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       【摘要】 
       目的对比研究逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂的疏肝健脾作用。方法采用小鼠四氯化碳性肝损伤、脾虚小鼠自主活动、脾虚小鼠游泳时间等方法进行对比实验。结果逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂均能明显降低四氯化碳肝损伤小鼠ALT活性，增加脾虚小鼠自主活动次数，延长脾虚小鼠游泳时间。3种制剂等剂量组比较，功效上逍遥散离心工艺制剂≥标准煎剂＞醇沉工艺制剂。结论逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂均有明显的疏肝健脾作用，采用高速离心工艺既可保留原方功效又可达到除杂和降低成本的目的。
       【关键词】  逍遥散 肝损伤 脾虚
       Study on the Soothing Liver and Strengthening Spleen Effect of Xiaoyao San Preparation
       
       CHEN Yuxing,HUANG Xuejun,ZENG Xiaohui,ZHAO Ziming,DU Tieliang
       （Institute of Traditional Chinese Medicine of Guangdong Province, Guangzhou  510095， China）
       
       Abstract：ObjectiveTo compare the soothing the liver and strengthening the spleen effects of Xiaoyao San preparation. MethodsThe liver damage was induced by CCl4 in mice,and the autonomous activities and the swimming time of spleen deficiency mice were compared with different Xiaoyao San preparations.ResultsXiaoyao san preparation had inhibitory effect on the increase ALT activity in mice,increased  the autonomous activities and prolonged the swimming time of spleen deficiency mice. The effect of centrifugal preparation was best among three Xiaoyao San preparations at equinalent dose.ConclusionXiaoyao san preparation has excellent effects of soothing liver and strengthening spleen,and  the centrifugal preparation is best.
       Key words：Xiaoyao San；Soothing the liver；  Strengthening the spleen
        国家科技部项目“二陈汤、逍遥散及广佛手等7味配方颗粒质量标准的示范性研究”是根据国家“十五”期间建设中药现代化科技发展规划而进行设置，在中药配方颗粒前期研究工作的基础上，开展了新工艺、新技术、新方法、新辅料在中药配方颗粒中的应用研究，以期建立单味中药配方颗粒及复方颗粒示范性制备工艺及示范性质量标准。逍遥散，见于宋代《太平惠民和剂局方》，由柴胡、当归、白芍、白术、茯苓、生姜、薄荷、炙甘草等多味中药组成,为疏肝解郁、健脾和营基础方，临床常用于调和肝脾，主治肝郁血虚、神疲食少等证［1］。我们根据其功能主治，对逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂进行了疏肝健脾对比研究，为新方法、新工艺应用于中药复方颗粒生产提供实验依据。
       1  材料与仪器
       1.1  动物 
       SPF级NIH小鼠，雌雄均用，由广东省医学实验动物中心提供。动物合格证和实验设施合格证号分别为SCXK(粤)2003-0002和粤监证字2005A011。本实验使用SPF级动物实验设施许可证号：SYXK（粤）2005-0059。
       1.2  试剂 
       ALT试剂盒，南京建成生物工程研究所，20050613。利血平注射液，广东邦民制药厂有限公司产品，050309。
       1.3  仪器 
       752N紫外分光光度计，上海精密科学仪器公司产品。BS224S电子天平(1/万)，德国SARTORIUS产品。SIGMA 3K30冷冻高速离心机，SIGMA产品。JJ3000精密电子天平，常熟双杰测试仪器厂。ZIL－2小鼠自主活动程序自动控制仪，中国医学科学院药物研究所。
       1.4  药物 
       逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂，批号均为051010。临用前以蒸馏水配制成所需剂量，用前充分摇匀。
       2  方法
       　
