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       【摘要】 
       目的确定北豆根总碱(TAMD)软胶囊的生产工艺和质量标准。方法以内容物沉降比为考察指标，筛选出适宜的处方，轧制软胶囊。用酸性染料比色法测定北豆根总碱含量，高效液相色谱法测定蝙蝠葛碱含量。结果所制制剂为黄色膏状物，检查符合2005版《中国药典》的相关规定;酸性染料比色法：线性范围为6～40 μg·ml-1 ，r=0.999 8 (n=7)，平均加样回收率为98.86%，RSD=0.58%;HPLC法：线性范围为0.01～0.1 mg·ml-1，r = 0.999 8(n=7) ，平均加样回收率为99.25%，RSD=0.60%。结论该制剂制备工艺简便可行，质量稳定可控。
       【关键词】  北豆根总碱; 软胶囊; 制备工艺
       软胶囊是一种新剂型，能将油状物、药物溶液或混悬液、糊状物甚至药物粉末定量压注并包封于胶膜内，形成大小、形状各异的密封胶囊。北豆根总碱软胶囊的内容物为黄色膏状物，由北豆根总碱与基质、润湿剂和助悬剂组成。目前国内尚无该产品，测定软胶囊内容物中总碱和主要单体蝙蝠葛碱的含量并在此基础上制订软胶囊的质量标准，是保证产品质量的基础。
       1 仪器与试剂
       1.1 仪器JASCO高效液相色谱仪：RU1580泵，UV-15紫外-可见检测器(日本);HP-8453紫外-可见分光光度计(惠普公司);AG-254型电子分析天平(瑞士梅特勒);ZFQ85-A型旋转蒸发仪(上海医械专机厂);JMS-80胶体磨(廊坊通用机械厂);RJNJ-1型压丸机(上海延安制药厂制药机械分厂)。
       1.2 试剂 北豆根总碱软胶囊(自制，规格60 mg);蝙蝠葛碱(对照品，自制，含量99.0%);无水甲醇、磷酸、酚酞(分析纯);甲醇、乙腈(色谱纯);注射用大豆油(广东环叶制药有限公司);蜂蜡(广东威而特精腊开发有限公司);聚甘油酯(池田物产公司);明胶(青海明胶股份有限公司);甘油(广州启得利化工商贸有限公司);二氧化钛(美国WC&D公司);丁烯二酸(太原市侨友化工有限公司);食用柠檬黄(上海化学染料二厂)。
       2 处方与制备
       2.1 内容物处方 中药软胶囊内容物一般由主药和稀释剂、润湿剂、助悬剂组成。通过文献检索，兼顾成本，将稀释剂定为大豆油，助悬剂定为蜂蜡。润湿剂常用吐温类，但吐温类可致红细胞膜破裂而溶血，故选用聚甘油酯这一新型表面活性剂，具备良好的乳化性能[1]。选用正交实验法确定各组分用量，取处方量的大豆油，水浴加热，依处方加入蜂蜡、聚甘油酯，酯化后充分搅拌，加入处方量的主药，用胶体磨研磨后超声除去气泡。内容物的质量以沉降系数作为考察指标，将内容物置于10 ml刻度试管中，测定内容物原始高度H0，以500 r·min-1的速度离心4 h，测定沉降后的高度H，计算沉降比F=H/ H0，F值越大，内容物越稳定。正交实验安排表见表1，结果见表2。　　表1 正交实验安排表2 正交实验结果
       2.2 囊壳的制备[2]北豆根总碱在光照情况下易分解，故在囊壳中加入二氧化钛做遮光剂，加入柠檬黄改变外观色泽。此外，北豆根总碱为碱性，可加速囊壳的老化，所以在囊壳中加入1%的丁烯二酸来改变囊壳的溶解性。称取明胶1.0 kg置化胶罐中备用，另外称取食用柠檬黄0.4 g溶于1 500 ml水中，将明胶浸泡36 h，使明胶充分吸水膨胀。40℃水浴加热使明胶溶解，加入甘油750 g，阿拉伯胶浆250 g，二氧化钛8 g，丁烯二酸20 g，搅拌均匀。60℃蒸发水分至处方量，超声波排除气泡后涂于不锈钢板，厚度1 mm，90℃干燥既可。
