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       【摘要】 
       目的通过对2型糖尿病阴虚证患者、甲亢病阴虚证患者血清一氧化氮合酶（NOS）活性的检测，探讨NOS活性与阴虚证的关系及意义。方法分别检测2型糖尿病阴虚证患者、甲亢病阴虚证患者及正常对照组血清NOS的含量，并进行统计学分析。结果糖尿病阴虚证患者、甲亢病阴虚证患者NOS均显著高于正常对照组，而阴虚证两组间无显著差异。结论2型糖尿病和甲亢病患者的NOS可能对阴虚证有重要意义，NOS活性增强可能是阴虚证的病理基础之一。
       【关键词】  糖尿病； 甲状腺功能亢进症；阴虚证；一氧化氮合酶
       Research on the NOS Activity Level in the Serum of Patients with  Yin Deficiency Syndrome of NIDDM and Hyerthyroidism
       LIU Yanyun, CHENG Zhaozhi
       ( Department of Diagnostics of TCM,Hubei College of TCM,Wuhan 430065，China)
       Abstract：ObjectiveTo study the pathological foundation and essence of Yin deficiency syndrome in TCM by investigating the activity of nitric oxide synthase (NOS) of the patients diagnosed as Yin deficiency syndrome in both non-insulin-dependant diabetes mellitus (NIDDM) and hyperthyroidism.MethodsThe activity of serum NOS was detected in Yin deficiency syndrome patients of  NIDDM, Yin deficiency syndrome patients of hyperthyroidism and control group, respectively. The students" test was adopted for statistical analysis. ResultsThe serum NOS activity in the cases of both NIDDM-Yin deficiency group and hyperthyroidism-Yin deficiency group were higher than that in control group（P<0.05）, however, there was no significant difference between NIDDM-Yin deficiency group and hyperthyroidism-Yin deficiency one. ConclusionNOS activity  in the patients suffered from NIDDM and hyperthyroidism is possibly significant with Yin deficiency syndrome, higher activity of  NOS may be the one of the pathological foundations of Yin deficiency syndrome.
       Key words：Diabetes mellitus (DM);  Hyerthyroidism;  Yin deficiency syndrome;   Nitric Oxide Synthase (NOS)
        一氧化氮合酶（nitric oxide synthetase，NOS）是一氧化氮（NO）的催化酶。NO是一种兼有第二信使和神经递质的气体形式的自由基，具有多种生物学活性，参与多种疾病的生理病理过程，包括免疫调节、松驰平滑肌、神经介质及细胞毒性作用等［1］。由于NO的化学性质极不稳定，半衰期极短（仅3～5 s），体内NO生成的主要限速因素是NOS，故依赖于对NOS的研究来了解NO的分布和量。本研究旨在通过对2型糖尿病阴虚证患者、甲亢病阴虚证患者和健康体检者血清NOS活性的检测，探讨NOS活性与阴虚证的关系及意义。
       1  材料与方法
       1.1  研究对象 
       收集200503～08湖北省中医医院门诊及住院患者60 例。其中2型糖尿病阴虚证患者30 例，男15例，女15例，平均年龄（50.93±12.53）岁；甲亢病阴虚证患者30例，男15例，女15例，平均年龄（35.50±13.86）岁。诊断标准参照卫生部药政局制定的“中药新药治疗消渴病(糖尿病)、甲状腺功能亢进病的临床研究指导原则”［2］。分别设为糖尿病阴虚组和甲亢病阴虚组。另收集健康体检者30 例，男15例，女15例，年龄（36.10±14.17）岁，经临床、实验室检查，均无急慢感染性疾病、糖尿病、甲亢及其它自身免疫病的家族史，设为正常对照组。
