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       【摘要】 
       目的测定都江堰市不同树龄厚朴根皮中所含厚朴酚、和厚朴酚含量，试图为厚朴质量评价、遗传改良及合理采收提供理论依据。方法应用高效液相色谱法测定，色谱柱为Nucleosil C18（5 μm）键合相填充柱；流动相为甲醇-水（78∶22）；流速为1 ml·min-1，检测波长为294 nm，柱温为20℃。结果厚朴酚含量在树龄25年时达到最大值为9.2%，和厚朴酚含量在树龄30年左右时达到最大值为7.96%。结论根皮中厚朴酚、和厚朴酚的含量均与植物的生长发育年龄有关。厚朴药材的最佳采收期应在20～30年间。
       【关键词】  厚朴；厚朴酚；和厚朴酚；含量
       Study on the Contents of Magnolol and Honokiol from Different Ages and Roots of Magnolia officinalis
       LIAO Hao, TONG Zhiping, FENG Peijie
       （Department of Bioengineering， Southwest Jiaotong University， Chengdu 610031，China）
       Abstract:ObjectiveTo determine the contents of magnolol and honokiol from different ages of Magnolia officinalis roots in Dujiangyan by HPLC method and to provide a theoretic basic for quality assessment,genetic improvement and rational picking of magnolia officinalis.MethodsNucleosil C18 (5 μm,250 mm×4.6 mm) was used.The mobile phase consisted of methanol,water (78∶22).The detection wavelength was 294 nm.The temperature of column was 20℃.ResultsThe content of magnolol was 9.2% when the tree was 25 years old,the content of honokiol was 7.96% when the tree was 30 years old.ConclusionThe results show that the contents of magnolol and honokiol relate with the age of the tree.The best time to reap is 20 to 30 ages of the tree.
       Key words:Magnolia officinalis;   Magnolol;   Honokiol;   Content
       
       厚朴（Magnolia officinalis Rehd. et Wils.）为木兰科木兰属植物，是我国特有的珍贵中药材，主要分布于我国的四川、湖北、浙江、湖南、贵州、云南、广东等地。自古以来，川朴一直被视为厚朴中的上品［1］。但不同产地的厚朴质量存在显著性的差异，且同一种源个体间的差异则更大。正品药用厚朴为厚朴的根皮、干皮和枝皮，其具有温中下气、燥湿消痰、中枢镇静、抗痉挛、抗溃疡、抗肌肉松弛以及抗链球菌等多方面的药理作用，发挥这些作用的主要有效成分是厚朴酚（magnolol）、和厚朴酚（honokiol）以及 β - 桉叶油醇（β - eudesmol）等［2，3］。厚朴酚、和厚朴酚含量的高低是衡量厚朴质量的一个重要标准。《中国药典》2005年版规定药用厚朴所含有效成分厚朴酚、和厚朴酚总量不得少于2.0%［2］。由于厚朴一般需生长15～20年才能剥皮供药用，而剥皮后树即死亡，供药长期供不应求，导致药材过度和不适当采收，人工栽培成为该药材的主要来源，药材质量很不稳定。
       
