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       【关键词】  朝鲜淫羊藿；,,生长年限；,,有效成分
       摘要：目的探讨不同年生的朝鲜淫羊藿有效成分的变化，为朝鲜淫羊藿规范化栽培生产提供理论依据。方法依照2000年版《中国药典》朝鲜淫羊藿项下检测方法，对不同年生栽培的朝鲜淫羊藿的有效成分进行检测分析。结果各样品总黄酮、淫羊藿苷的含量均远高于《中国药典》标准，且生长年限短比生长年限长含量高。结论 朝鲜淫羊藿林下仿生栽培的第2年开始采收，直至更新。
       关键词：朝鲜淫羊藿；  生长年限；  有效成分
       Effective Content Analysis of Epimedium koreanum Nakai.in Different Growth Number of Year
       QIN Jiamei,  DONG Ran,  ZHANG Weidong
       (1.Department of Biology,Tonghua Normal College,Tonghua 134002, China; 2.College of Horticulture, Jilin Agricultural University,Changchun 130018, China; 3.Horticulture Institute of Tonghua, Tonghua  134001,China)
       Abstract：ObjectiveTo reseaech effective content of  E.koreanum in different growth number of year.To offer theory basis for standard production of  E.koreanum.MethodsAccording to detection method  E.koreanumnuchainfra in Pharmacopoeia of Peoples Republic of China.To detect and analyse effective content in different growth number of year of  E.koreanum.ResultsContent of super flavone and icariin outclass standard of Pharmacopoeia of Peoples Repubilc of China. It"s higher in the shorter growth numder of year than in the longer.Conclusion E.koreanum that bionic planting under the leaf woods can be harvested in the second year,until renew.
       Key words：Epimedium koreanum Nakai;  Growth age limit;  Effective content
   
　　朝鲜淫羊藿Epimedium koreanumNakai.［1］主要分布于吉林省东部和辽宁省东部，黑龙江与吉林交界的地区也有少量分布。是2000年版《中国药典》（以下简称《药典》）记载的5种淫羊藿中质量最佳的一种，淫羊藿苷类成分含量远高于其他种类，是目前北方市场的主流品种，价格是其他种类的2~3倍［2］。具有补肾阳、强筋骨、祛风湿等功效，对阳痿、遗精、筋骨酸软、手足麻木拘挛、更年期高血压、心脑血管疾病等方面有显著疗效［3］。淫羊藿是现在应用最为广泛的中药之一，受到国内外的广泛关注，除传统用法外，临床上还常用于治疗骨质疏松症、更年期综合症、乳房肿块、高血压、冠心病等，另外还具有提高机体免疫力、抗衰老、抗肿瘤、抗艾滋病等作用［4］，有巨大的开发潜力。
       朝鲜淫羊藿野生资源丰富，上世纪末仅吉林省年蕴藏量即达100万kg以上［5］，由于抢收、滥收及采收方法不当，造成该资源贮量骤减。随着中药GAP的实施，我们在阔叶林下仿生栽培［6］模式研究的基础上，进行了朝鲜淫羊藿无公害规范化生产技术示范基地建设。本试验对栽培的不同年生的朝鲜淫羊藿，进行了有效成分的检测分析，旨在探讨生长年限对朝鲜淫羊藿有效成分积累的影响，为栽培朝鲜淫羊藿采收年限的确定提供理论依据。
       　　1  供试材料
       1.1  采样地点通化市园艺研究所试验田（人工林栽培）及敦化生产示范基地（天然次生林清林后栽培），郁闭条件分别为0.3，0.5，0.8的地块，按十字采样法确定5个采样点。
       1.2  采样时间8月23日~9月3日。
