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复方仙脾合剂对肾阳虚小鼠壮阳作用及免疫功能的影响
作者:史宏,李双蕾,谢金鲜,杨桂芳,何娟,刘美莲    
作者单位:广西中医学院附属第一医院仁爱分院,广西 南宁 530001; 广西中医学院附属第一医院,广西 南宁 530022;3.广西中医学院·药学院,广西 南宁 530001

《时珍国医国药》 2009年 第8期

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       【摘要】 
       目的研究复方仙脾合剂对肾阳虚小鼠壮阳作用及免疫功能的影响。方法制备去势及药物(氢化可的松)诱发肾阳虚小鼠模型,观察复方仙脾合剂的壮阳效果及免疫功能,观察小鼠阴茎勃起的潜伏时间及抗应激反应。结果复方仙脾合剂对去势及药物诱发的肾阳虚小鼠补肾壮阳作用不明显,可缩短药物所致肾阳虚小鼠阴茎勃起的潜伏期,对肾阳虚小鼠的体重、体温、自主活动和耐寒能力的下降以及生殖器官精囊腺、睾丸的脏器指数的下降均有一定的提高作用。可提高正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬功能、吞噬百分率和吞噬指数与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论复方仙脾合剂对去势及药物诱发的肾阳虚小鼠有一定补肾壮阳作用,对肾阳虚小鼠应激能力及免疫功能有较好的提高作用。
       【关键词】  复方仙脾合剂 补肾壮阳 免疫功能
       Effect of Complex Xian Pi Mixture on Kidney "Yang "Deficiency Mice in Enhancing " Yang " and Immunity
       SHI Hong,LI Shuanglei,XIE Jinxian,YANG Guifang,HE Juan3,LIU Meilian
       (Kindheartedness Branch Courts of The First Affiliated Hospital of Guangxi College of TCM, Nanning 530001, China; The First Affiliated Hospital of Guangxi College of TCM,Nanning Guangxi, 530022, China;College of Pharmacology of Guangxi College of TCM,Nanning 530001, China)
       Abstract:ObjectiveTo study the effect of Complex Xian Pi Mixture on kidney "yang" deficiency mice in enhancing "yang "and immunity. MethodsThe kidney "yang "deficiency   model was established by hydrocortisone in mice ,and  the latent period of penis and the  anti-stress effect were observed. ResultsComplex XianPi Mixture had no effect on kidney "yang" deficiency mice induce by castration and drug, but it could shorten the latent period of penis in Kidney "yang"deficiency mice induced by drug, elevate the weight, temperature ,spontaneous activities and cold-resistant ability, increase the organ coefficient of seminal vesicle and didymus,and increase phagocytic function of macrophage to  chicken red blood cell in abdominal cavity of  normal mice. The  phagocytosis percentage and exponent had significant difference compared with control group(P<0.05).ConclusionComplex Xian Pi Mixture has effect of  benefiting kidney, enhbancing the anti-stress and immunity in Kidney "yang "deficiency mice induced by castration and drug.
