高效液相色谱法测定刺五加中丁香苷的含量
作者:刘建华, 吕宁, 刘娟
《时珍国医国药》 2006年 第6期
多个检索词,请用空格间隔。
【关键词】 刺五加;,,丁香苷;,,高效液相色谱法
摘要:目的建立刺五加药材中丁香苷含量测定方法。方法采用C18柱,甲醇 水 乙酸(300∶700∶3.5)为流动相,流速:0.8 ml・min 1,检测波长265 nm。结果丁香苷的加样回收率为98.3%,RSD为1.23% 。结论该法简便,结果准确、可靠。
关键词:刺五加; 丁香苷; 高效液相色谱法
Determination of Syringin in Radix Acanthopanacis Senticosi by HPLC
LIU Jian hua1, L Ning2, LIU Juan3
(1.Huzhou Normal College , Huzhou, 313000, China; 2.The Third Affiliated Hospital to Qiqihar Medical College,Qiqihar,161000, China; 3.Pharmacy College in Jiamusi University, Jiamusi 154007, China)
Abstract:ObjectiveA method of determination of syringin in Radix Acanthopanacis Senticosi is developed. MethodsC18 column was used, MeOH H2O HAc (300∶700∶3.5) as mobile phase. Flow rate was 0.8 ml・min 1,UV detectection wave length was 265 nm . ResultsThe mean recovery of syringin was 98.3% , RSD was 1.23%.ConclusionThe method is rapid ,simple and reliable .
Key words:Radix Acanthopanacis Sentilosi; Syringin; HPLC
刺五加作为药用历史悠久。刺五加中的苷类物质具有重要的生物活性,其中又以丁香苷的含量最高[1]。因此,本文采用丁香苷为测定指标,建立含量测定方法。
1 仪器与试药
Waters 2695高效液相色谱仪;2996光电二极管阵列检测器;丁香苷对照品由中国药品生物制品检定所提供;刺五加于2003 09采自黑龙江省佳木斯地区。经佳木斯大学药学院生药学教研室刘娟教授鉴定为真品。
甲醇为色谱纯,水为双蒸水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件色谱柱为C18 柱(3.9 mm×150 mm,5μm);流动相为甲醇 水 乙酸=300∶700∶3.5;流速为0.8 ml/min;柱温为30℃;检测波长为265 nm;进样量2μl。在此条件下丁香苷的保留时间为6.1 min, 丁香苷能与其他成分很好分开。色谱图见图1。
2.2 方法学考察及样品测定
2.2.1 线性关系精密称取丁香苷对照品1.0 mg,以甲醇溶解,制成10 μg/ml的溶液并经0.45 μm微孔滤膜过滤。按上述色谱条件分别进样1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5,4.0 μl,测定,以峰面积(A)为纵坐标(Y),进样量(mg)为横坐标(X)绘制工作曲线,得回归方程为y=5.688×109x-6.223×103,线性范围为0.000 01~0.000 04 mg,r=0.999, 标准品在0.000 01~0.000 04 mg范围内与峰面积呈良好线性关系。
2.2.2 精密度实验取同一标准品溶液,重复进样5次,2 μl/次,测其峰面积,计算其相对标准偏差RSD为0.56%(小于3%)。
2.2.3 稳定性实验取同一浓度刺五加根溶液,重复进样5次,测其峰面积,计算其相对标准偏差RSD为0.65%。样品溶液在24 h内稳定性良好。
2.2.4 重现性实验精密称取5份刺五加根1.000 0 g, 按含量测定项方法制得供试品溶液,分别进样2 μl,结果RSD为1.24 (n=5)。
2.2.5 样品测定取刺五加干燥根,粉碎,过60目筛,得粉末。取粉末约1克,精密称定,以甲醇为溶剂,超声提取40 min,滤液经0.45 μm微孔滤膜过滤后,按上述色谱条件测定。结果,刺五加中丁香苷平均含量为0.010 4% 。
2.2.6 加样回收率实验精密称取5份已测知丁香苷含量的刺五加根样品1.000 0 g ,分别准确加入丁香苷对照品1.1 mg,按样品测定项下方法操作。由下式算出丁香苷的回收率:表1 回收率实验比较(略)
3 讨论
3.1 本实验采用过不同的流动相,结果表明,甲醇 水 乙酸=300∶700∶3.5的分离效果最好。
3.2 取丁香苷对照品溶液进行紫外扫描,其最大吸收波长为265 nm和224 nm,为避免溶剂干扰,故选择检测波长为265 nm。
3.3 该法简便,结果准确、可靠,可作为刺五加中丁香苷的含量测定方法。
参考文献:
[1]徐国钧,何宏贤,徐珞珊,等.中国药材学[M].北京:中国医药科技出版社,1996:302.
1.湖州师范学院生命科学学院,浙江 湖州 313000;
2.齐齐哈尔医学院附属第三医院,黑龙江 齐齐哈尔 161000;
3.佳木斯大学药学院 ,黑龙江 佳木斯 154007
作者简介:刘建华(1971 ),男(汉族),黑龙江齐齐哈尔人,现任湖州师范学院生命科学学院副主任药师,硕士学位,主要从事药学相关学科的教学科研.