       2.1  逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂对小鼠四氯化碳性肝损伤的影响［2］取NIH小鼠132只，雌雄均用，随机分为空白对照组、模型对照组、逍遥散离心工艺制剂30.4，15.2，7.6 g生药/kg组、逍遥散醇沉工艺制剂30.4，15.2，7.6 g生药/kg组、逍遥散标准煎剂30.4，15.2，7.6 g生药/kg组。各给药组按剂量灌胃给药，空白对照组、模型对照组给予等体积蒸馏水，1次/d，连续7 d。给药第6天下午，各给药组和模型对照组小鼠均ip 0.2％CCl4花生油溶液10 ml/kg，空白对照组ip等量花生油，禁食过夜，不禁水。末次给药后1h，各组小鼠取血测血清ALT活性。
       2.2  逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂对脾虚小鼠体重、自主活动的影响［3］取NIH小鼠132只，分组给药同实验“2.1”项，给药后除空白对照组外，其余各组小鼠均ip 0.15 mg/kg利血平注射液，1次/d，连续10 d。末次给药后1 h，称量各组小鼠体重，顺序将小鼠置于ZIL－2小鼠自主活动程序自动控制仪中，适应3 min后，由电脑自动观察记录5 min内小鼠的自主活动次数。
       2.3  逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂对脾虚小鼠游泳时间的影响［4］同实验“2.1”项取小鼠分组给药，给药后除空白对照组外，其余各组小鼠均ip 0.15 mg/kg利血平注射液，1次/d，连续10 d。末次给药后1 h，将小鼠放入直径30 cm、水深10cm的水桶中，水温25℃，记录放入小鼠至小鼠下沉的时间作为其游泳时间。
       2.4  统计学处理 
       实验数据经SPSS 14.0软件统计，进行单因素方差分析。
       3  结果
       3.1  逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂对小鼠四氯化碳性肝损伤的影响由表1表明，与空白对照组相比模型对照组小鼠ALT显著上升（P<0.01）。与模型对照组比较逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂高、中、低3剂量组小鼠ALT均明显下降（P<0.01或P<0.05）。与标准煎剂等剂量组比较，醇沉工艺制剂高剂量组小鼠ALT明显升高（P<0.05）。表1  逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂（略）与空白对照组比较，*P<0.05, **P<0.01；与模型对照组比较，△P<0.05, △△P<0.01；与标准煎剂等剂量组比较，＃P<0.05, ＃＃P<0.01；n=12
       3.2  逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂对脾虚小鼠体重、自主活动的影响表2表明，与空白对照组比较模型对照组小鼠体重、自主活动数值显著减少（P<0.01）。与模型对照组比较逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂高、中、低3剂量组小鼠体重、自主活动数值均明显升高（P<0.01）。与标准煎剂等剂量组比较，醇沉工艺制剂高、中剂量组小鼠自主活动次数明显减少（P<0.05）。
       3.3  逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂对脾虚小鼠游泳时间的影响由表3表明，与空白对照组比较模型对照组小鼠游泳时间明显减少（P<0.01）。与模型对照组比较逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂高、中2剂量组小鼠游泳时间均显著延长（P<0.01或P<0.05）。与标准煎剂等剂量组比较其余两制剂小鼠游泳时间均无显著性差异（P>0.05）。
       4  讨论
        国家科技部项目“二陈汤、逍遥散及广佛手等7味配方颗粒质量标准的示范性研究”主要进行新工艺、新技术、新方法、新辅料在中药配方颗粒中的应用研究，以期建立特征性成分指纹图谱分析方法，更有效地控制中药配方颗粒的质量。中药配方颗粒生产过程中，大部分药材以水提为主，醇沉为除杂主要手段。但是醇沉在大生产过程中存在成本高、部分有效成分易沉淀等缺点，给生产带来负面影响。表2  逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂对脾虚小鼠体重、自主活动的影响（略）与空白对照组比较，*P<0.05, **P<0.01；与模型对照组比较，△P<0.05, △△P<0.01；与标准煎剂等剂量组比较，＃P<0.05, ＃＃P<0.01；n=12表3  逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂对脾虚小鼠体重、自主活动的影响（略）与空白对照组比较，*P<0.05, **P<0.01；与模型对照组比较，△P<0.05, △△P<0.01；与标准煎剂等剂量组比较，＃P<0.05, ＃＃P<0.01；n=12
        本实验按照课题研究内容，对逍遥散离心工艺制剂、醇沉工艺制剂和标准煎剂进行了疏肝健脾作用对比研究，实验数据显示，逍遥散离心工艺制剂在降低肝损伤小鼠ALT活性、增加小鼠活动次数、延长小鼠游泳时间方面与标准煎剂相当，优于醇沉工艺制剂。实验结果提示高速离心工艺技术应用于中药配方颗粒的生产是具有现实意义的，不仅达到了除杂的目的，还降低了生产成本，保留了原有制剂的功效。
       【参考文献】
         　　［1］段富津.方剂学［M］.上海：上海科学技术出版社，2000： .
       
       ［2］陈 奇.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，2000：670，780，832.