       Key words: Complex Xian Pi Mixture;   Bendfiting kidney and enhancing "yang";   Immunity
        复方仙脾合剂是由淫羊藿、锁阳、蛇床子等多味中药组成的复方制剂,是广西中医学院第一附属医院仁爱分院男性科临床上用于治疗勃起功能障碍(erectile dysfunction, ED)肾阳虚处方,具有补肾阳、强筋骨、益精血等功效。本实验旨在探讨该复方仙脾合剂是否具有补肾壮阳作用,为进一步研究提供实验信息。
       1  材料
       1.1  药物复方仙脾合剂,采用水煎醇沉提取工艺制备而成,每克药膏含10.3 g药材,实验时将药膏配成所需浓度。
       1.2  试剂丙酸睾丸素,上海第九制药厂产品,批号011203;左旋咪唑,桂林南药股份有限公司产品,批号020902;龟鹿补肾丸,广东华天宝药业有限公司产品,批号20030106;氢化可的松,广西南宁制药企业集团公司产品,批号01040011。
       1.3  动物幼鼠11~15 g,小鼠18~22 g,除观察复方仙脾合剂对正常小鼠免疫功能影响的实验雌雄均用外,其余均用雄性(♂)。由广西中医学院实验动物中心提供,清洁级,合格证号:桂医动字11004号。
       2  方法与结果
       2.1  对幼鼠生殖器官脏器指数及免疫器官脏器指数的影响[1]取雄性幼鼠40只,11~15 g,随机分为4组,每组10只。即空白对照组,复方仙脾合剂大、小剂量组,阳性对照组。阳性对照组给予丙酸睾丸素20 mg/kg,隔天皮下注射1次,用药大剂量组(7 g药膏/kg)、小剂量组(3.5 g药膏/kg)、空白对照组(生理盐水20 ml/kg),灌胃给药(i.g)1次/d,连续20 d。末次给药后24 h处死动物,剖取各组小鼠精囊腺、包皮腺、睾丸、肾上腺及免疫器官胸腺、脾脏,在精密天平上称其湿重,计算脏器指数。结果显示,复方仙脾合剂对幼鼠生殖器官及免疫器官脏器指数与空白对照组比较无显著性差异。结果见表1。表1  复方仙脾合剂对幼鼠生殖器官与免疫器官脏器指数的影响(略)与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;n=10
       2.2  对肾阳虚小鼠(去势)生殖器官脏器指数及免疫器官脏器指数的影响[1]取48只雄性小鼠,体重18~22 g,用4%戊巴比妥钠做浅麻醉,然后置于硅板上,睾丸皮肤用碘酒和酒精先后消毒,无菌下剪开皮肤长约0.5 cm,分离皮下组织,将睾丸拉出,连同附睾一并结扎;缝合切口,另一侧睾丸作同样处理。术后第4 天,将小鼠随机分为4组,每组12只,模型对照组给予生理盐水,给药组给予复方仙脾合剂大、小剂量灌胃,1次/d;阳性对照组给予丙酸睾丸素20 mg/kg皮下注射,隔天1次;连续给药25 d。末次给药24 h处死小鼠,剖取各鼠精囊腺、包皮腺、肾上腺、胸腺及脾脏,立即在精密天平上称其湿重(mg)。结果显示,复方仙脾合剂对去势小鼠附性器官及免疫器官脏器指数无显著性差异。结果见表2。表2  复方仙脾合剂对去势小鼠生殖器官及免疫器官脏器指数的影响(略)与模型对照组比较,* P<0.05,  ** P<0.01;n=10
       2.3  对去势小鼠阴茎勃起功能的影响[2]取去势小鼠48只连续给药22 d,第23天给药1 h后,将YSD-4型生理刺激器的刺激电极置于各组小鼠的阴茎部位,给予局部电刺激,电流强度为4 mA,记录刺激开始至阴茎勃起时间(勃起潜伏期)和阴茎勃起持续时间。结果表明,复方仙脾合剂大、小剂量组去势小鼠阴茎在局部电刺激下,阴茎勃起潜伏期明显缩短。结果见表3。表3  复方仙脾合剂对去势小鼠阴茎勃起功能的影响(略)与模型对照组比较,* P<0.05,** P<0.01; n=10
       2.4  对肾阳虚证小鼠的保护作用
       2.4.1  对肾阳虚小鼠体重、体温及自主活动的影响[2]取小鼠40只,体重18~22 g,随机分为5组:正常对照组、模型对照组(氢化可的松25 mg/kg)、氢化可的松+龟鹿补肾丸组、氢化可的松+复方仙脾合剂(7 g/kg)、氢化可的松+复方仙脾合剂(3.5 g/kg)。分组后开始灌胃给药,1次/d,连续9 d,第9天给药1 h后记录各组小鼠体重、体温及自主活动次数(5 min内)。结果显示,小鼠皮下注射氢化可的松25 mg/kg第9天后,出现体重、体温及自主活动下降的肾阳虚表现,复方仙脾合剂能明显升高小鼠的体温,对体重及自主活动也有提高趋势,但无统计学意义。结果见表4。表4  复方仙脾合剂对肾阳虚小鼠体重、体温及自主活动的影响(略)与模型对照组比较,* P<0.05,** P<0.01; n=8
