文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【关键词】  清热达郁口服液；,,梓醇；,,黄芩苷；,,提取工艺；,,正交试验
       摘要：目的优化清热达郁口服液的提取工艺。方法采用正交实验设计，以梓醇、黄芩苷的含量为考察指标，并进行多指标综合评分，优化提取条件。结果清热达郁口服液的最佳提取工艺为：加8倍量水，回流提取3次，2 h/次。结论该提取工艺稳定可行。
       关键词：清热达郁口服液；  梓醇；  黄芩苷；  提取工艺；  正交试验
       Optimization Study on Extraction Technology of Qingre Dayu Oral Liquids by Orthogonal Design with Multi-targets
       SHANG Lixia, LUO Huishan, YIN Shouyu*
       (College of Pharmacy, Yanbian University,Yanji 133000,China)
       Abstract:ObjectiveTo optimize extraction technology of the Qingre Dayu Oral Liquids. MethodsOrthogonal experimental design was used for the optimization of extracting process. The contents of catalpol and baicalin were used as targets. Data processing was carried out with the multiple guidelines grading method for optimizing the extraction condition. ResultsThe optimal extracting condition was founded to be successively 3 decoctions with 8 times of water for 2 h. ConclusionThe optimal process is stable and feasible.
       Key words:Qingre Dayu Oral Liquids;  Catalpol;  Baicalin;  Extraction technology;  Orthogonal design
   
　　清热达郁汤是博取历代医家寒热并用、攻补兼施之法，结合长期临床实践所拟出的平调阴阳、清热达郁之效方。经临床治疗研究表明，其对肝硬化腹水等多种沉滞痼疾疗效显著。因汤剂在临床应用存在诸多不便，为此我们已将其研制成口服液。本方由生地、知母、黄芩、大枣等10味药组成。本文采用正交实验，以梓醇［1］、黄芩苷［2］含量为代表性指标并进行综合评分，对清热达郁口服液的提取工艺进行优化，为其制备工艺的确立提供试验依据。
       　　1  仪器与试药
       日本岛津LC一1OAvp高效液相色谱仪，LC-10Avp泵，SPD-10Avp可见紫外检测器，SCL-10Avp系统控制器；AS3120A超声提取器；梓醇对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号：110808-200508)，黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号：110715-200514)；中药材购于延吉市成大医药公司，经鉴定均符合《中国药典》2005年版Ⅰ部标准。甲醇为色谱纯，水为二次蒸馏水，其他试剂为分析纯。
       2  方法与结果
       2.1  正交试验设计根据预实验和文献资料，确定考察3个因素，即加水量、煎煮时间、煎煮次数，每个因素设3个水平，选用 L9(34 )正交实验表安排实验。结果见表1。
       表1  因素水平表（略）
       2.2  药材提取方法按处方比例称取药材，回流提取（按表1~2安排实验），滤过，滤液浓缩至50 ml，作为样品的提取液备用。
       2.3  含量测定方法
       2.3.1  梓醇含量测定 色谱条件：Diamonsil C18 (250 mm×4.6 mm ,5 μm)；流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(1∶99)；流速1.0 ml/min；柱温25℃； 检测波长为210 nm；进样量10 μl。在此条件下测定，理论塔板数按梓醇峰计算不低于6×103。对照品溶液的制备：精密称取干燥至恒重的梓醇对照品适量，加流动相配成0.44 mg/ml-1的对照品溶液。供试品溶液的制备：精密吸取上述样品提取液1 ml，置10 ml量瓶中，加甲醇适量，超声30 min，取出放凉，用甲醇定容至刻度，滤过，精密吸取续滤液5 ml，水浴蒸干，残渣用流动相溶解，转移至5 ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀，微孔滤膜(0.45 μm)滤过，即得。样品测定：精密吸取各供试品溶液10 μl，注入液相色谱仪，测定，外标两点法计算含量。结果见表2。
       2.3.2  黄芩苷的含量测定 色谱条件：色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm ,5 μm)；流动相甲醇-水-磷酸 (47∶53∶0.2)；流速1.0 ml・min-1；柱温25℃；检测波长为280 nm；进样量10 μl。在此条件下测定，理论塔板数按梓醇峰计算不低于4×103。对照品溶液的制备：精密称取干燥至恒重的黄芩苷对照品适量，加甲醇配成0.14 mg/ml-1对照品溶液。供试品溶液的制备：精密吸取上述样品提取液1 ml，精密加入78％乙醇9 ml，超声提取30 min，放冷，滤过，取续滤液即得。样品测定：精密吸取各供试品溶液10 μl，注入液相色谱仪，测定，外标两点法计算含量。结果见表2。
       2.4  正交实验结果分析结果见表3。由直观观察和方差分析可知，因素的主次顺序为C>B>A，最佳水平应为A3B3C3。其中因素C，P<0.05，表明提取次数对提取率有显著性影响。因素A、因素B对实验结果均无显著影响(P>0.05)，对因素A虽K3＞K2，但两者无显著性差异，考虑到实际生产，最终确定最佳提取工艺为A2B3D3，即8倍量水，提取3次，2 h/次。
       表2  正交实验设计及数据处理（略）
       表3  方差分析（略）
       2.5  验证实验取4份药材，按照已确定的最佳提取工艺提取，测定梓醇和黄芩苷的含量，结果见表4。
       表4  验证试验结果（略）
       　　3  讨论
       3.1  曾采用水、70%乙醇单独提取黄芩和诸药混合提取比较，发现在其他提取条件相同的情况下，黄芩苷的得率为：混合提取＞水提取＞70%乙醇提取，故采用诸药混合提取的方法。
       3.2  经多次试验证明药材在浸泡2h时吸水完全，故选择浸泡2 h后提取。
       3.3  本实验采用正交试验，以生地中梓醇、黄芩中黄芩苷为考察指标，分别予不同的权重（0.6和0.4），综合评分，使优选的提取工艺科学合理。验证试验结果表明优选的提取工艺条件稳定可行。
       　　参考文献：
       ［1］  李更生，于  震，王慧森.地黄化学成分及药理研究进展［J］.国外医学・中医中药分册，2004，26（2）：74.
       ［2］  王本祥.现代中药药理与临床［M］天津：天津科技翻译出版公司，2004：1362.
       (延边大学药学院，吉林 延吉  133000)