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不同产地桦褐孔菌的傅里叶变换红外光谱法鉴别研究
作者:李承范, 姚艳红, 张敬东    
作者单位:延边大学分析测试中心,吉林 延吉 133002

《时珍国医国药》 2009年 第12期

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       【摘要】 
       目的分析不同产地桦褐孔菌的傅里叶变换红外光谱的图形及其特征吸收峰值,以期建立其鉴定标准。方法分别用石油醚、三氯甲烷、甲醇、对中、朝、俄三国产的野生桦褐孔菌进行了提取,并首次对提取物进行了傅里叶变换红外光谱法测定,对桦褐孔菌的傅里叶变换红外光谱的图谱进行分析计算。结果俄罗斯产的桦褐孔菌与吉林、黑龙江产和朝鲜产桦褐孔菌的红外谱图有明显的不同。结论上述方法可用作鉴别其品种或评价其质量的一种手段。
       【关键词】  桦褐孔菌; 傅里叶变换红外光谱; 鉴别研究
       桦褐孔菌(Phaeoporus obliquus)属担子菌多孔菌科[1],是生于桦树上的一种药用真菌。主要分布于北半球北美、芬兰、波兰、俄罗斯、中国黑龙江、吉林(长白山)、日本等地区[2]。民间作为药用,其有效化学成分已有报道[3],在波兰曾用作治疗某些肿瘤[4]。可温肺去痰、降气平喘、利尿消肿、治疗肿瘤等。芬兰科学家的研究则进一步表明该菌具有抗肿瘤作用[5]。日本学者曾报道其水提取物能抑制爱滋病毒[6]。对于它的研究已引起美国、日本、韩国等科学家的广泛重视,因此对其真伪鉴别及产地的鉴定极为重要。已对桦褐孔菌的X-衍射谱图进行鉴定[7],但尚未见到对桦褐孔菌的红外光谱鉴定的报道。用傅里叶变换红外光谱法鉴别是分析识别中药材的一种有效手段[8],本文首次用傅里叶变换红外光谱对不同产地桦褐孔菌的提取物成分的差异做了比较,期望为不同产地间区别或质量评价提供一种有效的手段。
       1  器材
       1.1  试剂 
       石油醚、三氯甲烷、甲醇(均为分析纯,天津科密欧化学试剂有限公司),水为蒸馏水。
       1.2  仪器IRP restige-21傅立叶变换红外光谱仪(日本岛津公司);使用IR solution verision 1.30软件。RE-52型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂),DZF-6210型真空干燥箱(上海新苗医疗机械制造有限公司),GZX-DH-202-1-BS电热恒温干燥箱烘箱(上海贺德实验设备有限公司),索氏脂肪提取器。
       1.3  材料4个桦褐孔菌样品均购置于延吉市长白山特产品经营部,由吉林省延边特产研究所金成一鉴定为桦褐孔菌。见表1。表1  桦褐孔菌样品的编号、产地及来源(略)
       2  方法
       2.1  以石油醚为溶剂提取化学组分选择4种粉碎的桦褐孔菌各20g,分别置入到500 ml索氏提取器各加入石油醚400 ml,水浴加热回流6 h。共提取3次,在旋转蒸发仪上减压蒸馏回收溶剂,真空干燥4 h得到淡黄色固体。
       2.2  以三氯甲烷为溶剂提取化学组分石油醚提取的4种滤渣桦褐孔菌分别置入到500 ml索氏提取器各加入氯仿400 ml,水浴加热回流6 h。共提取3次,在旋转蒸发仪上减压蒸馏回收溶剂,真空干燥4 h得到褐色固体。
       2.3  以甲醇为溶剂提取化学组分氯仿提取的四种滤渣桦褐孔菌分别加入到500 ml索氏提取器各加入甲醇400 ml,水浴加热回流6 h。共提取3次,在旋转蒸发仪上减压蒸馏回收溶剂,真空干燥4 h得到深褐色固体。
       2.4  IR 工作条件光谱分辨率2~64 cm-1,测量范围7 800~240 cm-1。
       2.5  样品的测定原样品用粉碎机粉碎后,过筛与石油醚、三氯甲烷、甲醇提取物一起,按样品与KBr比例为1∶100取样压片。扫描测定红外光谱,每个样品测图谱各3次。
       3  结果
       3.1  原样的红外光谱分析比较见图1~2及表2。表2  原样在红外光谱图中的吸收率(略)
       