       1.3  采样方法用洁净镰刀于各样点割取地上全株，并捆成小把，于室内阴干。
       1.4  样品处理摘取干燥的小叶，粉碎过60目筛，备用。
       　　2  仪器和试剂
       2.1  仪器美国Aglent1100series高效液相色谱仪，日本岛津UV120紫外可见分光光度计；昆山超声仪器有限公司KQ500DE数控制医用超声波清洗机。
       2.2  试剂标准品：中国药品生物制品检定所；乙腈为色谱纯；其它试剂为分析纯。
       　3  方法与结果
       3.1  检测方法按2000年《药典》规定检测方法。黄酮：紫外分光光度计法；淫羊藿苷：高效液相色谱法。
       3.2  色谱条件Shimpackods(4.6 mm×150 mm，5 μm)，流动相乙腈水（30∶70）；检测波长270 nm，流速1.0 ml/min，进样量20 μl，柱温：室温24℃。
       3.3  对照品溶液和样品液的制备
       3.3.1  对照品溶液的制备取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成10 μg/ml的溶液为对照液；
       3.3.2  样品液的制备取样品粉末2.00 g，置25 ml容量瓶中加20 ml稀乙醇（20%）超波处理1 h。再称定重量，用稀乙醇补足失重，摇匀，过滤，取续滤液。
       3.4  总黄酮测定
       3.4.1  标准曲线的绘制按《药典》(附录V A)方法。
       3.4.2  含量测定方法精密称取供试样品液各0.5 ml置50 ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度。以试剂为空白，在波长270 nm紫外光处测吸收度。计算各采收期总黄酮的百分含量。结果见检测结果见表1。
       3.5  淫羊藿苷含量测定
       3.5.1  标准曲线的绘制按《药典》（附录Ⅵ D）方法。
       3.5.2  含量测定将供试液及对照液用滤膜压滤约2 ml备用。精密吸取样品按上述色谱条件进行测定，取4.7 min附近的峰面积值计算结果。结果见表1。表1  不同年生朝鲜淫羊藿有效成分检测结果（略）  
       　　4  小结
       4.1  各样品总黄酮、淫羊藿苷的含量均为郁闭度小比郁闭度大的高，即0.3＞0.5＞0.8。表明朝鲜淫羊藿有效成分积累与光照条件密切相关。认为光照强，光合产物积累多。
       4.2  不同年生各样品有效成分含量均超过《药典》标准（总黄酮＞5%；淫羊藿苷＞5%）。相同郁闭度条件下，栽培年限短高于年限长。只有3年生郁闭度为0.8的样品含量低，是由于该样品是地上全草所致，因为地上茎中明显低于叶中［7］，样品中增加了茎所占分量。
       4.3  栽培第1年主要进行生根和形成新根茎及越冬芽的生长，地上植株短小（10~15 cm），且每株一苗，没有采收意义。从第2年开始，每株4~6苗，株高30 cm左右，且每年植株都有递增。因此，进行林下仿生栽培朝鲜淫羊藿可于幼龄林下栽培，随着郁闭度的增大，朝鲜淫羊藿群体中个体数量增加，约15年左右需更新。故，林下仿生栽培朝鲜淫羊藿可于栽培第2年开始采收，连年采收直至更新。
       参考文献：
       ［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2000：267.
       ［2］郭宝林，肖培根.中药淫羊藿主要种类评述［J］.中国中药杂志，2003，28（4）：303.
       ［3］孙国华.淫羊藿的综合研究与开发利用［J］.中国中医药信息杂志，1997，4（4）：13.
       ［4］郭宝林，王玉兰，陈建民，等.药典中5种淫羊藿中黄酮类成分的反相高效液相色谱分析［J］.药学学报，1999，31（4）：292.
       ［5］刘桂荣，耿  ，黄万忠，等.朝鲜淫羊藿的研究进展［J］.特产研究，1998，28（4）：57.
       ［6］秦佳梅，田  洪，张卫东，等.淫羊藿林下栽培［J］.人参研究，1999，11（1）：17.
       ［7］陈  萍，沙  明，杨松松，等.朝鲜淫羊藿中黄酮类成分在不同采收期限的含量变化［J］.中国中药杂志，1996，21（2）：86.
       1.通化师范学院生物系，吉林 通化  134002； 
       2.吉林农业大学园艺学院，吉林 长春  130018； 
       3.吉林省通化市园艺研究所  134001
       基金项目：吉林省科技厅资助项目（No.20000216-06）
作者简介：秦佳梅(1965)，女(汉族)，吉林通化人，现任通化师范学院生物系副教授，硕士学位，主要从事长白山野生经济植物驯化及药用植物规范化栽培技术研究工作.