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       【摘要】 
       目的观察竹节人参总皂苷的抗炎作用，以确定竹节人参抗炎作用的活性部位。方法通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验及醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验,观察竹节人参总皂苷对炎症的影响。结果竹节人参总皂苷高、低剂量组对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的抑制作用，与生理盐水组比较有显著性差异（P<0.01），对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的抑制作用与生理盐水组比较也具有显著性差异（P<0.05，P<0.01）。结论竹节人参总皂苷具有明显的抗炎作用，是竹节人参发挥抗炎作用的主要活性部位。
       【关键词】  竹节人参总皂苷； 活性部位； 抗炎作用； 药理作用
       Study on the Antiinflammatory Effects of Total Panax japonicus Saponins
       WEN Dejian, CHEN Guodong,ZHANG Cuilan,DONG Xinggao,XIAO Benjian
       1.Medical College of Hubei Institute for Nationalities, Enshi 445000,China；
       2.Affiliated Hospital of Hubei Institute for Nationalities, Enshi 445000, China
       Abstract:ObjectiveTo study anti-inflammatory effects of total Panax japonicus saponins(tPJS).MethodsEar edema induced by dimethylbenzene and abdominal capillary permeability induced by acetic acid in mice were used to study the anti-inflammatory effects. ResultstPJS ( 1 g/kg and 2g∕kg)could inhibit ear edema(P<0.01)and reduce the abdominal capillary permeability(P<0.05，P<0.01).ConclusiontPJS has anti-inflammatory effects, and it is the main active part of Panax japonicus on anti-inflammatory effects.
       Key words:Total Panax japonicus(tPJS);   Active part；  Anti-inflammatory Effect;   Pharmacological activities
       
       竹节人参为五加科植物竹节参Panax  japonicus C.A.Mey.的干燥根茎，为常用中药，味甘、微苦，性温，归肝、脾、肺经，具滋补强壮、散淤止痛、止血祛痰的功效。用于病后虚弱、劳嗽咯血、咳嗽痰多、跌扑损伤［1］。研究表明竹节参复方制剂对小鼠炎症模型具有明显的抗炎作用［2］，而关于其作用的物质基础未见相关报道。为了探讨竹节人参抗炎作用的活性部位，本实验对竹节人参主要成分竹节人参总皂苷（total Panax japonicus saponins，tPJS）进行了抗炎作用研究，以便为竹节人参的临床应用和进一步研究开发提供理论依据。
       1  器材与方法
       1.1 药材 
       竹节人参由宣恩民丰药业有限公司提供。
       1.2 动物 
       昆明种小鼠，18～22 g，湖北省实验动物中心提供。
       1.3 药物与试剂
       二甲苯(AR，北京化学试剂厂)；阿司匹林（南京第二制药厂，批号20060404）；0.6%醋酸溶液的配制：取0.6 ml冰醋酸(AR，武汉市江北化学试剂有限责任公司)加入100 ml蒸馏水中搅匀即得，备用；2%伊文思蓝(Ffluka进口分装，上海化学试剂供应站经销)；生理盐水的配制：取2 g伊文思蓝加入100 ml生理盐水中搅匀即得，备用；其它化学试剂均为分析纯。
       1.4  供试药液(竹节参总皂苷水溶液)的制备
       将适量竹节参粉碎过40目筛，加甲醇浸泡过夜，超声提取2次，45 min/次，合并滤液，将滤液蒸干，再溶于水中，用乙醚提取3次，去除脂类物质，醚液弃去，水层再用水饱和的正丁醇提取4次，合并正丁醇液，用水洗3次，最后将正丁醇液减压浓缩至干，即得tPJS。取适量tPJS加水溶解，调pH至中性，G4垂熔玻璃漏斗滤过，使成100 mg/ml水溶液。冷藏备用。
       1.5 仪器
       CQ-250超声波清洗器（上海弘兴超声电子仪器有限公司），722分光光度计（上海第三分析仪器厂）；电子分析天平（上海天平仪器厂）；6 mm打孔器。
       1.6  二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验 
       按文献［3］ 取18～20 g小鼠40只，随机分为4组，每组10只。A组（生理盐水组，给予等体积的生理盐水）、B组（阿司匹林组，给药剂量为0.2g/kg）、CH组(tPJS高剂量组)、CL组(tPJS低剂量组)。高、低剂量组按2，1g/kg分别灌胃tPJS水溶液。各组灌胃给药1次/d，连续3 d，于最后1次给药30 min后，将二甲苯0.3 ml涂于小鼠右耳正反两面，15 min后颈锥脱臼处死，用直径6 mm打孔器在左右两耳廓相同部位打孔取样，及时称重，以左右耳片重量之差为肿胀度，按下式计算抑制率，并与对照组进行比较。
       
