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麋鹿角醇提液对幼鼠睾丸以及附性器官发育的影响
作者:成海龙1,陆晓东1 ,秦红兵1,田 郡1 ,朱 清2*    
作者单位:(1.盐城卫生职业技术学院,江苏 盐城 224005; 2.南通大学医学院药学实验中心,江苏 南通 226001)

《时珍国医国药》 2010年 第3期

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       【摘要】 
       目的观察麋鹿角醇提液对 幼年雄鼠睾丸及附性器官的发育、血清睾酮及促黄体生成素水平的影响。方法正常幼年雄性小鼠(9~14 g)45只,按体重随机分为3组,即正常对照组(n=15)、麋鹿角醇提液低剂量组(4 g/kg,n=15)、麋鹿角醇提液高剂量组(8 g/kg,n=15),除对照组给予相同容积的0.5%羧甲基纤维素钠灌胃外,其余各组给予相应剂量的麋鹿角醇提液,1次/d,连续10 d,最后一天处死,检测睾丸、前列腺与精囊腺、包皮腺等脏器质量指数,用放射免疫试剂盒测定小鼠血清中的睾酮以及促黄体生成素的水平。结果幼年雄性小鼠各组间附性器官质量指数未见明显差异(P>0.05)。麋鹿角醇提液高剂量组能显著增加睾丸质量指数(P<0.05),低剂量组有增加幼鼠睾丸重量的趋势,但未达到统计学意义(P>0.05)。血清睾酮各组间无显著差异(P>0.05)。低剂量组与高剂量组均能提高幼鼠促黄体生成素水平(P<0.05)。结论麋鹿角醇提液能增加幼鼠睾丸的重量,能升高幼鼠促黄体生成素的水平,说明具有一定促性激素样作用。但不能使附性器官指数增加,也不能增加血清睾酮水平,说明不具有雄性激素样作用。
       【关键词】  麋鹿角; 附性器官; 性激素; 促性激素; 睾酮; 促黄体生成素
       麋鹿角入药历史悠久,麋鹿角传统功效主要包括补肝肾、填精髓、强筋骨、益血脉、壮腰膝等,主治虚劳羸弱,精血不足,阳痿,不孕,腰膝酸软,筋骨疼痛等。明·李时珍谓: 鹿之茸角补阳,麋之茸角补阴。因麋鹿至1900 年在我国已灭绝, 故其作为药用的茸角已停用至今。现在已有大量的麋鹿不断繁育, 且用茸角无需杀戮, 不取用茸也要自然变角而脱落, 因此应恢复其药用[1,2]。麋鹿角传统医学中强精益血、滋阴壮阳的作用提示其对机体垂体-性腺轴功能具有调节作用,已有学者研究发现麋鹿茸提取液能促进小鼠幼鼠生殖系统组织发育,增加子宫卵巢的重量,能使去势大鼠子宫、阴道有代偿性增生和变化,具有雌激素样作用[3]。另外,在麋鹿角检测出含有雌二醇,雌酮,且含量均高于梅花鹿角[4]。而麋鹿角对雄鼠的垂体-性腺功能是否有影响,是否有雄性激素样作用或促性腺激素样作用,却未见相关报道。本实验观察麋鹿角醇提液对正常幼龄雄性小鼠性器官和附性器官的发育以及血清中睾酮与促黄体生成素水平的影响,为麋鹿角的开发利用提供一定的实验依据。
       1 材料
       1.1 动物健康雄性幼年ICR小鼠45只,体质量9~14 g,由南通大学动物实验中心提供[合格证:SYXK(苏)2007-0021]。
       1.2 受试药物配制及试剂麋鹿角,由江苏盐城大丰麋鹿保护区提供,将麋鹿角刨片、粉碎成约100目粉末,准确称取麋鹿角粉末200 g,加入70%乙醇溶液浸泡3次,每次48 h,合并浸泡液并过滤,然后减压蒸馏,浓缩至80 ml,即为麋鹿角乙醇提取浓缩液,浓度为2.5 g/ml。用0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)溶液配制成所需浓度的麋鹿角醇提液备用。睾酮放射免疫分析药盒和促黄体生成激素免疫放射分析药盒购自北京北方生物技术研究所。
       2 方法
       取45只幼年雄性小鼠(9~14 g),并按体质量均衡随机分成3组,即正常组(NG,n=15):按0.2 ml/10 g灌胃等容积的0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)溶液;麋鹿角醇提液低剂量组(LG,n=15):给予折合麋鹿角生药剂量4 g/kg(按0.2 ml/10g灌胃0.2 g/ml的麋鹿角醇提液);麋鹿角醇提液高剂量组(HG,n=15):灌胃麋鹿角醇提液生药剂量8 g/kg(给药容积0.2 ml/10g,受试物浓度0.4 g/ml);连续7d,每天给药1次,最后1天,眼眶取血,静置后,2 500 r/min离心15 min,取血清保存于-20℃的冰柜中,待测。然后将小鼠处死,摘取各鼠的包皮腺、前列腺与精囊腺(合在一起)、睾丸等,并迅速在万分之一天平称湿重,观察麋鹿角对幼鼠的性器官以及附性器官是否有促发育作用。并按放免试剂盒说明书提供的方法测定各组小鼠的血清中睾酮与促黄体生成素的水平。数据用表示,用SPSS11.0统计软件,采用方差分析,组间比较采用t检验。以P<0.05作为统计显著性差异标准。
