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复尔康注射液挥发性成分的气相色谱-质谱联用分析
作者:何兵 ,冯文宇,田吉,李春红,艾洪兵    
作者单位:泸州医学院药学院药物研究所,四川 泸州 646000

《时珍国医国药》 2008年 第5期

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       【摘要】 
       目的对复尔康注射液中挥发性成分进行分析研究。方法用水蒸气蒸馏法提取复尔康注射液挥发油,通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对其成分进行分析鉴定,并用面积归一化法测定其相对百分含量。 结果共得到47个组分,鉴定出其中42种化合物,约占总量的98.52%,其中含量最高的为蒿酮(38.12%),其次为右旋樟脑(16.05%)、桉油精(8.15%)、大根香叶烯D(6.54%)、丁香烯(4.08%)、2,6-二甲基-3,7-辛二烯-2-醇(3.21%)等。结论该法分离效果良好,所鉴定组分较准确,为复尔康注射液的深入研究提供科学依据。
       【关键词】  复尔康注射液;气相色谱-质谱联用
       Analysis of Chemical Composition in Volatile Oil of Fuerkang Injection by GC-MS
       HE Bing,FENG Wenyu,TIAN Ji,LI Chunhong,AI Hongbing
       Institute of Materia Medica of Luzhou Medical College,Luzhou, Sichuan 646000,China
       Abstract:ObjectiveTo analyze the compositions of volatile oil from Fuerkang Injection. MethodsThe volatile oil was extracted from Fuerkang Injection through steam distillation method. GC-MS was used for the determination of volatile oil.The relative contents of constituents were determined by area normalization method. Results42 among the 47 separated constituents were identified,which constituted 98.52% of the total amounts,Artemisia ketone was the richest(38.12%),the second were D-Camphor(16.05%),Eucalyptole(8.15%),Germacrene D(6.54%),Caryophyllene(4.08%),2,6-Dimethyl-3,7-octadien-2-ol(3.21%)etc. ConclusionThis method is provided with good separation effect.It is excellent to separate and determine the components of volatile oil from Fuerkang Injection,and offers scientific foundation in further study of Fuerkang Injection.
       Key words:Fuerkang Injection;  GC-MS
       
       复尔康注射液是由我所研制的中药新药,该药是由青蒿油及维甲酸制成的脂质体注射液,经药效实验证明对肝癌、肺癌、白血病有抑制癌细胞增殖、诱导分化、促进凋亡的作用,对肝癌小鼠有明显延长生命的作用。方中青蒿油为挥发性成分,现代药理学研究表明青蒿油具有诱导肝癌细胞凋亡作用[1],本实验采用水蒸气蒸馏法提取复尔康注射液中的挥发性成分,并用GC-MS方法鉴定了其中所含化学成分的种类及相对含量,初步解析出了复尔康注射液药效作用的物质基础,并为进一步研究其质量标准、指纹图谱提供了科学依据。
       1   仪器与材料
        岛津GC17A-QP5050型GC-MS联用仪;CLASS VP 5000工作站,NIST 98 谱库。复尔康注射液(自制);试剂均为分析纯。
       2  方法
       2.1  样品液的制备取复尔康注射液50 ml,加水至100 ml,置挥发油测定器的烧瓶中,加氯化钠适量至饱和,自测定器上端加水使充满刻度部分,并在测定管中加入醋酸乙酯2 ml,加热至沸,并保持微沸,提取3 h,收取醋酸乙酯层,加少量无水硫酸钠脱水,即得。
       2.2  色谱条件色谱柱:DB-1(30 mm×0.25 mm,0.25 μm)弹性石英毛细管柱;载气:He;分流比:30∶1;流速:1.0 ml·min-1;柱前压:49 kPa;进样口温度:280℃;程序升温:初始温度40℃,保持12 min,以4 ℃·min-1速率升温至70℃,保持10 mim,再以6 ℃·min-1速率升温至230℃;进样量0.1 μl。
       2.3  质谱条件电离方式:EI,电子能量:70 eV ;离子源温度:200℃;发射电流:0.2 mA;电子倍增电压:2.4 kV;扫描质量范围:30~600 amu;扫描间隔0.5 s。
       3  结果
        按上述实验条件进样,得到复尔康注射液的总离子流图,对总离子流图中的各峰经质谱扫描后得到质谱图,用质谱数据库NIST检索,同时采用人工谱图解析,按各色谱峰的质谱裂片图与文献核对,查对有关质谱资料[2,3],并对基峰、质荷比和相对丰度等方面进行直观比较,同时还对一些主要组分采用标准物质对照,分别对各色谱峰加以确认,综合各项分析鉴定,从而确定复尔康注射液挥发油中的化学成分,并采用峰面积归一化法测定各成分相对百分含量,结果见表1。表1  复尔康注射液挥发油GC-MS分析结果(略)
       4  讨论
        本文通过GC-MS联用分析了复尔康注射液挥发油的化学成分,共分离得到47个化合物,鉴定出其中42个化合物,已鉴定的化合物占总馏出组分的89.36 %,已鉴定的成分占色谱总馏出峰面积的98.52%。
        在已鉴定的化合物中,含量最高的是蒿酮,相对含量38.12%,其次为右旋樟脑,相对含量16.05%。相对含量在1%以上的有:蒿酮、右旋樟脑、桉油精、大根香叶烯D、丁香烯、2,6-二甲基-3,7-辛二烯-3-醇、2,6-二甲基-1, 5,7-辛三烯-3-醇、2,6-二甲基-3, 5,7-辛三烯-2-醇、4-萜烯醇、蒿醇、β-月桂烯、桃金娘烯醇、异香橙烯环氧化物。通过以上的特征图谱,初步确定了复尔康注射液中挥发油成分的种类及相对含量,并为进一步研究其质量标准、指纹图谱提供了科学依据。
       【参考文献】
           [1]李燕,李明远,王 林,等. 青蒿油诱导肝癌细胞凋亡的实验研究[J]. 四川大学学报(医学版),2004,35(3):337.
       
       [2]中国质谱学会有机专业委员会.香料质谱图集[M].北京:北京科学出版社,1992:1.
       
       [3]Heller S R, Milne G W A. EPA/NIH Mass Spectral Database[M]. Washington: US Government Printing Office,1978: 1.

经典中医古籍

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穴位数据库(附图片)