文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【摘要】 
       目的采用高效液相色谱（HPLC）法测定胃康灵胶囊中甘草酸的含量。方法HPLC法，Zobax-ODS柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流动相：乙腈0.1 mol/L醋酸铵溶液冰醋酸（28∶72∶0.3），检测波长：250 nm，流速：1.0 ml·min-1。结果甘草酸在44.84～224.20 μg/ml范围内有良好的线性关系，r=0.999 9（n=5），平均回收率为97.56%。结论 该方法分离度高，重现性好，简便，准确，可用于胃康灵胶囊的质量控制。
       【关键词】  高效液相色谱； 胃康灵胶囊； 甘草酸
       
       Determination of Glycyrrhizic Acid in Weikangling Capsule by HPLC
       WANG Jutao，CHEN Ming,YE Jiesheng, XU Fengqing
       1. Anhui College of Traditional Chinese Medicine,Hefei 230001，China;
       2. School of Pharmacy, Shandong University, Jinan 250012, China
       Abstract：ObjectiveTo determine glycyrrhizic acid in Weikangling Capsule by HPLC.Methods HPLC was used in the quantitative analysis of glycyrrhizic acid in the sample.The separation was performed on ZobaxODS C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)column with a mixture of acetonitrile：0.1mol/L ammonium acetate：acetic acid（28∶72∶0.3）as mobile phase.The detection wavelengh was set at 250 nm and the flow rate was 1.0ml·min-1. ResultsThe standard curve was linear in the range of 44.84～224.20μg·ml-1for glycyrrhizic acid (r=0.999 9,n=5).The average recovery was 97.56%.ConclusionThe method is simple,reliable,and it can be used for determination of Glycyrrhizic acid.
       Key words：HPLC;   Weikangling capsule;   Glycyrrhizic acid
       胃康灵胶囊选用多种名贵中药材，运用传统的炮制方法和现代的制剂手段精制而成，属纯中药制剂。经药效学实验及临床验证结果证实，本品具有柔肝和胃，散淤止血，缓急止痛，去腐生新的作用，并且具有镇痛、止血、抗炎、保护胃黏膜等作用［1］。方中白芍、甘草用量较大，为其主要成分，其主要活性成分分别为芍药苷、甘草酸等［2～4］。由于芍药苷的测定已有文献报道，且已有薄层鉴别，所以参照有关文献用甘草酸作为含量测定指标具有一定的实际意义。本实验用高效液相色谱法测定甘草酸含量，方法可靠，灵敏，快速。可用于胃康灵胶囊的质量控制。
       1  仪器与试药
        日本岛津LC10AT液相色谱仪、浙江大学N2000色谱工作站、JL180超声波清洗器（功率300 W，频率50 kHz，上海杰理科技有限公司）、RE52CS型旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）。甘草酸单铵盐对照品（中国药品生物制品检定所，批号：731200205），乙腈为色谱纯，其余试剂、试药均为分析纯，水为重蒸去离子水。
       2  方法与结果
       2.1  系统适用性 
       色谱柱：Zobax ODS柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)； 柱温：25℃；流动相：乙腈-0.1 mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸（28∶72∶0.3），检测波长：250 nm；流速：1.0 ml/min。理论板数以甘草酸计不低于2 000，分离度：R=1.69（R＞1.5）。按照处方组成，取除甘草外的其余药味，按制备工艺要求制成不含甘草的胃康灵胶囊，按供试品溶液制备项下方法制备阴性对照溶液。阴性对照溶液在与甘草酸对照品相同保留时间处无干扰峰出现，所以处方中其它味药对测定结果无影响。参见图1。
       2.2  供试品溶液的制备 
       取本品内容物约1.0 g，精密称定，置50 ml量瓶中，加流动相约45 ml，超声处理30 min，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液。
       2.3  对照品溶液的制备 
       称取甘草酸单铵盐对照品约1.0 mg（折合甘草酸为0.979 5 mg），精密称定，置10 ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每毫升中约含甘草酸100 μg）。
       2.4  线性关系的考察 
       精密称取甘草酸单铵盐对照品2.289 mg（折合甘草酸2.242 mg）置10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，再精密量取0.2，0.4，0.5，0.6，0.8，1.0 ml，分别置于6个1 ml的量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为不同浓度的对照品溶液，分别吸取20μl进样，记录色谱峰面积，以峰面积（A）为纵坐标（Y），甘草酸浓度（μg/ml）为横坐标（X），绘制标准曲线，得回归方程,相关系数及线性范围分别为：Y=13 038X-2 425，r=0.999 9（n=5），44.84～224.20 μg/ml。
       2.5  精密度实验 
       精密吸取甘草酸对照品溶液20 μl，重复进样5次，测定甘草酸峰面积值，RSD为0.70%（n=5）。
       2.6  稳定性实验 
       精密吸取供试品溶液20 μl，每间隔1 h测定一次，结果显示5 h内，溶液中甘草酸峰面积稳定，RSD为1.65%（n=5），稳定性较好。
       2.7  重现性实验 
       精密称取样品（批号20060218）内容物适量5份，按供试品溶液制备项下方法处理，按上述色谱条件分析测定，甘草酸平均含量为1.719 mg/粒，RSD为1.31%（n=5），重现性较好。
       2.8  回收率实验 
       精密称取已知含量（1.719 mg/粒）的同一批号的样品（批号20060218）内容物约0.5 g共5份，再分别加入一定量的甘草酸单铵盐对照品溶液，混合均匀，微热蒸干。按含量测定项下供试品溶液的制备方法配制供试品溶液。按含量测定项下方法测定，结果平均回收率为97.56%，RSD为0.64% (n=5)。结果见表1。表1  加样回收率实验结果（略）
       2.9  样品的测定 
       取不同批次的样品，按照供试液制备项下方法操作，得供试品溶液，按上述色谱条件分析测定，结果见表2。表2  样品含量测定结果（略）
       3  讨论
       3.1  超声时间的考察
        
       对超声处理制备供试品溶液进行了考察。结果显示，超声处理20 min和30 min时，甘草酸的提取率相近。为保证提取完全，确定超声提取时间为30 min。
       3.2  流动相的选择 
       考察了甲醇水、乙腈水、乙腈醋酸系统［5］，结果表明以乙腈0.1 mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸（28∶72∶0.3）为流动相时，甘草酸的分离度和峰形最好。
        本法测定胃康灵胶囊中甘草酸的含量，样品前处理简单，实验结果表明分离度好、干扰少、前处理简便，可推广应用。
       【参考文献】
         　　［1］张新春，王书杰，王丽萍. 胃康灵胶囊治疗胃溃疡临床疗效观察［J］.时珍国医国药, 2004, 15(10) ： 676.
       
       ［2］国家药典委员会.中国药典Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社, 2005：210.
       
       ［3］程锦国.胃康灵治疗慢性胃炎352例的临床观察［J］.中国中医药科技，1997，4（4）：243.
       
       ［4］王铁武，刘爱琴.胃康灵治疗胃炎和消化性溃疡的疗效观察［J］.宁夏医学杂志，1997，19（6）：376.
       
       ［5］罗玉川.胃康灵胶囊质量标准研究［J］.广东药学，2004：15.