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       【关键词】  五味子；,,多糖；,,制备方法；,,分析方法；,,药理作用
       关键词：五味子；  多糖；  制备方法；  分析方法；  药理作用
        五味子为临床常用中药，具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心之功，用于治疗久嗽虚喘，梦遗滑精，遗尿尿频，久泻不止，自汗，盗汗，津伤口渴，短气脉虚，内热消渴，心悸失眠等症。《中国药典》2000年版规定五味子为木兰科植物五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果实。而在此之前临床上都是将五味子和华中五味子Schisandra sphenantheraRehd.et Wils.(习称“南五味子”）共同作为五味子应用。我国五味子资源丰富，分布广泛，对于其化学成分和药理作用的研究也比较深入。早期的研究多集中在五味子的脂溶性成分方面，从五味子中分离得到的木脂素类单体化合物有近40种，其药理作用研究涉及消化系统、心血管系统、中枢神经系统、生殖系统以及抗氧化、抗衰老等各个方面。但传统用药习惯以及许多五味子水提液的显著的药理活性实验结果，提示五味子水溶性有效成分的研究不可忽视。20世纪90年代以来，许多学者从五味子水提液中分离得到了多糖有效部位，并对其药理活性进行研究，本文就此进行概述。
       　　1  制备与分析方法
       1.1  提取根据多糖溶于水的性质，一般采用水提取。常用的方法有热水或热弱碱性水浸提法。可直接提取，也可先以无水乙醇或其他有机溶剂脱脂后再进行提取。李巧云等［1］采用正交设计法对五味子多糖提取工艺进行优选，确定最佳工艺为料液比1∶25，温度100℃，时间4 h。
       1.2  醇沉水提液浓缩后加入乙醇可使多糖沉淀出来。醇沉浓度一般为80%，沉淀静置24 h以上使其沉淀完全。
       1.3  脱蛋白水提液乙醇沉淀物中往往夹杂植物蛋白杂质，通常可采用Savage法、三氯三氟乙烷与Sevage联用法、酶法与Savage联用法等方法除去蛋白质。除去蛋白质的样品用紫外分光光度计检验在280 nm处是否有吸收，无吸收则表明蛋白质已除尽。
       1.4  脱色五味子粗多糖中含有一些水溶性色素杂质，可采用加入活性炭加热的方法加以去除。
       1.5  其他小分子杂质的去除透析法是利用溶液浓度扩散效应，将分子量小的物质如无机、低聚糖等从透析袋渗透到袋外的蒸馏水中，不断水即可保持浓度差，从而除尽小分子杂质。张兰杰等［1］采用DEAE纤维素色谱柱层析去除小分子杂质，取得了较好的效果。得到两种多糖，分别占北五味子果实重量的0.387%和0.060%。
       1.6  分析方法对于五味子多糖一般采用比色法进行含量测定，采用一种或多种单糖混合物为对照品，用苯酚硫酸或蒽酮硫酸为显色剂，490 nm处分光光度法测定吸收度，计算含量。该方法测定出的含量实际是五味子粗多糖中的总糖含量［2，3］。对于五味子多糖的结构分析研究较少，徐世忱等［4］报道五味子多糖的一级结构是由7种以上单糖组成的杂多糖。
       　　2  药理作用
