文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【摘要】 
       目的探讨资木瓜皂苷(SCS)对大鼠佐剂性关节炎(AA)的治疗作用。方法用弗氏完全佐剂(FCA)诱导大鼠形成关节炎，观察SCS对大鼠体质量，足跖关节肿胀度，关节炎症指数以及局部组织中PGE2含量的影响。结果SCS组与模型组比较，能显著减轻大鼠足跖关节肿胀度、关节炎症指数，降低局部组织中PGE2含量。结论SCS能改善AA症状、抑制炎症免疫反应，SCS的抗炎作用与下调炎症因子(PGE2)和抑制T淋巴细胞增殖等有关。
       【关键词】  木瓜皂苷; 佐剂性关节炎; 前列腺素E2
       资木瓜为蔷薇科木瓜属植物贴梗木瓜的果实，原产于湖北长阳资丘一带，是木瓜中的主流产品[1]，为鄂西南特有的地道中药材，湖北省科技厅已将资木瓜列入十大地道中药材，重点扶持和开发。本实验研究以皱皮木瓜传统应用为基础，以抗炎免疫为突破点，利用现代药理学方法探讨和评价其中的活性成分SCS抗炎免疫作用。佐剂性关节炎(Adjuvant Arthritis，AA)是一种用FCA免疫动物而引发的慢性多发性关节炎，其病理过程、病理形态学改变、血清学指标变化与人类RA极为相似，是筛选和研究治疗RA药物的理想模型[2]。本实验观察大鼠体质量、足跖关节肿胀度、关节炎症指数及炎性足趾PGE2 的含量改变，为SCS的深入研究和应用提供理论依据。
       1 材料与仪器
       1.1 动物 雄性，Wistar 大鼠，SPF级，体质量(220±20)g，购自湖北省实验动物中心[许可证号：SCXK(鄂)2008-0005]。
       1.2 试剂和仪器SCS经D101大孔吸附树脂分离纯化，含量为51%，临用时用双蒸水配成所需浓度，溶液pH7.4;雷公藤多苷片(浙江普洛康裕天然药物有限公司)：国药准字Z33020778，产品批号070601;弗氏完全佐剂(FAC，北京鼎国生物技术发展中心出品);所用试剂均为分析纯，PV-200型动物足趾容积测量仪(成都泰盟科技有限公司)。
       2 方法
       2.1 AA大鼠模型的建立Wister大鼠40只，除空白组外，余者于左后足趾无菌皮内注射FAC 0.1 ml。待造模成功后，随机分为4组：模型对照组(Model)、低剂量资木瓜皂苷治疗组(LSCS)、 高剂量资木瓜皂苷治疗组(HSCS)和雷公藤对照组(TG )。加上另设空白对照组(Normal)，共5组。造模成功后即12天开始，每隔6天测量1次动物体质量及左右后足趾容积(以膝关节处标记线为基准)。
       2.2 动物给药方案致炎后第14天开始灌胃给药，1次/d(上、下午各1次)，连续21 d， SCS低、高剂量组给药剂量分别为100，200 mg/kg;TG药物对照组为50 mg/kg;Normal、Model组给予等容积生理盐水。
       2.3 观察内容及指标检测
       2.3.1 动物的一般情况的观察一般情况包括动物饮食、活动、毛色和体质量等情况。
       2.3.2 多发性关节炎指数评分致炎后14 d开始分级评分，采用关节分数评分法记录多发性关节炎病变的发生及严重程度(左后足除外)，关节分数分为5级(0～4)。0级：无红肿，0分;1级：足小趾关节红肿，1分;2级：趾关节、足跖部均红肿，2分;3级：踝关节以下均红肿，3分;4级：包括踝关节，全部红肿，4分，各个关节的累计积分，即为每只大鼠的多发性关节炎指数。每隔6天评分1次，进行分级记录。
       2.3.3 足肿胀度的观察 致炎后12 d开始，每隔6 d用动物足趾容积测定仪测量大鼠左、右后足趾容积和足肿胀度的变化情况。足肿胀度(ml)= 给药后足容积值-给药前足容积值。
