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       【摘要】 
       目的测定华盖散传统汤剂与颗粒汤剂中苦杏仁苷的含量。方法采用高效液相色谱（HPLC）法。选用Agilent XDB-C18柱，流动相为以甲醇-水（23∶77），检测波长为215nm波长。结果苦杏仁苷的含量在传统汤剂与颗粒汤剂中有显著性差异，颗粒汤剂中平均含量大于传统汤剂中平均含量。结论 该测定方法简便、准确，重复性良好，方中其它成分对测定无干扰。
       【关键词】  华盖散；传统汤剂；颗粒汤剂；苦杏仁苷
       Comparison of the Content of Laetrile between the Traditional Decoction and Kernel Decoction of Huagai San
       ZHAO Yang, JIN Fengyun, HE Zhuying, LIAO Wei, LIANG Guangyi
       1.West China School of Pharmacology, Sichuan University, Sichuan Chengdu 610041,China;
       2.Guiyang College of TCM, Guizhou Guiyang 550002,China
       Abstract：ObjectiveTo determine the Laetrile in the traditional decoction and kernel decoction of  Huagai San.MethodsHPLC was used. An Agilent XDB-C18 column was used, the mobile phase was methanol-water (23∶77), the detection wavelength was 215nm. ResultsThe content of Laetrile in traditional decoction and kernel decoction had obvious discrepancies, the average content in kernel decoction was more than that in traditional decoction. ConclusionThe method is simple,convenient，exact and reproducible, the other ingredients do not have interferences for the determination.
       Key words：Huagai San;  Traditional decotion;  Kernel decoction;  Laetrile
       
       华盖散出自《太平惠民和剂局方》［1］，由麻黄、苦杏仁、炙甘草、陈皮、桑白皮、赤茯苓、紫苏子7味中药组成。主治肺感寒邪，咳嗽上气，胸膈烦满，项背拘急，声重鼻塞，头昏目眩，痰气不利，呀呷有声。近年来单味中药精制颗粒逐渐在临床上推广应用，传统中药方剂与其两者之间的配伍及使用结果是否相近，是中药配方颗粒能否长期在临床上应用需要解决的关键问题。本论文以中药复方华盖散中的有效成分苦杏仁苷为指标成分，探索中药复方汤剂不同制法对其有效成分溶出量的影响，为单味中药精制颗粒应用于临床提供一些理论依据。
       1  仪器与试药 
        Agilent高效液相色谱仪（包括真空脱气机、四元泵、自动进样器、DAD 检测器)；苦杏仁苷对照品（中国生物制品鉴定所，批号：110820-200403）；乙腈（色谱纯）；甲醇（色谱纯）；纯净水；冰醋酸（分析纯）；醋酸铵（分析纯）。
       2 方法与结果
       2.1 色谱条件
       色谱柱为 Agilent XDB-C18柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相为甲醇-水（23∶77）；流速0.8 ml/min；柱温25℃；检测波长215 nm。色谱图见图1～5。
       2.2 对照品溶液的制备 
       精密称取苦杏仁苷对照品适量，按《中国药典》2005版［2］，制成浓度为0.16 mg/ml 的苦杏仁苷对照品溶液。
       2.3  供试品溶液的制备
       2.3.1 传统汤剂供试液的制备称取药材粉末（粗粉），其中麻黄9.0 g，杏仁9.0 g，炙甘草6.0 g，桑白皮9.0 g，紫苏子9.0 g，陈皮9.0 g，茯苓9.0 g，浸泡20 min，加水至药面上4 cm，沸后30 min，滤过，滤渣加水至药面上4 cm，沸后20 min，滤过，合并两次滤液，浓缩，干燥。 精密称取干浸膏粉约0.2 g，置于具塞三角锥形瓶中，精密加入甲醇25 ml，称重，超声提取30 min，取出，放冷，补至原重，滤过，续滤液过0.45 μm 微孔滤膜，得苦杏仁苷供试品溶液。
       2.3.2  颗粒汤剂供试液的制备
       称取杏仁药粉，加8倍量水煎煮两次，60 min/次，合并两次煎液，制成杏仁煎液，干燥。精密称取干浸膏粉适量，同供试品的制备方法制得颗粒汤剂供试品溶液。
       2.4 线性关系精密吸取苦杏仁苷对照品溶液适量5份，分别置于10ml容量瓶中，稀释至刻度，制成不同浓度的苦杏仁苷对照品溶液。精密吸取相应量注入色谱柱，测定峰面积，以峰面积（A）对进样量（C）作线性回归，回归方程为A=1143.85C-3.814 85，r = 0.999 7，苦杏仁苷在0.16～0.80 μg范围内线性关系良好。
       2.5 精密度实验精密吸取同一苦杏仁苷对照品溶液，连续进样5次，测定峰面积，RSD为0.18%，表明精密度良好。
       2.6  稳定性实验
       取供试品溶液，按照“2.1”项色谱条件，分别于0，2，4，6，8 h进样，测定峰面积，传统汤剂和颗粒汤剂中苦杏仁苷峰面积的RSD分别为2.48%，2.22%。说明供试品溶液在8h内稳定。
       2.7  重复性实验 按“2.3”项下方法制备供试品溶液5份，按照“2.1”项下色谱条件进样测定，传统汤剂和颗粒汤剂中苦杏仁苷峰面积的RSD分别为0.93%，2.07%，说明重复性良好。
       2.8 加样回收率实验精密称取已知含量的颗粒汤剂干浸膏粉9份，按苦杏仁苷含量的80%，100%，120%加入苦杏仁苷对照品溶液，按照“2.3”项下方法制备供试品溶液，测定峰面积，计算回收率。结果见表1。表1  加样回收率实验测定结果（略）
        
       2.9 样品测定精密吸取传统汤剂和颗粒汤剂供试品溶液，分别进样，测定峰面积，用外标法计算传统汤剂和颗粒汤剂中苦杏仁苷的含量。结果见表2。表2  苦杏仁苷的含量（略）   
       采用无重复双因素方差分析比较颗粒汤剂与传统汤剂间苦杏仁苷含量的差异。结果见表3。表3  苦杏仁苷无重复双因素方差分析（略）
        由表3可知，华盖散传统汤剂与颗粒汤剂之间，苦杏仁苷的含量有显著性差异。不同处理方法对苦杏仁苷的含量有一定的影响，采用传统煎煮方法得到的传统汤剂其平均含量低于颗粒汤剂的平均含量。
       3 讨论
        本实验采用HPLC法测定华盖散中有效成分苦杏仁苷的含量，在文献报道［3，4］的基础上结合《中国药典》（2005版）的记载，选定适合的流动相测定该成分，其与杂质峰均能达到基线分离，方法简单可行，重复性好。
       
       华盖散颗粒汤剂中苦杏仁苷的含量高于传统汤剂中的含量，采用现代统计方法分析其所得数据，得出两种汤剂之间其含量存在着显著性差异，可能是传统汤剂在煎煮过程中药材中的化学成分相互作用，从而影响了有效成分的溶出，此问题有待进一步讨论与探讨。
       【参考文献】
         　　［1］宋·太平惠民和剂局(编),刘景源(点校).太平惠民和剂局方［M］.北京：人民卫生出版社,1985：140.
       
       ［2］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京:化学工业出版社,2005：140.
       
       ［3］甄攀. HPLC测定几种杏仁中苦杏仁苷的含量［J］ .中草药, 2003,34(12):1144.
       
       ［4］吴昭晖,罗佳波,胡晓添. HPLC法研究配伍对麻黄汤中苦杏仁苷含量的影响［J］.中草药,2004,35(3):269.