       都江堰市拥有特殊的地理环境、优良的厚朴种源，人工栽培条件得天独厚。据四川药检所统计现人工种植厚朴近6670 ha。本文根据栽培时间和“树皮年轮测定树龄法”［4］，测定厚朴树龄后，利用高效液相色谱法测定都江堰不同树龄厚朴根皮中厚朴酚与和厚朴酚的含量，分析这两种有效成分的动态分布规律，为厚朴的合理采收和质量控制提供理论依据，对都江堰厚朴种植的规范化提供一定的参考。
       1  仪器与材料
       1.1  仪器日本岛津LC-10AT VP型高效液相色谱仪；SPD-M10A VP型紫外可见检测器；VP-OPS型色谱柱；CTO-10AS型柱温箱。
       1.2 材料不同树龄厚朴的根采自川朴的主产区都江堰市虹口乡并进行分类学鉴定。样品采收按厚朴常规采收法，剥取不同植株的根皮阴干，用微型粉碎机粉碎后过40目筛，60 ℃下于红外干燥箱中干燥4 h，移入干燥器中保存，即得实验样品。10年以下树龄的厚朴为人工栽培林，树龄以播种时间推算，10年以上树龄的厚朴采用徒手切片法制备样品横切片，染色后显微镜下观察，根据纤维束环带的数目确定其年龄。
        厚朴酚、和厚朴酚标准品由河南省药品检验所提供，甲醇为色谱纯，水为重蒸水。
       2  方法与结果
       2.1  样品及对照标准品溶液的制备
       2.1.1  样品溶液的制备精密称取1～12号样品0.2 g置具塞锥形瓶中，加入25 ml甲醇，摇匀，密塞浸渍72 h，移取提取液5 ml，摇匀，定容于25 ml容量瓶中即得。
       2.1.2  对照标准品溶液的制备精密称取厚朴酚标准品4.0 mg与和厚朴酚标准品2.4 mg，分别置于10 ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀即得。
       2.2  色谱条件色谱柱为Nucleosil C18（键合相填充柱（250 mm×4.6 mm ，5 μm）；流动相为甲醇-水（78∶22）；流速为1 ml·min-1，检测波长为294 nm，柱温为20℃。
       2.3  样品测定分别精密吸取样品及对照标准品溶液各10 μm，在上述色谱条件下注入高效液相色谱仪，测定，以外标法计算样品中厚朴酚及和厚朴酚含量。结果见表1。根据实验结果绘出都江堰不同树龄厚朴根皮中厚朴酚、和厚朴酚及总酚含量的分布曲线，见图1～3。表1  不同树龄厚朴根中酚的含量（略）
       3  讨论
        如图1、图2所示，根皮中厚朴酚、和厚朴酚的含量均与植物的生长发育年龄有关。树龄25年以下的厚朴，厚朴酚与和厚朴酚的含量随树龄的增大而增加，但厚朴酚含量增加较快，和厚朴酚含量增加缓慢，均在25年左右达到最高值；树龄25年以上，厚朴酚与和厚朴酚含量呈下降趋势，说明厚朴次生代谢已经由盛而衰。厚朴质量优劣是以总酚作标准区分的。从图3可以看出，厚朴药材的最佳采收期应在20～30年间。
        厚朴质量也与其来源部位有关，来源于同株厚朴不同部位的厚朴药材，厚朴酚与和厚朴酚含量存在显著差异，根皮的酚含量在25年左右为最高。而该药材其他部位酚含量特别是药用的干皮和枝皮酚含量在何时能达到最高含量也值得探讨。因此，厚朴药材收购和深加工时，以来源部位收购或分类加工是比较合理的［5］。
        由于《中国药典》2005版规定正品药用厚朴以总酚含量不得少于2.0%作标准，若仅以满足酚含量为标准，都江堰2年以上树龄的厚朴均可入药，但厚朴中除含酚类化合物外还含有β-桉叶油醇（β-eudesmol）、ρ-聚伞花素（ρ-cumene）、D-柠檬烯（D-Limonene）等挥发油组成以及木兰箭毒碱(Magnocurarine)、木兰碱(Magnoflorine）、武当木兰碱（Magnosprengerine）等生物碱，它们具有很强的生理活性，是厚朴不可忽视的药效成分［6］。都江堰不同树龄厚朴不同部位中挥发油、生物碱含量与树龄的关系我们正在研究中，其结论将是厚朴采收期是否提前的依据之一。另外，从经济效应的角度，虽然树龄小的厚朴栽培时间短，但厚朴生物量小，树龄大的厚朴生物量高，但栽培时间长，因此，在确定厚朴的最佳采收期时应综合考虑厚朴有效成分、厚朴生物量等因素的动态分布，以确定厚朴的最佳采收期。
       【参考文献】
         　　［1］斯金平,童再康,曾燕如. 厚朴种质资源评价与利用研究［J］.中药材， 2002，25(2)：79.
       
       ［2］国家药典委员会. 中国药典，Ⅰ部［S］. 北京: 化学工业出版社，2005：176.
       
       ［3］藤田路一. 药学杂志(日)［J］.1973,93(4)：415，429.
       
       ［4］赵中振,唐晓军,胡 梅. 树皮年轮的研究及其意义［J］.北京林业大学学报,1990,12(4)：127.
       
       ［5］李弘弢，黄念桃，王 蓉. 薄层扫描法考察不同产地厚朴叶中厚朴酚及和厚朴酚的含量［J］.时珍国医国药,2004，15(3):141.
       
       ［6］宋万志,崔建芳,章观德. 厚朴类有效成分的含量测定及高效液相色谱图［J］.天然产物研究与开发，1990，2(4):1.