       2.4.2  对肾阳虚小鼠耐寒能力的影响[2]动物分组及给药同“2.4.1”项,连续给药10 d。第10天给药后1 h,将小鼠放入(6±1)℃冰水里,观察小鼠冰泳时间(直至不再游动或浮起)。结果显示,复方仙脾合剂大剂量可提高阳虚小鼠的耐寒能力。见表5。表5  复方仙脾合剂对肾阳虚小鼠耐寒能力的影响(略)与模型对照组比较,*P<0.05,  ** P<0.01;n=8
       2.4.3  对肾阳虚小鼠生殖器官脏器指数的影响[1]动物分组及给药同“2.4.1”项,于第10天处死小鼠,迅速剖取精囊腺及睾丸,精确称重,计算脏器指数。结果,小鼠皮下注射氢化可的松(25 mg/kg )9 d,复方仙脾合剂大剂量组(7 g/kg)睾丸的脏器指数与模型对照组比较,差异显著。结果见表6。表6  复方仙脾合剂对肾阳虚小鼠生殖器官脏器指数的影响(略)与模型对照组比较,*P<0.05,  **P<0.01;n=8
       2.5  对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及免疫器官脏器指数的影响[3]取小鼠40只,雌雄各半,随机分为4组。即空白对照组给予生理盐水,给药组分别给予复方仙脾合剂大、小剂量(7,3.5 g药膏/kg),阳性对照组给予左旋咪唑0.05 g/kg,灌胃给药,连续14 d。于末次给药后1 h每鼠腹腔注射(i.p)植物血凝素5 mg/kg,24 h后腹腔注射5%新鲜鸡红细胞0.4 ml/只,30 min后处死动物,并i.p生理盐水2 ml/鼠,轻揉腹部1 min,吸出腹腔液滴于玻板上,在37℃卵箱中温育30 min,晾干,用甲醇液固定,Giemsa染色剂染色,油镜下计数200个巨噬细胞,观测腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数。在吸出腹腔液的同时,剖取胸腺及脾脏,计算脏器指数。结果显示,复方仙脾合剂能增强腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬功能,大剂量可提高吞噬百分率及吞噬指数。免疫器官脏器指数与空白对照组比较无显著性差异。见表7、表8。表7  复方仙脾合剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响(略)与空白对照组比较,*P<0.05 , **P<0.01;n=10表8  复方仙脾合剂对正常小鼠免疫器官指数的影响(略)与空白对照组比较,*P<0.05;n=10
       吞噬百分率(%)=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数200个巨噬细胞×100%
       吞噬指数=被吞噬的鸡红细胞总数200个巨噬细胞
       3   讨论
        复方仙脾合剂系由淫羊藿、锁阳、蛇床子等多种中药组成。淫羊藿味辛、甘,性温,归肾、肝经,具有补肾壮阳,强筋骨、祛风湿之效;锁阳味甘性温,归肾、肝、大肠经,具补肾壮阳、益精血、润肠通便之效;蛇床子味辛、苦,性温,归脾肾经,具温肾壮阳、燥湿杀虫、祛风止痒之功[4]。诸药配伍,相辅相成,壮阳益肾。根据补肾壮阳药的主要药效学研究指南,本实验从壮阳作用、对肾阳虚证的影响、对幼鼠睾丸等生殖器官发育的影响几个方面综合考察复方仙脾合剂的补肾壮阳作用。实验结果显示,复方仙脾合剂大、小剂量(7,3.5g药膏/kg)均能明显缩短去势小鼠阴茎勃起的潜伏期,潜伏期(s)与模型组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。对氢化可的松所致的肾阳虚症状如体温、体重、自主活动等下降均有一定的提高作用,体温升高与模型组比较有显著性差异P<0.01。复方仙脾合剂7 g/kg明显延长肾阳虚小鼠冰泳时间,对肾阳虚小鼠睾丸指数明显高于模型对照组,统计学处理有显著性差异,提示复方仙脾合剂对肾阳虚小鼠的肾阳虚证有一定的改善作用。对幼鼠及去势小鼠生殖器官脏器指数无显著性差异。免疫方面,复方仙脾合剂可显著提高腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬功能,提高吞噬率和吞噬指数,而对免疫器官脏器指数无明显影响。
       【参考文献】
           [1]陈 奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,2000:714,1067.
       
       [2]卫生部药政管理局.中药新药研究指南(阳威药酒的主要药效学研究[S].1994:154.
       
       [3]陶 玲,王永林,黄能慧,等.前列舒乐胶囊的抗炎作用及对小鼠免疫功能的影响[J].中药药理与临床,2000,16(5):38.
       
       [4]国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草(上)(下)[M].上海:上海科学技术出版社,1996:557,1245,1374.

经典中医古籍

中药学教材(附图片)

穴位数据库(附图片)