尚无含量测定质量控制，笔者应用高效液相色谱法测定金强油中诺氟沙星的含量，取得满意效果，报道如下。
1 仪器与试药
美国科学系统公司SSI高效液相色谱仪；梅特勒AG135电子天平；诺氟沙星对照品（含量99.3%）。金强油（自制，批号：070610，070611，070612）。乙腈为色谱纯；水为重蒸水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适应性实验色谱柱为Dimonsil C18色谱柱(5μm, 4.6 mm×250 mm)；流动相为乙腈－0.05 mol·L－1枸橼酸钠溶液（用三乙胺调节pH值3.0）（80：20）；流速为1 ml·min－1；检测波长为278 nm；柱温30℃；进样量为10μl。分别吸取诺氟沙星溶液、空白样品溶液和供试品溶液各10μl注入色谱仪，记录色谱图。在本条件下，空白样品中其他组分不干扰诺氟沙星的测定，诺氟沙星保留时间约为8.7min，专属性好，符合规定。
2.2 线性关系考察
精密称取诺氟沙星对照品8 mg，置100 ml容量瓶中，加甲醇10 ml使溶解并稀释到刻度，摇匀，分别取10，5，3，2，1 ml加流动相稀释至10 ml，摇匀，制成诺氟沙星浓度分别约为80，40，24，16，8μg·ml－1的系列溶液，按上述色谱条件进样，记录色谱图。以浓度（X）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，得诺氟沙星回归方程为：Y＝18 480X-18 366（r＝1.000 0），线性范围为8～80μg·ml－1，结果表明在范围内线性良好。
2.3 回收率实验
取不含诺氟沙星的空白样品9份，按处方比例的80%，100%，120%加入一定量的诺氟沙星对照品各3份，按样品测定法测定含量，回收率为100.1%（RSD为0.8%）。
2.4 样品测定
取本品,摇匀，精密称取2 g，置100 ml量瓶中，加10 ml甲醇，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取5 ml置50 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。精密称取诺氟沙星对照品约10 mg，置50 ml量瓶中，加2 ml甲醇使溶解并用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取5 ml置25 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。结果批号为070610，070611，070612的金强油中诺氟沙星的标示含量分别为99.8%，98.6%，99.8%。
2.5 重复性实验
取供试品（批号070610）6份，按含量测定项下方法分别测定其含量，结果平均值为99.8%其RSD为1.1%，表明试验具有良好的精密度。
2.6 稳定性实验
取供试品溶液分别于0，2，4，6，8 h测定其峰面积，测得诺氟沙星峰面积的RSD为0.66%，表明供试品溶液在8 h内稳定。
3 讨论
3.1 色谱条件的选择及系统适应性
采用高效液相色谱法，参考有关文献对流动相进行摸索和筛选，笔者用乙腈－0.05 mol·L－1枸橼酸钠溶液（用三乙胺调节pH值3.0）（80∶20）作流动相，主药诺氟沙星与制剂中的其他成分达到良好分离，且诺氟沙星的峰形良好，能很好满足定量要求。
3.2 溶剂的选择
诺氟沙星在二甲基甲酰胺中略溶，在水或乙醇中极微溶解；在醋酸、盐酸或氢氧化钠溶液中易溶 ［1］。结合流动相综合考虑，选用甲醇作为溶剂。实验中用甲醇作为溶剂处理试品溶液，简单易行，操作简便。
【参考文献】
［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅱ部［S］.北京：化学工业出版社，2005.641.