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       【摘要】 
       目的对夏、秋两季的柴胡质量进行比较，以确定夏季是否也能作为柴胡的采收期。方法利用原子吸收分光光度法、高效液相色谱等方法，按照《中国药典》（2005年版）规定的质量标准指标，对辽南野生柴胡不同采收期的醇浸出物、灰分、柴胡皂苷（以柴胡皂苷a为主要指标）、多糖等含量进行测定。结果辽南野生柴胡不同采收期（夏季、秋季）质量相近。结论夏季也可作为柴胡采收期。
       【关键词】  柴胡 采收期 质量比较
       辽宁南部生长着丰富的野生中药资源，柴胡就是其中一种比较常用的中药资源。其传统功效是：疏散退热，疏肝，升阳。现代研究表明其具有中枢抑制、抗炎、降低血浆胆固醇、抗感冒病毒、增强机体免疫等作用，是一种热门研究的药物。柴胡传统采收期是春季或秋季，但春、秋季地上部位已枯萎，少有残存，此时采挖野生柴胡因其地上部分特征不明显，较难采挖；而夏季柴胡的地上部分特征明显。本实验将夏、秋季的柴胡质量进行比较，探讨夏季是否也能作为柴胡的采收期，以期充分利用柴胡资源。
       1  材料与方法
        1.1  材料 柴胡干燥根（200606和10月采于大连市大黑山），经大连大学医学院中医中药学系高松副教授鉴定。
        1.2  药品与试剂标准品，柴胡皂苷a（中国药品生物制品检定所），编号为：110777-200405。乙腈，色谱纯（Tedia，United States of America）；乙醇，分析纯（沈阳市苏家屯区化工厂）；甲醇，色谱纯（Tedia，United States of America）；甲醇，分析纯 （广东省汕东市西陇化工厂）。
        1.3  仪器 TAS-986原子吸收分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；高效液相色谱仪（HITACHI L 2000 日本日立公司）；送液泵HITACHI L-2130；检测器  HITACHI UV-detector 2-2400；工作站 色谱数据工作站 N-2000（浙江大学智达信息工程研究所）。
        1.4  方法
        1.4.1  柴胡微量元素及重金属元素测定取柴胡样品粉末各1 g（准确至0.01 g），3份，放入100 ml缩口烧杯中 ，加10 ml浓硝酸放置过夜。第2天，置于电热板上低温硝化，待硝化至5 ml时，加HNO3-HClO4(4∶1）10 ml，继续硝化至剩余2 ml时，再加入2 ml，加热，蒸发至剩余溶液约1 ml，停止加热，用去离子水洗数次，定容于25 ml容量瓶中，作为待测液。 按上述同样步骤进行空白试验，以去离子水定容于25 ml容量瓶中，做为空白液。分别用K，Ca，Zn，Cu，Cr，Pb，Cd标准贮备液（1 mg/ml）稀释成不同浓度的标准系列溶液，每个标准系列配制3种不同浓度的标准溶液。所用仪器是TAS-986原子吸收分光光度计，方法:火焰原子吸收，火焰:空气-乙炔。
        1.4.2  总灰分含量测定供试品粉碎，使能通过2号筛，混合均匀后，取供试品2～3 g，置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量（准确至0.01 g），缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500～600℃，使完全灰化并至恒重。根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量(％)。
        1.4.3  醇浸出物含量测定取供试品2～4 g，精密称定，置100～250 ml的锥形瓶中，精密加乙醇50～100 ml，密塞，称定重量，静置1 h后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1 h。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液25 ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3 h，置干燥器中冷却30 min，迅速精密称定重量。以干燥品计算供试品中醇溶性浸出物的含量(％)。
        1.4.4  柴胡皂苷a含量测定
        色谱条件：色谱柱为Hypersil ODS-2(4.6 mm×250 mm,5μm)；流动相为乙腈-水(30∶70)；柱温25℃；检测波长203 nm；流速1.0 ml/min；分析时间90 min。
        柴胡皂苷a样品的提取流程：
        对照品溶液的制备：精密称取柴胡皂苷a对照品2.2 mg，置10 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每毫升含柴胡皂苷a 0.22 mg）。
        供试品溶液的制备：分别取不同采收期柴胡各0.5 g，按照柴胡皂苷a样的提取流程制备。
        1.4.5  柴胡多糖含量测定取柴胡样品粉末各5 g（准确至0.01 g）3份，水煎提取1次，蒸发浓缩提取液至适当浓度。先后用醋酸乙酯、氯仿萃取，以除去脂质、蛋白质等杂质。再用二倍体积的95%的乙醇沉淀，反复进行4次，滤过 ，合并沉淀，称重。
       2  结 果
        2.1  柴胡微量元素及重金属元素测定结果火焰原子吸收法测得6，10月份采收期柴胡根中的微量元素及重金属元素含量，扣除空白，取3组数据平均值。结果见表1。表1  柴胡重金属及微量元素含量测定值
        2.2  总灰分含量测定结果  6月份采收期柴胡根中的总灰分含量为6.8%，10月份采收期柴胡根中的总灰分含量为5.5%。
        2.3  醇浸出物含量测定结果 6月份采收期柴胡根中的醇浸出物含量为19.81%，10月份采收期柴胡根中的醇浸出物含量为19.78%。
        2.4   柴胡皂苷a含量测定结果    利用高效液相色谱测定柴胡皂苷a含量，用柴胡皂苷a标准品建立校正曲线得出6，10月份柴胡样品高效液相色谱图。见图1～4。
        以峰面积对进样量进行回归处理测定出6月份采收期柴胡根中的柴胡皂苷a含量为0.397%，10月份采收期柴胡根中的柴胡皂苷a含量为0.403%。
        2.5  柴胡多糖含量测定结果6月份采收期柴胡根中的柴胡多糖含量为2.44%，10月份采收期柴胡根中的柴胡多糖的含量为2.35%。
        由以上结果可知，辽南野生柴胡在夏（6月）、秋（10月）两季采收，醇浸出物含量、总灰分含量、微量元素、重金属元素含量、多糖含量与柴胡主要有效成分柴胡皂苷a含量接近。
       3  讨论
        柴胡传统采收期是春季或秋季，但春秋季地上部位已枯萎，少有残存，此时采挖野生柴胡因其地上部分特征不明显，较难采挖；而夏季柴胡的地上部分特征明显，将夏、秋季的柴胡质量进行比较，不同采收期质量差异不大的话，夏季也能作为柴胡的采收期，则能提高柴胡这味中药材的资源利用。药材质量、产量与季节有密切关系，在含有效成分最高季节采收药用价值最高。柴胡中的微量元素、重金属元素、多糖的含量是药材的质量评定参考指标，总灰分含量和醇浸出物含量是《中国药典》规定的柴胡的质量标准指标，柴胡中的柴胡皂苷a等成分为柴胡的有效成分。本实验将微量元素、重金属元素、总灰分含量、醇浸出物含量等作为柴胡质量的评价指标，对夏、秋季的柴胡质量进行比较，结果表明辽南野生柴胡不同采收期（夏季、秋季）质量相差不大，夏季也可作为柴胡采收期。