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青蒿多糖的抗肿瘤作用实验研究
作者:薛明, 田丽娟    
作者单位:1.南京中医药大学,江苏 南京 210029;2.金陵药业股份有限公司,江苏 南京 210009

《时珍国医国药》 2008年 第4期

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       【摘要】 
       目的研究青蒿多糖(HQG)的抗肿瘤作用。方法考察HQG的急性毒性实验,考察HQG对移植性肿瘤Eac,Heps,S180的抑制作用。结果HQG的急性毒性为347.769 8,HQG100 mg/kg剂量组对小鼠移植瘤Eac,Heps和S180的抑瘤率分别可达到51.19%,56.75%,46.41%。结论HQG的急性毒性小,HQG可显著抑制小鼠移植瘤Eac,Heps和S180的生长,具有明显的抗肿瘤作用。
       【关键词】  青蒿 多糖 抗肿瘤
       Experimental Study on the Anti-tumor Effect of Polysaccharides from Artemisia annua L.
       XUE Ming,TIAN Lijuan
       1.Nanjing University of TCM  ,Nanjing 210029, China;
       2.Jinling Pharmaceutical Co., LTD  ,Nanjing 210009, China
       Abstract:ObjectiveTo study the effect of anti-tumor of polysaccharides from Artemisia annua L.(HQG). MethodsExperiments of acute toxicity and inhibitory effect of HQG on Eac,Heps and S180 tumor cells were observed.ResultsThe acute toxicity of HQG was 347.7698mg/kg. The inhibitory rate of 100 mg/kg HQG was 51.19% of Eac, 56.75% for Heps and 46.41% for S180. ConclusionHQG has low acute toxicity and can significantly inhibit the growing of Eac,Heps and S180 tumor cells.
       Key words:Artemisia annua L.;   Polysaccharides;   Anti-tumor
       青蒿为菊科植物黄花蒿Artemisia annua L.的干燥地上部分。是一味常用中药,清热解暑,具有除蒸、截疟的功能[1]。目前对青蒿的研究主要集中在青蒿素等萜类成分及其挥发油[2~4],对其所含多糖类成分少有研究报道。本文研究了青蒿多糖的抗肿瘤活性。
       1  材料
       青蒿多糖(自制,以下简称HQG);环磷酰胺(CTX)(上海华联制药有限公司);
       实验动物:ICR种小鼠,18~22 g,雌雄各半;合格证号:SCXK(苏)2002-0011;
       肉瘤S180细胞,Eac瘤株细胞,Heps瘤株细胞。
       2  方法
       2.1  HQG的急性毒性实验急性毒性实验分为预实验和正式实验,预实验找到大致剂量范围,进行正式实验。设6个剂量组,每剂量组10只小鼠,雌雄各半,药物剂量按等比排列,比值0.8,分别为190.054,237.568,296.96,371.2,464,580 mg/kg,尾静脉注射,给药体积0.4 ml/只,一次注射后,在24 h后多次观察,连续观察7 d。记录动物的毒性反应情况和死亡动物的分布,死亡动物及时进行尸检,并记录病变情况,若有肉眼可见病变组织时,需进行该组织的病理形态学检查。结果用Bliss统计方法计算LD50值。