       3 结果
       3.1 麋鹿角醇提液对幼年雄鼠性器官和附性器官发育的影响幼年雄性小鼠各组间附性器官质量指数未见明显差异(P>0.05)。而睾丸质量指数具明显差异(P<0.05),麋鹿角醇提液低剂量组有增加幼鼠睾丸重量的趋势,但未达到统计学意义(P>0.05),高剂量组能显著增加睾丸质量指数,并有显著性差异(P<0.01)。结果见表1。表1 麋鹿角醇提液对幼年雄鼠性器官和附性器官发育的影响 与正常对照组(NG)比较,**P<0.01;n=15
       3.2 麋鹿角醇提液对雄性幼鼠T 、LH的影响如表2所示,血清睾酮各组间无显著差异(P>0.05),但高剂量组有一定增加血清睾酮的趋势。低剂量组与高剂量组均能提高幼鼠促黄体生成素水平,并具有显著性差异(P<0.05)。
       4 讨论
       睾酮是天然雄性激素中活性最强的一种激素,其主要生理作用包括调节下丘脑垂体系统分泌促性腺激素维持男性第二性征和正常性腺功能,启动并维持精子的发生,促进外生殖器和附性器官的发育,维持性功能,维持女性性欲以及促进蛋白质合成代谢等。睾丸的生精作用及分泌睾酮都直接依赖于腺垂体分泌的促卵泡激素(FSH)和促黄体生成素(LH)的调节。在男性,前者称为精子生成素,后者又称间质细胞刺激素。促黄体生成素(LH)为垂体前叶嗜碱性细胞所分泌的糖蛋白激素。在女性中,LH促进排卵和促黄体产生雌性激素和孕酮,在男性中LH则刺激睾丸间质细胞产生雄性激素和雌性激素。它的分泌受下丘脑分泌的促性腺激素释放激素控制。血液循环中性腺分泌的甾体类性激素通过下丘脑对LH水平进行负反馈调节,通过这一负反馈调节可使睾酮浓度维持于正常水平,并保证精子的生成正常进行。传统壮阳中成药及其方剂大多具有性激素或促性腺激素样作用。目前,常利用动物的附性器官进行雄激素实验,来检测补肾壮阳药物是否能使雄性动物的附性器官湿重增加,从而表明其雄激素样作用[5]。表2 麋鹿角醇提液对雄性幼鼠T 、LH的影响与正常对照组(NG)比较,*P<0.05,**P<0.01;n=15
       本实验结果观察到雄性幼鼠灌胃给药高剂量组与空白组相比附性器官质量未有明显差异,睾丸质量增加,血浆睾酮未发生变化,促黄体生成素水平上升,说明麋鹿角的乙醇(70%)提取物对雄性幼鼠没有性激素样作用,不能增加附性器官重量和血浆睾酮水平,但具有一定促性激素样作用,能够促进LH分泌增加,进而可能对睾丸间质细胞生长和曲细精管上皮细胞发育有一定刺激作用,对睾酮分泌可能也有一定增加趋势(结果未达到统计学意义),从而促进睾丸增重。
       至于有相关文献报道鹿茸(马鹿茸)具有性激素样包括雄激素和雌激素作用[6],麋鹿茸提取液具有雌激素样作用[3]。而我们在本文中没有观察到麋鹿角醇提液具有雄激素样作用,经分析可能有以下几种原因:①鹿角一般壮阳效应要比鹿茸效果差,所以麋鹿角可能没有雄激素样作用。②性激素类物质属于脂溶性,而我们使用70%乙醇提取,其脂溶性成分提取的较少,所以可能麋鹿角原药具有性激素样作用,但是在本实验中,其性激素样作用成分未能提出,所以不表现为雄激素样作用。鉴于此,我们准备下一步用不同浓度的乙醇分级提取麋鹿角的不同成分,全面观察其性激素以及促性腺激素样作用。
       【参考文献】
         [1] 杨 光. 关于麋鹿角、茸恢复入药的建议[J]. 北京中医,1999,18(5):39.
       
       [2] 汪银银, 彭蕴茹, 方泰惠,等. 麋鹿角的传统功效与现代研究[J]. 现代中药研究与实践,2007, 22(2): 30.
       
       [3] 杨若明,张经华,周寮红,等. 麋鹿中的性激素对大鼠和小鼠生殖系统的影响[J]. 解剖学报, 2001, 32(2):180.
       
       [4] 李春旺. 麇鹿茸与梅花鹿茸、鲇鹿茸雌二醇含量比较[J]. 动物学报, 2003,49(1):124.
       
       [5] 侯 坤,吕 洁. 补肾壮阳中成药及其方剂的研究进展[J]. 现代中西医结合杂志, 2003, 12(1):108.
       
       [6] 董万超,刘春华,赵伟刚,等. 马鹿茸性激素样作用的研究[J]. 特产研究,2004,2:14.

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