       3.2  石油醚提取物的红外光谱分析比较4个品种的红外图谱谱形相近(参见图2及表3),在3 100~2 500 cm 范围内,1~4号都在2 860 cm-1、2 930 cm-1 、3 420 cm-1处有3个吸收峰。2 500~1 200 cm-1范围内,1 710~1 730之间有强的吸收峰,在1 200~1 700 cm-1之间分别有不同的吸收峰。在400~1 200 cm-1之间分别在470,540,720 cm-1左右有共同吸收峰,而在其他位置存在单独的吸收峰。表3  石油醚提取物的红外光谱吸收峰(略)
       3.3  三氯甲烷提取物的红外光谱比较在2 500~3 500 cm-1 之间,2 800~2 900 cm-1 峰强度增强,4个图谱谱形吻合,2号在3 446 cm-1 处有较强的吸收峰,1,3,4号在3 390~3 450之间出现的吸收峰强度比2号弱。在1 200~2 500 cm-1 之间,4个样品分别在1 720~1 750 cm-1 之间出现比较强的吸收锋,在2 370 cm-1 ,1 450 cm-1 ,1 370 cm-1 ,1 250 cm-1 左右共同出现较弱的吸收锋,在其他位置出现单独的较弱吸收锋。在400~1 200 cm-1 之间470 cm-1 ,720 cm-1 左右出现共同小肩锋,在其他位置出现单独小肩锋。见图3及表4。表4  三氯甲烷提取物的红外光谱吸收峰(略)表5  甲醇提取物的红外光谱吸收率(略)
       3.4  甲醇提取物的红外光谱分析比较在2 500~3 500 cm-1之间,4个样品分别在3 370~3 410 cm-1之间有较强的吸收峰,2 930 cm-1处有小肩峰。1 200~2 500 cm-1之间每个样品的吸收峰都出现明显的差异,1~4号样品分别有6,7,5,5个吸收峰,但没有一个相互重叠的吸收峰。在400~1200 cm-1之间,1号和3号分别在1 056 cm-1和1 060 cm-1处有较强的吸收峰,每个样品的吸收峰位置都不一样。见图4及表5。
       4  结论
        4个不同地区间的桦褐孔菌的原样与不同溶剂提取物的之间的红外光谱出现差异。这是因为同样的桦褐孔菌,在不同的地区环境、气候等因素,它们的化学成分之间肯定存在同样成分的数量上的差异或不同成分的差异,这些差异就是我们建立红外光谱指纹谱图的基础。根据测定的红外光谱分别对4个样品的原样和石油醚提取物、氯仿提取物、甲醇提取物进行红外光谱的比对研究,找出它们的共性和差异。
        对不同产地的桦褐孔菌的不同溶剂的提取物的红外谱图的比较研究发现,在1~4号样品的石油醚和氯仿提取物红外谱图1 700~3 500 cm-1之间图谱的轮廓大致相同,差异主要出现在400~1 700 cm-1出现的峰型和强度。
       
       甲醇提取物在2 900~3 500 cm-1之间图谱的轮廓大致相同外,其他位置差异比较明显。从红外图谱的比较研究中发现不同产地桦褐孔菌是有差异的。
       【参考文献】
           [1] 戴芳澜.国真菌总汇[M].北京:科学出版社,1979.
       
       [2]黄年来.俄罗斯神秘的药用真菌- 桦褐孔菌[J].中国食用菌2001,21(4): 7.
       
       [3]何坚, 冯孝章.桦褐孔菌化学成分的研究[J].中草药,2001,32(1):4.
       
       [4]Joan H.Winters. Econ.Botany,1960,14:225.
       
       [5]Kahlos K.,Hiltunen R. Acta Pharm,Fenn,1986,95:71.
       
       [6]Sakuma K .Aids virus multiplication inhibitor and method of culturing active ingredient thereof [P].JP,93/159,1993-07-07.
       
       [7]李承范,姚艳红. 桦褐孔菌X射线衍射Fourier图谱的鉴定[J].长春师范学院学报(自然科学版),2006,25(6):47.
       
       [8]王思宏, 尹起范, 范艳玲,等. 长白山地区几种红景天品种的傅里叶变换红外光谱法鉴别研究[J].光谱学光谱分析,2004, 24(8):957.

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