       2.1  保肝五味子粗多糖可使四氯化碳肝损伤小鼠升高的SGPT显著下降，肝糖元含量显著升高，并可显著增加四氯化碳中毒小鼠戊巴比妥钠睡眠时间［5］。进一步的研究表明，五味子多糖多次灌胃给药，对四氯化碳中毒小鼠肝中丙二醛含量具明显降低作用，亦能显著抑制小鼠肝匀浆脂质过氧化反应。能促进正常小鼠的胆汁分泌和部分肝切除后肝的再生。表明五味子粗多糖的保肝作用与其对抗脂质过氧化、促进肝再生和利胆作用有关［6］。曾靖等采用腹腔注射观察五味子多糖对小鼠肝糖原合成的影响，发现五味子多糖100 mg/kg及200 mg/kg单次腹腔注射或每日腹腔注射1次连续给药5 d对小鼠肝糖原的合成均无影响，但能使1.0 mg/kg/d×5 d阿托品增加小鼠肝糖原合成的作用减弱甚至消失，此外五味子多糖对四氯化碳损伤小鼠肝脏所致的SGPT水平也无影响。这些结果提示，五味子多糖可能不是五味子制剂保肝作用的主要有效成分。五味子多糖防止或拮抗适量阿托品增加肝糖原合成的作用及其机制值得进一步研究［7］。
       2.2  抗疲劳五味子粗多糖给小鼠按100，200 mg/kg多次灌胃，能明显提高小鼠的耐缺氧能力，具有抗疲劳作用［8］。
       2.3  免疫促进五味子粗多糖能明显对抗环磷酰胺所致小鼠外周血白细胞的减少，并增加免疫抑制小鼠胸腺和脾脏重量［9，10］。对正常小鼠也可明显增加免疫器官重量，明显增强网状内皮系统对印度墨汁的吞噬能力，可显著提高腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数，促进溶血素及溶血空斑形成，促进淋巴细胞转化［11，12］。
       2.4  抗氧化及抗衰老五味子粗多糖能显著抑制小鼠肝匀浆脂质过氧化反应，可明显降低老年大鼠血清过氧化脂质（LPO）含量，提高超氧化物歧化酶（SOD）活性［11~13］。谢大泽等［14］采用黄嘌呤Luminol(XL)和邻苯三酚Luminol(PL)两个化学发光系统的研究结果表明，五味子粗多糖具有较强的清除氧自由基的能力。苗明三观察了五味子多糖对衰老模型小鼠的影响，发现五味子多糖可使衰老小鼠已萎缩的胸腺明显增大变厚，胸腺皮质细胞数及脾淋巴细胞数明显增多，脾小结增大，使衰老小鼠已退行性变的神经细胞胞体增大，提示五味子多糖不仅可提高衰老小鼠的免疫功能，也可明显促进衰老小鼠神经细胞的发育［15］。
       2.5  抗肿瘤黄玲等［16］采用肿瘤移植的动物模型，研究五味子多糖的抑瘤率及对免疫器官的影响，结果表明高浓度的五味子多糖有较好的抑瘤作用，高浓度五味子多糖合环磷酰胺抑瘤率达74.5%，五味子多糖对荷瘤小鼠的免疫器官有较好的保护作用，说明五味子多糖能抑制肿瘤的生长，具有预防和治疗癌症的潜在价值。进一步的研究表明五味子多糖具有轻度抑瘤形态学表现，能促进细胞凋亡，瘤内及瘤周炎症反应明显，而瘤细胞坏死则与对照组相当，推测五味子多糖的抑瘤作用可能不是直接杀死瘤细胞，而与细胞凋亡及活化免疫细胞有关［17］。
       　　3  结语
       从以上文献资料可以看出，五味子多糖含量高，制备方法简便，药理活性强，在保肝、增强免疫、抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤等方面具有良好的应用前景。但目前的研究水平相对简单，主要表现在：研究对象多为粗多糖，含较多杂质；含量测定方法均为测定总糖的比色法，不能真实地反映多糖含量；结构的化学分析缺乏；药理实验多停留在行为学、器官和组织水平，机制研究不足等等。我国五味子资源丰富，应用范围广，如果能制备出纯度更高的多糖，对其一级、二级、三级结构、分子量分布及构效关系进行深入研究，对药理作用机理进行进一步探讨，按照新药研究方法对毒性、质量标准、工艺等进行规范化研究，研制出合格的中药五类新药为临床服务，相信对于五味子资源的深入利用将大有裨益。
       　　参考文献：
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       (暨南大学药学院，广东 广州  510632)
       基金项目：暨南大学药学院基金资助项目（No.200408）