       2.3 软胶囊的制备 称取大豆油1 266 g，水浴加热，加入蜂蜡80 g，聚甘油酯6 g，熔化后搅拌均匀，加入北豆根提取物648 g(含北豆根总碱600 g)，用胶体磨研磨后压制软胶囊。每粒软胶囊内容物重0.20 g。
       2.4 整丸与干燥将软胶囊在室温(20～30℃)冷风干燥后置95%乙醇中，洗去油污后取出，于50℃干燥24 h。将干燥后的软胶囊置包衣锅内，加入适量液体石蜡使均匀涂布。铝塑泡罩包装。批号分别为20051006，20051011，20051016。
       3 质量控制
       3.1 形状本品为黄色膏状物，味苦。
       3.2 鉴别取本品4粒，刮取内容物，加稀盐酸10 ml，振摇提取30 min，滤过。取滤液2 ml，加碘化钾碘试液2滴，即生成红棕色沉淀;另取滤液2 ml，加三硝基苯酚试液2滴，即生成黄色沉淀。
       3.3 检查符合《中国药典》2005版胶囊剂项下的各项规定。
       3.4 北豆根总碱含量测定[3]
       3.4.1 比色原理溴甲酚绿为一酸性染料，它的显色与pH值有关，溴甲酚绿在无水甲醇(pH=6)的条件下，可与北豆根总碱直接络合成绿色化合物，用于比色测定。
       3.4.2 检测波长的选择分别称取一定量的北豆根总碱软胶囊内容物(约相当于总碱15 mg)和空白制剂的内容物置10 ml容量瓶中，加入无水甲醇至刻度，超声提取30 min，补足失去的甲醇量，过滤。取续滤液0.2 ml 置10 ml容量瓶中，加入0.1%溴甲酚绿溶液0.2 ml ,用无水甲醇定容，在200～700 nm进行扫描。软胶囊内容物的甲醇提取液在620 nm处有最大吸收，而空白制剂没有吸收。说明辅料对测定无影响。
       3.4.3 线性关系考察精密称取蝙蝠葛碱对照品2.0 mg，置10 ml容量瓶中，加无水甲醇溶解并定容作为对照品溶液。分别精密称取对照品溶液0.3，0.5，0.8，1.0，1.2，1.5，2.0 ml，置10 ml容量瓶中，加入0.1%溴甲酚绿溶液0.2 ml，于620 nm处测定吸收度，随行试剂空白。以蝙蝠葛碱浓度C对吸收度A进行线性回归，得标准曲线方程：C=49.82A-0.84，r=0.999 8(n=7)，线性范围为6～40 μg·ml-1。
       3.4.4 回收率实验取经过含量测定的北豆根总碱(含量92.71%)约15 mg,分别精密称定5份置10 ml容量瓶中，按处方比例加入辅料，用自动涡流混合器混匀。加入无水甲醇10 ml，超声提取30 min，补足失去的甲醇量，过滤。取续滤液0.2 ml置10 ml容量瓶中，加入0.1%溴甲酚绿溶液0.2 ml ,用无水甲醇定容。在620 nm处测定吸收度。随行试剂空白。根据标准曲线方程计算北豆根总碱的量和回收率。结果见表3。　　表3 北豆根总碱回收率实验结果
       3.4.5 样品含量测定 按北豆根总碱软胶囊的最佳处方，制备3批样品，取3种批号样品各40 mg (约含总碱10 mg)，置50 ml容量瓶中，用无水甲醇定容，超声提取30 min，补足失去的甲醇量，过滤。精密吸取续滤液1.0 ml置10 ml容量瓶中(浓度为2%)，加入0.1%溴甲酚绿溶液0.2 ml ,用无水甲醇定容。在620 nm处测定吸收度，随行试剂空白。根据标准曲线方程计算北豆根总碱的量。结果3批样品的标示量分别为98.2%，99.6%，100.3%，符合方法学要求。
