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       【摘要】 
       目的比较绿天麻、乌红天麻以及天麻不同组织中天麻素含量。方法采用高效液相色谱法，选用YMC-AQ C18（5 μm,4.6 mm×250 mm）色谱柱；乙腈∶水为流动相，检测波长220 nm进行测定。结果绿天麻天麻素含量(0.71%)明显高于乌红天麻(0.45%)；天麻抽苔后天麻素含量迅速下降。天麻茎、花、果实中均含有天麻素，天麻种子中天麻素含量较少。结论绿天麻质量优于乌红天麻。
       【关键词】  绿天麻 乌红天麻 天麻素 高效液相色谱法
       
       天麻Gastrodia elata Bl.属兰科多年生草本共生植物，以地下块茎入药。为传统名贵中药材，具有息风止痉、平抑肝阳、祛风通络等功效［1］。天麻素即对羟基甲基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷为天麻的表征性成分。但天麻素因不同品种、不同组织、不同产地、不同加工方法含量差异较大。为了更好地选育优良品种，提高天麻的内在质量。我们对不同天麻品种和天麻不同组织的天麻素含量进行了测定。
       1   仪器与材料
        1.1   仪器Waters-2690高效液相色谱仪(美国Waters公司)；YMC-AQ 4.6 mm×250 mm色谱柱；CQ250超声波振荡仪（上海超声波仪器厂）；AB204-N电子天平（瑞士Mettler Toledo公司）。
        1.2   药品乙腈（色谱纯，天津科密欧化工厂）；甲醇（分析醇，上海制剂总厂）；其余试剂均为分析纯试剂；天麻素对照品（批号 110807-200205），购于中国药品生物制品检定所；自制重蒸水。
        1.3   药材本实验所用天麻样品均来源于湖北省宜昌市天麻研究所大老岭栽培场。样品洗净后蒸30 min,50℃烘至半干（含水量30%），切片干燥，皮、茎、花、果实、种子烘干，粉碎备用。
       2  方法与结果
        2.1    样品制备
        2.1.1    对照品溶液的制备  取天麻素对照品5 mg,定溶于5 ml甲醇中。
        2.1.2    供试品溶液的制备  分别取天麻样品粉末（过四号筛）约0.8 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50 ml，称定重量，加热回流提取3 h，放冷再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，滤过，取续滤液1 ml，浓缩至近干，残渣加乙腈-水（3∶97）混合溶液溶解，转移至10 ml容量瓶中，并用乙腈-水（3∶97）混合溶液稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液供实验溶液［2，3］。
        2.2    天麻素含量测定（HPLC法）色谱条件  色谱柱为YMC-AQ C18 （4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相：乙腈-0.05%磷酸溶液，流速1 ml/min，进样10 μl，检测波长220 nm，柱温30℃。理论板数按天麻素峰计算应不低于5 000。
        2.3    标准曲线的绘制精密吸取对照品溶液1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，12，14 μl注入液相色谱仪，按色谱条件测得峰面积，以进样量（μg）为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。求出标准方程为Y= 1 548 640X + 779 971，r=0.999在4.0～14.0  μg呈良好的线性关系。
        2.4  不同品种天麻中天麻素含量的比较按“2.2”项下方法检测了绿天麻和乌红天麻天麻素含量。结果见表1。结果表明，绿天麻的天麻素含量高于乌红天麻。表1  绿天麻和乌红天麻天麻素含量
        2.5    乌红天麻不同组织中天麻素含量的比较将乌红天麻的不同组织：茎、花、果实、种子及箭麻抽苔开花前后的块茎干燥粉粹后样品按“2.2”项处理，测定其天麻素含量。结果见表2。实验结果显示，未抽苔箭麻天麻素含量最高，抽苔后天麻素含量迅速下降。天麻种子中天麻素含量较少，而天麻茎、花、果实中均含有一定量天麻素。表2  乌红天麻不同组织中天麻素含量
        2.6    绿天麻和乌红天麻的HPLC指纹图谱比较［4，5］色谱条件：色谱柱为YMC-AQ C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为乙腈∶水梯度洗脱，0～60 min乙腈∶水（5∶95）洗脱到乙腈∶水（95∶5）；60～70 min洗脱到乙腈∶水（5∶95）。重新进样，流速1 ml/min，检测波长220 nm，柱温30℃,洗脱时间70 min。
        分别精密吸取上述供试样品10μl，注入液相色谱仪测定，（见图1～2）。S为天麻素色谱峰。
        结果表明绿天麻成分比乌红天麻复杂，绿天麻中含有更多低极性成分。
       3  讨论
        实验结果表明，不同品种的天麻，主要有效成分天麻素含量差异较大。绿天麻天麻素含量明显高于乌红天麻。绿天麻芳香浓郁，临床疗效好，近年在宜昌进行推广种植，是值得大面积推广的优良品种。
        天麻在生长过程中天麻素含量分布有一定规律，立冬前后含量最高，抽苔后天麻素含量迅速下降。所以天麻采集时间应该定在立冬前后。天麻茎、花、果实中均含有一定量天麻素，而天麻种子中天麻素含量较少。天麻制种后的茎和果皮可作为提取天麻素的原料加以利用。
        绿天麻中脂溶性成分部分，具有浓郁香气，可进一步对其芳香性成分加以研究和利用。
        致谢：本实验所用天麻样品均由宜昌市天麻研究所王绍柏老师提供，特此感谢！
        
       【参考文献】
         ［1］ 雷载权.中药学［M］.上海：上海科学技术出版社，1995：264.
       
       ［2］ 国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：39.
       
       ［3］ 徐自升，丁安伟，潘 扬，等.HPLC测定天舒滴丸中天麻素的含量［J］.中成药，2004，26（3）：252.
       
       ［4］ 汪鋆值，刘小琴，叶 红，等.乌红天麻种麻高效液相指纹图谱研究［J］. 中华中医药学刊，2007，25（3）：501.
       
       ［5］ 谢培山.中药色谱指纹图谱鉴别的要领、属性、技术与应用［J］.中国中药杂志，2001,26(10)：653.