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       【摘要】 
       目的观察扶正方药对复发性念珠菌性阴道炎小鼠模型的抗真菌作用。方法对小鼠进行白色念珠菌初次感染，待小鼠自行康复后进行再次感染，建立复发性念珠菌性阴道炎模型，观察扶正方药对动物模型抗真菌治疗的干预作用。结果扶正方药组病原体转阴率100%,与常规治疗组病原体转阴率(66.7%)相比较，存在显著性差异(P<0.05)。结论扶正方药可有效提高复发性念珠菌性阴道炎小鼠模型的治愈率。
       【关键词】  扶正方药 复发性念珠菌性阴道炎
       念珠菌性阴道炎(candidal vaginitis)是妇女常见的阴道黏膜真菌感染性疾病，以白色念珠菌为主要致病菌。近年来,该病发病率呈上升趋势,部分患者反复发作，转变为复发性念珠菌性阴道炎(recurrent vulvo vaginal cadidiasis)。目前对复发性念珠菌性阴道炎的预防、治疗效果不理想。本研究通过建立复发性念珠菌性阴道炎小鼠模型,探讨了扶正方药对其的抗真菌作用。
       1  材料
       1.1  动物  清洁级，健康雌性ICR小鼠70只，鼠龄8～9周，体重（21±2）g，由河北医科大学实验动物中心提供。动物以标准饲料喂养，自然光线，自由饮食饮水。
       1.2  药物  扶正方药煎液，处方由黄芪、党参、茯苓、苍术、山药各20g组成，取诸药加水共煎，共2次，合并煎液，浓缩、滤过，滤液加蒸馏水调至药物浓度为0.125 g生药/ml，4～8℃冰箱中保存备用。
       1.3  菌液［1］ 取新传代白色念珠菌(临床株，由河北省中医院检验科从念珠菌性阴道炎患者中分离并鉴定)，接种于沙保氏液体培养基，37℃培养48 h，镜检证明念珠菌已产生假菌丝，将培养液2 000 r/min离心10 min，取沉淀加入适量PBS制成孢子液，血细胞记数仪进行孢子计数，调整菌液浓度为5.0×106个孢子/ml，4～8℃冰箱中保存备用。
       1.4  试剂  苯甲酸雌二醇注射液，1 mg/ml，上海通用药业股份有限公司生产。伊曲康唑胶囊，100 mg/粒，西安杨森制药有限公司生产，临用前用蒸馏水配成浓度为0.25 mg/ml的混悬液。
       2  方法
       2.1  白色念珠菌初次感染［2］将所有动物进行雌激素化处理，每只小鼠后腿皮下注射(sc)苯甲酸雌二醇注射液(按4 mg/kg体重给予),1次/2 d，共3次。于雌激素化处理第7天（接种日），将真菌悬液10 μl(即白色念珠菌孢子接种量为5×104个)注入小鼠阴道深处，每只小鼠接种后倒置5 min防止菌液溢出，以感染后第2天阴道分泌物镜检和培养检查均有假菌丝和芽生孢子的白色念珠菌，证实初次感染成功。
       2.2  复发性念珠菌性阴道炎模型建立［3～5］初次感染实验结束后第5周末，用无菌棉签蘸取小鼠阴道分泌物，逐只做涂片检查, 镜检阴性说明动物初次感染后恢复健康。选取镜检阴性小鼠36只随机分为模型对照组、常规治疗组和扶正方药组，每组动物12只。3组动物均于分组后第13天进行接种1次（方法同初次感染）。常规治疗组于接种当日开始灌胃伊曲康唑（按2 mg/kg体重，相当于临床常用剂量的6倍）；模型对照组于接种当日开始灌胃以相应容量的生理盐水；两组灌胃均1次/d，连续3 d。扶正方药组于分组当日开始灌胃扶正方药煎液（按10g生药/kg体重，相当于临床等效剂量的6倍），1次/d，连续15 d。
       2.3  指标观测［6］  于末次灌胃后第1天，各组小鼠行阴道涂片检查，观察白色念珠菌感染情况，计算病原体转阴率，根据白色念珠菌转阴率判断扶正方药对小鼠复发性念珠菌性阴道炎模型的影响。应用SPSS 12.0软件对数据进行统计分析，分析方法采用χ2检验。
       3  结果
          
       模型对照组病原体转阴数为0；常规治疗组转阴数为8只，转阴率66.7%；扶正方药组转阴数为12只，转阴率100%。与常规治疗组比较，扶正方药组白色念珠菌转阴率明显提高，具有显著性差异(P<0.05)。结果见表1。
       表1  扶正方药对复发性念珠菌性阴道炎小鼠模型抗真菌治疗的影响 （略）
       与模型对照组比较，△P<0.01；与常规治疗组比较，﹡P<0.05；n=12
       4  讨论
       
       念珠菌性阴道炎属于中医“阴痒”“带下”范畴。中医认为该病尤其是复发性念珠菌性阴道炎与机体正气虚衰有关，主要涉及脾肾二脏。肾阳不足则气化失司，脾运失健则不能运化水湿，致湿邪久蕴，变生带下缠绵难愈或愈后即发。治疗原则须标本兼治，祛邪与扶正并举。现代医学认为复发性念珠菌性阴道炎的发病机理与自身免疫力低下、阴道抗病力下降有关。
       
       笔者认为，体质是疾病产生的根本原因,且在疾病的发生、发展及转归过程中起主要作用, 体质差往往会导致多种疾病的发生，而决定人体正气盛衰又与脾肾功能有关。本研究自拟扶正方药，方中诸药合用可健脾、益气、补肾，扶正固本；现代药理研究证明，黄芪、党参、茯苓、苍术、山药均可增强体质，提高机体细胞免疫和体液免疫功能，有利于治疗阴道炎症，防止念珠菌性阴道炎复发。采用扶正方药灌胃，研究其对复发性念珠菌性阴道炎的动物实验尚未见报道，本研究结果显示扶正方药内服是有效干预复发性念珠菌性阴道炎的有效方法，可收到较好的远期疗效。
       【参考文献】
         　　［1］ 张 蓉,黎祥胜,胡建华，等. 金刚藤糖浆治疗细菌性阴道炎的实验研究［J］.湖北中医学院学报，2006，8（3）:14.
       
       ［2］ 张文平,马廉兰,谢水祥,等.IgY联合乳酸杆菌防治阴道白色念珠菌感染的实验研究［J］.陕西医学杂志，2006，35（2）:142.
       
       ［3］ 夏德超,丁 娟,吴 艳,等.白念珠菌阴道炎鼠模型构建的研究［J］.中国麻风皮肤病杂志，2006，22（6）:441.
       
       ［4］ Wozniak,Karen L. Wormley,Floyd L Jr. Fidel,et al.Candida-Specific antibodies during experimental vaginal Candidiasis in mice［J］.Infection ＆ Immunity,2002,70(10):5790.
       
       ［5］ 赵敬军,沈永年,陈 伟,等. 白念珠菌性阴道炎动物模型的构建［J］.中华皮肤科杂志，2002,35(5):346.
       
       ［6］ 欧阳卫权,欧润妹,范瑞强.中药灌胃对大鼠念珠菌阴道炎模型影响的实验研究［J］.岭南皮肤性病科杂志，2004，11（1）:39.