       2.2  HQG对移植性肿瘤Eac的抑制作用实验小鼠50只按移植性肿瘤研究法[5]接种Eac实体型,接种后24 h称鼠重,并随机分为5组,每组10只,雌雄各半。接种24 h后给药,尾静脉注射给药,HQG组给药体积为0.4 ml/20 g,高、中、低剂量分别为100,50,25 mg/kg体重;CTX组予CTX30 mg/kg体重;对照组予等体积生理盐水。隔天1次,共给药4次,于停药后第2天小鼠称重,处死荷瘤小鼠并分离瘤块,称瘤重,所得数据进行统计学处理(t检验)。
       2.3  HQG对移植性肿瘤Heps的抑制作用实验小鼠50只按移植性肿瘤研究法接种Heps实体型,实验方法同“2.2”项。
       2.4  HQG对移植性肿瘤S180的抑制作用实验小鼠50只按移植性肿瘤研究法接种S180实体型,实验方法同“2.2”项。
       3  结果
       3.1  HQG的急性毒性实验小鼠静脉注射给药后中毒症状为被毛踡卧,步履蹒跚,活动减少,嗜睡,呼吸减慢。死亡动物解剖,各脏器未见明显异常。死亡分布和统计结果见表1。表1  HQG小鼠尾静脉注射LD50测定结果(略)
       统计分析,回归方程为:Y=-9.932 2+5.875 8X(r=0.983 2)(Y为概率单位加5后的数值,X为剂量的对数);LD50=423.889 4 mg/kg,置信系数a=0.05时的置信区间为:299.460 2 mg/kg≤ LD50≤403.872 9 mg/kg。结果表明青蒿多糖静脉注射毒性较小,安全范围大。
       3.2  HQG对移植性肿瘤Eac的抑制作用HQG各剂量组与空白对照组相比均可显著抑制小鼠移植瘤Eac的生长(P<0.01),但100,50 mg/kg 剂量组对动物体重影响较大(P<0.01),HQG25mg /kg剂量组对动物体重影响相对较小(P<0.05)。阳性药CTX对移植瘤的抑制作用也很明显(P<0.01),对小鼠体重影响也较大。结果见表2。表2  HQG静脉注射对小鼠移植瘤Eac的抑制作用(略)
       3.3  HQG对移植性肿瘤Heps的抑制作用HQG各剂量组与空白对照组相比均可显著抑制小鼠移植瘤Heps的生长(P<0.01),但100,50 mg/kg 剂量组对动物体重影响较大(P<0.01),HQG25 mg/kg 剂量组对动物体重影响相对较小(P<0.05)。阳性药CTX对移植瘤的抑制作用也很明显(P<0.01),对小鼠体重影响较大。结果见表3。表3  HQG静脉注射对小鼠移植瘤Heps的抑制作用(略)
       3.4  HQG对移植性肿瘤S180的抑制作用HQG各剂量组与空白对照组相比均可显著抑制小鼠移植瘤S180的生长(P<0.01),但100 mg/kg 剂量组对动物体重影响较大(P<0.05)。阳性药CTX对移植瘤的抑制作用也很明显(P<0.01),对小鼠体重影响也较大。结果见表4。表4  HQG静脉注射对小鼠移植瘤S180的抑制作用(略)
       4  讨论
       多次实验研究的结果表明,HQG对移植性实体瘤Eac,Heps及S180均有一定的疗效,低、中、高剂量组抑瘤率达30%~50%以上,抗肿瘤作用有一定量效关系,虽然作用小于阳性药CTX,但毒性小,安全性高。在我们另外进行的HQG 的体外免疫学研究表明,青蒿多糖具有显著的免疫促进作用。因此,青蒿多糖临床上可用于肿瘤的防治,具有良好的开发前景。
       我国青蒿资源丰富,但目前主要使用青蒿素类成分及挥发油,提取过后的残渣可以用来作为提取青蒿多糖的原料。青蒿多糖的研究,在开发抗肿瘤药物的同时,充分利用了青蒿药材资源,为巨大的青蒿产业产生的大量残渣提供了很好的综合利用途径。
       【参考文献】
           [1]陈立军,靳秋月,于利人,等.青蒿素及其衍生物抗肿瘤研究进展[J].中草药,2005,36(11):161.
       
       [2]李菌,周慧君.二氢青蒿素抑制K562细胞血管内皮生长因子的表达[J].药学学报,2005,40(11):81.
       
       [3]李鸿珠,徐长庆,韩丽萍,等.青蒿素对大鼠血管平滑肌肌张力的影响[J].中草药,2005,36(5):97.
       
       [4]李世辉,潘 崚,薛 芳.青蒿琥酯对SP2/0骨髓瘤细胞的强效增殖抑制及促凋亡作用[J].中成药,2007,29(3):127.
       
       [5]朱立平,陈学清. 免疫学常用实验方法[M].北京:人民军医出版社,2000:1.

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