       2.3.4 对炎性足趾中PGE2影响的检测末次给药后24 h处死大鼠，每组随机选取6只左后足(在踝关节以上约0.5 cm剪下)，称重，剪碎组织，用生理盐水浸泡1 h，离心(2 000 r/min)10 min，取上清液0.1 ml，加0.5 ml KOH-甲醇2 ml，50 ℃异构化20 min，用甲醇稀释至20 ml，于波长278 nm处测定光密度值，以每克炎性组织的光密度值表示PGE2的含量。
       2.4 统计学处理 采用SPSS10.0统计软件进行统计分析，结果以 ±s表示，组间差异的比较采用t检验。
       3 结果
       3.1 一般情况空白组大鼠无死亡，营养状况良好;模型对照组和雷公藤组大鼠毛质粗糙，消瘦，精神萎靡，动作迟钝;LSCS和HSCS无死亡，营养、精神状况良好，活动正常。体质量变化见表1。表1 SCS对大鼠体质量的影响
       3.2 SCS对大鼠右后继发性关节炎，左后原发性关节炎足肿胀度和关节炎指数的影响结果表2～4。表2 SCS对大鼠右后继发性关节炎足肿胀度的影响
       3.3 TSCS对AA大鼠踝关节局部组织PGE2的影响结果见表5。
       4 讨论
       足肿胀度是反映AA大鼠症状的重要指标，致炎后18 h，造模各鼠右后足红肿，皮温高，有些动物行走受限，持续3 d后逐渐减轻，8 d后再度肿胀。致炎后14 d各模型大鼠开始出现全身症状，表现为未注射佐剂的其余3个关节红肿，行走困难，提示造模成功。SCS治疗后的4 d足肿胀开始渐消，行走活动得到改善，随着持续给药，症状得到进一步改善。SCS的抗炎免疫可能通过减少致炎因子PGE2的生成和对外周血T淋巴细胞亚群的调节等作用而达到减轻足肿胀、缓解关节炎作用[3]。表3 SCS对大鼠左后原发性关节炎足肿胀度的影响表4 SCS对AA大鼠多发性关节炎指数的影响表5 SCS对AA大鼠踝关节局部组织PGE2的影响雷公藤Tripterygium wilfordii Hook.F.为卫茅科雷公藤属有毒植物，主要含二萜及三萜类皂苷等成分，具有抗炎镇痛、抗肿瘤、免疫抑制及影响生殖功能等作用，用于类风湿关节炎已有多年，但毒性大，常见不良反应有造血系统疾病，胃肠道反应等[4]。动物因胃肠道反应，影响摄食，致体质量下降。
       SCS高剂量和低剂量组相对于雷公藤组，治疗全程对动物几无毒副作用，维持正常进食。路景涛等[5]研究表明：木瓜苷各剂量组(83.1，332.5，1 330.0 mg/kg)对孕鼠生殖能力和胚胎形成、骨骼及生长发育与阴性组相比均无显著差异 (P>0.05), 对小鼠无胚胎毒性和致畸。
       SCS抗炎免疫疗效确切，其药理学机制可能是通过下调炎症因子(PGE2)和抑制T淋巴细胞增殖等综合效应而发挥作用的(待发表)。木瓜皂苷突出的抗炎免疫作用和几无毒性的独特优势，为SCS今后的抗炎免疫研究和皱皮木瓜资源的深度开发提供了广阔的前景。
       【参考文献】
         [1] 杨兴海,柳 蔚,钱京萍.资木瓜乙醇提取物对胃肠道平滑肌的实验研究[J].四川中医,2004,22(3):19.
       
       [2] 张玲玲,沈玉先,魏 伟.类风湿关节炎动物模型与临床的关系[J].中国药理学通报,2002,18(5):502.
       
       [3] 彭成忠,曹建民,肖 涛，等.骨关节炎关节滑液中IL-18与PGE2含量的测定及意义[J].中南大学学报，2006，31(6):862.
       
       [4] 杨小红，张伟程, 雷公藤制剂的应用及其副作用[J].中医药临床杂志，2004，16(5):511.
       
       [5] 路景涛，徐德祥，孙美芳，等.木瓜苷的致畸毒性研究[J].癌变·畸变·突变,2008,20(1):27.