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       【摘要】 
       目的对阿里红多糖的最佳超声提取工艺进行研究。方法用正交实验法筛选最佳提取工艺，并用苯酚-硫酸法测定阿里红多糖含量。结果λmax = 490 nm,平均回收率为101.07% , RSD= 2.66%。阿里红多糖的最佳提取工艺为:粉末粒度为60目,超声时间60 min,水量20 ml。结论该方法简单、快速、准确,为从阿里红药材或制剂中提取多糖提供了参考。
       【关键词】  阿里红多糖； 正交实验法； 超声提取
       Studies on Extraction Process of Polysaccharide From Fomitopsis officinalis
        CONG Yuanyuan1, WANG Xiaowen1, Palida·abulizi1, Yusup·rahman2, Abduwali·hopur2
        （1.College of Pharmacology，Xinjiang Medical University, Urumqi, Xinjiang 830054, China; 2. Graduate Student of Grade 2003 of Pharmacologyical School, Xinjiang Medical Uviversity, Uruanqi, Xiajiang 830054, China）
        Abstract：ObjectiveTo study the optimum extraction process of polysaccharide from Fomitopsis officinalis.MethodsThe optimal ultrasonic extraction process was selected with the orthogonal design and the content of polysaccharide was deternined by spectrophotometry. ResultsThe optimum extraction process was as follows: the polysaccharide was extracted with ultrasonic technology for 60 minutes, with 20ml water and the particle size of material was 60 screen mesh. The average recovery was 101.07%. ConclusionThe experimental results provide the basis for the ultrasonic extraction process of polysaccharide from Fomitopsis officinalis. This optimum process is economical, simple, stable and efficient.
        Key words：Polysaccharide from Fomitopsis officinalis;  Ultrasonic extraction process;  Orthogonal design
        阿里红，又名苦白蹄，为多孔菌科药用层孔菌阿里红Fomitopsis officinalis Ames的干燥菌体，具有温肺化痰、降气平喘、祛风除湿、活血消肿、利尿、解蛇毒等作用［1］，能增强体力，延长抗疲劳和耐缺氧时间，并能增强机体的应激能力［2］，是新疆维吾尔医常用药材。阿里红含多种三萜和甾体化合物，其中主要是齿孔酸和去氢齿孔酸［3］。文献报道阿里红多糖亦为其有效成分之一，能够增强小鼠的细胞免疫和非特异性免疫功能［4］，并具有一定的清除氧自由基作用［5］。我们以新疆地产阿里红为原料，采用超声波提取法提取多糖，并用正交实验法对提取过程中药材粒度、超声时间、用水量进行了优化研究,用苯酚-硫酸法测定其多糖含量。
           1  仪器与试药
        1.1  仪器JZ7114药材粉碎机（上海微型电机厂）；SX721分光光度计（山东高密分析仪器厂）；KUDOS SK2200H超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司）。
        1.2  试药葡萄糖对照品（Sigma公司）；苯酚,浓硫酸均为分析纯。阿里红购于新疆中新药业有限公司，由新疆医科大学药学院天然/生药教研室帕丽达副教授鉴定。
           2  方法与结果
        2.1  对照品溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品100 mg置于100 ml的量瓶中，加水适量使溶解，稀释至刻度，摇匀。精密吸取上述溶液10 ml，于100 ml 量瓶中加水至刻度，摇匀，即得100 μg/ml的对照品溶液。
        2.2  标准曲线的绘制精密吸取对照品溶液0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2，1.4 ml置于10 ml具塞试管中，加水至2.0 ml，摇匀。另精密吸取2.0 ml蒸馏水于10 ml具塞试管中作为空白，分别向上述试管中精密加入1.0 ml 5%苯酚溶液和5.0 ml浓硫酸，摇匀，置90℃水浴中反应15 min，反应完毕后取出，放置至室温，于490 nm处测定吸收值。以对照品溶液浓度为横坐标，其相应的吸收值为纵坐标，绘制标准曲线。标准曲线为Y=0.006 9X-0.007 5，r=0.998 7, 线性范围10.05～140.7 μg/ml。
        2.3  供试品溶液的制备精密称取阿里红粉末0.1 g，置于具塞瓶中，按表1设定的因素进行超声提取，过滤，取续滤液备用。本实验选取3个主要因素：粉末粒度、超声时间、水量。每个因素拟3个水平，选用了L9（34）正交表。 表1  因素水平表
        2.4  样品的测定精密吸取续滤液1 ml，按标准曲线项下操作，测得吸收度，代入回归方程，得阿里红多糖的含量。结果见表2。
        2.5  含量测定精密称取阿里红粉末0.1 g，按照优选出的最佳条件超声提取（粒度60目，超声时间60 min，加水量20 ml ），过滤，取续滤液，按标准曲线下操作，在490 nm处测得5份样品的吸收度为：A1=0.515，A2=0.507，A3=0.499，A4=0.498，A5=0.490，根据回归方程求出百分含量分别为75.725，74.565，73.406，73.261，72.101 μg/ml，平均含量为73.812 μg /ml，RSD=1.81%。
        2.6  回收率实验精密称取60 目阿里红粉末0.04～0.08 g  5份，加水20 ml，超声60 min，过滤，取续滤液1 ml，各加1 ml葡萄糖标准液（50 mg/L），按标准曲线下操作，计算回收率，平均回收率为101.076%，RSD=2.66%。
        2.7  方差分析对表2结果进行统计学处理。方差分析结果见表3。表2  正交实验方案与结果
           3  结论
        实验结果表明各因素对提取影响程度依次为: C > B > A,其中影响最大为水量,最佳提取条件为A3B3C1 , 即粒度60目,超表3  方差分析声时间60 min,水量20 ml。该方法简单、快速、准确,可为从阿里红药材或制剂中提取多糖提供参考。
       【参考文献】
         ［1］ 江苏新医学院.中药大辞典［M］.上海：上海人民出版社，1977：2404.
       
       ［2］ 王 颖,吕达贤,于佳林,等. 新疆药用层孔菌补益作用的研究［J］. 新疆农业大学学报, 2002,1(25):40.
       
       ［3］ 吴 霞,杨峻山，董悦生. 阿里红化学成分的研究(1)［J］.中草药，2005，36（6）：811.
       
       ［4］ 邬利娅·依明，帕丽达·阿不力孜，白 丽，等.阿里红多糖对小鼠免疫功能的影响［J］.新疆医科大学学报，2003，26（6）：563.
       
       ［5］ 依巴代提·托乎提，玛依努尔·吐尔逊，苏巴提·吐尔地，等.阿里红多糖对氧自由基的清除作用［J］.新疆医科大学学报，2006，29（1）：15.