       1.2 血清NOS的测定 
       所有对象均于清晨空腹抽血并2 h内分离血清， -20℃保存备用并于2周内检测NOS的含量。NOS的测定根据NOS催化L-精氨酸和分子氧反应生成NO，NO与亲核性物质生成有色化合物，在530 nm波长下测定吸光度，根据吸光度的大小可计算出NOS活力。试剂盒由南京建成生物工程研究所提供，严格按说明书操作。
       1.3 其它分析方法 
       血清FT3，FT4的测定均采用化学发光法，由美国德普DPC公司生产的全自动化学发光免疫分析仪检测；空腹血糖（FPG）测定采用己糖激酶法，由东芝TBA-120KF全自动生化分析仪检测。
       1.4  统计学处理 
       实验数据用±s表示，采用计算机统计软件SPSS12进行统计学分析。
       2  结果
       2.1  血清NOS，FT3 ，FT4，FPG测定结果　
       各组检测结果见表1。统计学分析表明，糖尿病阴虚组与正常对照组比较，NOS有显著性差异（P<0.05）；甲亢病阴虚组与正常对照组比较，NOS亦有显著性差异（P<0.05）；而糖尿病阴虚组与甲亢病阴虚组比较，NOS差异无显著性（P＞0.05）。表1  各组患者血清NOS及相关检测指标含量的比较(略)
       2.2 相关性分析　
       结果见表2。统计学分析表明，甲亢病阴虚证患者体内NOS的升高分别与血清中FT3，FT4呈正相关（P<0.01）；糖尿病阴虚证患者NOS的升高与FPG含量呈正相关（P<0.01）。表2  各组患者NOS与FT3，FT4，FPG相关分析（略）
       3  讨论
        中医学认为，阴阳失调是疾病发生的基本病机,阴虚证是中医最常见、最基本的证型之一，因此，探讨阴虚证的实质不仅对阴虚证及其相关疾病的诊疗具有重大的理论和临床意义，而且可作为全部证候实质研究的突破口。
        NOS是内源性NO生成的限速酶。NO是存在于细胞内外液中的气体型新型信使，具有广泛的生物学效应，包括免疫调节、松弛平滑肌、神经介质及细胞毒性作用等［3］。NO的生成量与NOS的活力水平密切相关，体内决定NO含量的主要因素为NOS。
        NOS为黄素类蛋白质，由两个相同亚基组成二聚体。NOS单体N端为氧化酶区，C端为还原酶区。NOS是多功能氧化还原酶系，分两类，三种同功酶：第1类为构成型NOS（constitutive NOS，cNOS）包括神经元型（neuronal NOS ，nNOS，Ⅰ型）和内皮细胞型 （endothelial NOS，eNOS，Ⅲ型）；第2类为诱导型iNOS（inducible NOS，Ⅱ型）。nNOS和iNOS分布于胞浆，eNOS存在于细胞膜。cNOS活性依赖于Ca/CaM，引起NO短暂释放，主要在血管扩张和神经传导中发挥作用。eNOS产生的NO可扩张血管、调节血压、改变局部血流、抑制血小板聚集、抗平滑肌细胞增殖。nNOS产生的NO以递质形式参与神经信息传导和内分泌调节。iNOS活性不依赖于Ca/CaM，需要诱导因子如内毒素、γ干扰素、白介素-1等存在。iNOS的表达为时间依赖性，可引起NO长期大量释放，参与病理生理过程，在炎症、免疫反应中起细胞毒与细胞抑制作用。
       
       根据中医临床实践，2型糖尿病和甲亢病患者辨证分型中以阴虚证较多见也最典型，两者的症状和体征亦大体一致。中医学认为“有诸内必形诸外”，故其病理基础必有相同之处；同时，由于病种不同，两者同中定有异。本研究结果表明，2型糖尿病阴虚证患者、甲亢病阴虚证患者NOS均显著高于正常对照组（P<0.05），而阴虚证两组间差异无显著性。提示NOS可能对阴虚证有重要意义，NOS活性增强可能是阴虚证的病理基础之一。其确切的机理尚待进一步探讨。同时，血清NOS活性与甲亢病阴虚证患者FT3，FT4，糖尿病阴虚证患者FPG含量密切相关，尚待探讨。
       【参考文献】
         　　［1］Busse R,Minlsch A,Fleming F,et al.Mechanism of nitric oxide release from the vascular endothelium. 1993,87(Suppl V):18.
       
       ［2］中华人民共和国卫生部药政局.中药新药临床研究指导原则，第1辑［S］.1993：215.
       
       ［3］Moncada S,Palmer RM J,Higgs EA,etal.Nitric oxide:physiogy,pathophysiology,and pharmacolgy［J］.Pharmacological Reviews,1991,43(2)：109.