启窍治聋丸的薄层色谱鉴别
作者：黄樱华，李德堂
作者单位：（广州中医药大学第一附属医院，广东 广州 510405；广州中医药大学第一临床医学院，广东 广州 510405）
《时珍国医国药》 2007年 第8期
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【摘要】
目的建立启窍治聋丸中丹参、何首乌、川芎的鉴别方法。方法薄层色谱法。结果供试品在与对照品色谱对应的位置上显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。结论该实验方法可作为启窍治聋丸的质量控制指标之一。
【关键词】 启窍治聋丸； 薄层色谱法
启窍治聋丸是由丹参、何首乌、川芎、柴胡等12味中药组成，是广州中医药大学 第一附属医院五官科的经验药方，具养肾疏肝、活络聪耳的功效，用于肾虚肝郁型感音神经耳聋，具有较好的疗效。为有效控制产品质量，现采用TLC法对处方中丹参、何首乌、川芎进行了定性研究，现报道如下。
1 仪器与试药
定量毛细管（日本）；硅胶G（青岛海洋化工厂）；丹参素钠、大黄素、大黄素甲醚对照品，何首乌、川芎对照药材（中国药品生物制品检定所提供）；启窍治聋丸（本院制剂）；阴性样品（按处方工艺制得缺味样品）；所用化学试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 丹参的鉴别取本品10 g，研细，加甲醇30 ml，超声处理20 min。滤过，滤液蒸干，残渣加水20 ml使溶解，用稀盐酸调pH至2，用醋酸乙酯振摇提取3次，20 ml/次，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹参素钠对照品，加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液，作为对照品溶液。再取缺丹参阴性对照适量，同法制成阴性对照液。照薄层色谱法［1］实验，吸取上述3种溶液各4 μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷丙酮甲酸（25∶10∶4）为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏25 min，取出，放置20 min后，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。结果见图1。
2.2 何首乌的鉴别取本品10 g，研细，加甲醇30 ml，超声处理20 min。滤过，滤液蒸干，残渣加水10 ml使溶解，加盐酸1 ml，加热回流30 min，立即冷却，用乙醚振摇提取3次，15 ml/次，合并乙醚液，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取何首乌对照药材0.1 g和缺何首乌阴性对照适量，同法分别制成对照药材溶液和阴性对照液。再取大黄素、大黄素甲醚对照品，分别加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法［1］，吸取上述大黄素对照品和大黄素甲醚对照品溶液各1 μl，对照药材溶液6 μl，供试品溶液及缺何首乌阴性对照液各10 μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷醋酸乙酯甲酸（6∶2∶0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏后，日光下检视，斑点变红色。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点，阴性对照无干扰。结果见图2。
2.3 川芎的鉴别取本品10 g，研细，加乙醚30 ml，超声处理20 min。滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取川芎对照药材0.3 g和缺川芎阴性对照适量，同法分别制成对照药材溶液和阴性对照液。照薄层色谱法［1］实验，吸取上述溶液各2 μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷醋酸乙酯（9∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。结果见图3。
图1 丹参TLC图谱（略）
图2 何首乌TLC图谱（略）
3 讨论
3.1 在丹参的鉴别中，薄层色谱条件是参照《中国药典》［1］中复方制剂——复方丹参滴丸中丹参的色谱条件，但在有效成分提取中，增加了用甲醇超声提取，因为启窍治聋丸是由12味中药组成，为了减少干扰，故先用甲醇提取，以便去除部分杂质。
3.2 在何首乌的鉴别中，薄层色谱条件参照《中国药典》［1］中何首乌药材的色谱条件时，斑点分离不理想，考虑到何首乌的有效成分与大黄的有效成分相似，所以改用《中国药典》［1］中复方制剂——十一味能消丸中大黄的薄层色谱条件，结果斑点清晰，分离效果好。
1.川芎对照药材溶液 2.缺川芎阴性对照 3～5.样品
图3 川芎TLC图谱（略）
3.3 川芎的薄层色谱条件是参照《中国药典》［1］川芎药材的色谱条件，经实验供试品与对照品色谱对应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰。
本实验所采用的方法具有简便稳定的特点，并且斑点清晰，重现性好，可作为启窍治聋丸制剂的有效鉴别方法。
【参考文献】
［1］ 国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：28，295，528，附录ⅥB.