       抑制率（%）=对照组肿胀度-给药组肿胀度对照组肿胀度×100%
       1.7  醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验
       按参考文献［4］ 取18～20 g昆明种小鼠40只，分组及给药方法同上。末次给药30 min 后尾静脉注射2%的伊文思蓝生理盐水0.01 ml/g，立即腹腔注射0.6%醋酸0.2 ml/只。20 min后，脱颈处死小鼠，剪开腹腔，用5 ml生理盐水冲洗腹腔数次，收集洗涤液，2 500 r/min离心5 min，取上清液于590 nm处比色，测定光密度值（OD值）。
       1.8  统计方法 
       各组数据以±s表示，组间差异比较用t检验，由spss11.5系统完成。
       2  结果
       2.1  tPJS对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀度的影响实验结果可见tPJS高、低剂量组对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有抑制作用，与生理盐水组比较差异有显著性，tPJS高剂量组与阿司匹林组比较无统计学意义（P＞0.05），表明tPJS对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有很好的抑制作用，其作用强度与剂量有关，剂量越大作用越明显。结果见表1。表1  tPJS对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀度的影响(略)
       2.2 tPJS对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
       实验结果可见tPJS高、低剂量组和阿司匹林组对0.6%醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性均有抑制作用, 与生理盐水组比较差异有显著性，tPJS高剂量组与阿司匹林组比较无统计学意义（P＞0.5），表明tPJS对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性有很好的抑制作用，其作用强度与剂量有关，剂量越大作用越明显。结果见表2。表2  tPJS对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响(略)
       3 讨论
        当前用于风湿病治疗的药物效果均不理想，而且毒性比较大。竹节人参在民间主要用于风湿病的治疗，以竹节人参为主的复方制剂以医院内部制剂的方式在湖北恩施临床被用于，并取得了较好的治疗效果。tPJS是竹节人参的主要成分，所以本实验对tPJS进行了提取并研究其抗炎作用，以便为竹节人参的临床应用和进一步的研究开发提供理论支持或参考。
       
       二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验和醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验是研究药物抗炎作用的常用实验方法。二甲苯可引起耳廓急性炎症水肿，醋酸可引起小鼠腹腔毛细血管通透性增加。从抗炎结果看，tPJS能抑制二甲苯诱发的小鼠耳廓肿胀和醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性增高，当给药剂量为 2 g/kg时与给药剂量为0.2 g/kg阿司匹林组比较无统计学意义，表明其作用强度相近，因此tPJS具有较好的抗炎作用，是竹节人参具有抗炎作用的主要活性部位。其作用机制可能是通过抑制毛细血管的扩张，降低通透性，使渗出减少以达到抗炎作用。
       【参考文献】
         　　［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：93.
       
       ［2］陈龙全，袁德培，孟卫星，等. 复方竹节参片镇痛、抗炎作用的实验研究［J］.江苏中医，1998，19（9）：47.
       
       ［3］徐叔云， 卞如濂， 陈 修 .药理实验方法学 ［M］.北京：人民卫生出版社，1994：719.
       
       ［4］陈奇.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1993：305.