       3.5 蝙蝠葛碱含量测定[4]
       3.5.1 色谱条件色谱柱为Discovery-C18(5 μm，4.6 mm×250 mm);流动相为乙腈∶水∶磷酸=16∶84∶0.15(V∶V∶V );流速0.5 ml·min-1;波长208nm;柱温为室温;进样量20 μl;理论塔板数：2300。
       3.5.2 干扰实验分别称取一定量的北豆根总碱软胶囊内容物(约相当于总碱15 mg)和空白制剂的内容物置25 ml容量瓶中，加入无水甲醇至刻度，超声提取30 min，补足失去的甲醇量，过滤。取续滤液1.0 ml，置10 ml容量瓶中，挥干甲醇，用流动相溶解并定容。按色谱条件检测。空白制剂在25 min时无吸收峰，说明辅料对测定没有影响。色谱见图1。
       3.5.3 线性关系考察 精密称取北豆根对照品5.0 mg，置25 ml容量瓶中，用流动相溶解并定容，作为对照品溶液。分别精密吸取对照品溶液0.5，1.0，1.5，2.0，3.0，4.0，5.0 ml，置10 ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，按上述条件进行检测，以峰面积(A)对浓度(C)进行回归，得回归方程A=1.53×108 C +0.14×104 ，r=0.999 8(n=7),线性范围为0.01～0. 1mg·ml-1。a-对照品 b-样品 c-阴性样品图1 高效液相色谱图
       3.5.4 回收率实验取经过含量测定的北豆根总碱(含蝙蝠葛碱48.06%)约15 mg,分别精密称定5份置25 ml容量瓶中，按处方比例加入辅料，用自动涡流混合器混匀。加入无水甲醇至刻度，超声提取30 min，补足失去的甲醇量，过滤。取续滤液1.0 ml置10 ml容量瓶中，挥干甲醇，用流动相溶解并定容。按上述色谱条件测定。根据标准曲线方程计算蝙蝠葛碱的量和回收率。结果见表4。表4 蝙蝠葛碱回收率实验结果
       3.5.5 样品含量测定 取3种批号样品40 mg (约含蝙蝠葛碱5 mg)，置25 ml容量瓶中，用无水甲醇定容，超声提取30 min，补足失去的甲醇量，过滤。精密吸取续滤液2.0ml置10 ml容量瓶中，(浓度为4%)，挥干甲醇，用流动相溶解并定容。按上述色谱条件测定。根据标准曲线方程计算蝙蝠葛碱的量。取3种批号样品40 mg (约含总碱10 mg)，结果3批样品的标示量分别为99.1%，100.5%，99.6%，符合方法学要求，其中蝙蝠葛碱含量不低于北豆根总碱的45.0%。
       4 讨论
       北豆根提取物味苦、疏水性强、对光热不稳定，适宜制成软胶囊。建立北豆根总碱软胶囊的质量标准，需要解决两个问题：一是能否完全地把北豆根总碱从内容物中提取出来;二是辅料是否对测定造成影响。本实验在参考北豆根提取物含量测定方法的基础上，很好地解决了上述两个问题，完成了北豆根总碱软胶囊的含量测定。
       【参考文献】
         　[1] 时 军，程 怡.辅料在软胶囊剂型中的应用[J].中医药学刊，2003，21(9)∶1429.
       
       [2] 张亚中，张 彤，陶建生.中药软胶囊的研究进展[J].中成药，2006，28(6)∶871.
       
       [3] 张 怡，王爱华.北豆根气雾剂质量标准研究[J].中草药，2002，33(11)∶999.
       
       [4] 史自东，刘 博.HPLC法测定蝙蝠葛酚性碱片中蝙蝠葛碱[J].中草药，2006，37(9)∶1347.