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       【关键词】  菌核侧耳；,,比色法；,,三萜类
       摘要：目的对菌核侧耳中的三萜类成分进行含量测定。方法采用比色法，测定了菌核侧耳菌丝体和子实体三萜类化合物的含量，还优选了其显色条件，5%香草醛-冰醋酸最佳用量为0.2 ml，高氯酸最佳用量为1 ml。结果菌核侧耳子实体总三萜含量为1.16%，菌丝体为1.31%，RSD为1.05%。结论该方法简便、迅速可靠。
       关键词：菌核侧耳；  比色法；  三萜类
       The Content of Triterpenoids in Pleurotus tuber-regium(Fr.) Sing Determined by Colorimetry
       YU Zhijian, BAO Shuiming, LI Rongtong
       (Department of Biology, East China College of Science and Technology, Fuzhou, Jiangxi 344000, China)
       Abstract：ObjectiveTo determine the content of triterpenoids from mycelial and fruit body of Pleurotus tuber-regium(Fr.) Sing were determined by colorimetry.MethodsThe optimum volume of 5% vanillin-glacial acetic acid was 0.2 ml, and perchloric acid was 1 ml. ResultsThe results shaved triterpenoids composition of fruit body is 1.16%, the mycelium was 1.31%, RSD was 1.05%.ConclusionThis method is simple and convenient, fast and reliable. The Color Conditions were optimized.
       Key words：Pleurotus tuber-regium(Fr.) Sing;  Colorimetry;  Triterpenoids
        菌核侧耳Pleurotus tuber-regium(Fr.) Sing别名虎奶菌、核耳菇等，为一种具有很大开发前景的珍稀食药用真菌。据《中药药名辞典》［1］载：虎奶菌，甘、温、补气益血，治气血虚弱症。云南民间把它作为一种广泛使用的真菌药材，具有补肾、补血、平喘的功效，对老年慢性支气管哮喘、支气管炎有显著疗效增加，经现代研究表明，萜类化合物是其主要有效化学成分之一。为了更好地利用和开发其药用成分，本实验以熊果酸为对照，采用香草醛-冰醋酸、高氯酸显色的方法，对菌核侧耳三萜成分的含量进行测定。
       　　  仪器与材料
       753BI微机紫外可见分光光度计；香草醛、冰醋酸、高氯酸；熊果酸购于中国药品生物制品鉴定所；菌核侧耳菌株由东华理工生物系食用菌研究中心提供。
       　　2  方法与结果
       2.1  标准品液配制精密称取干燥至恒重的熊果酸对照品10 mg，置于100 ml容量瓶中，加95%乙醇溶解并定容至刻度，浓度为0.1 mg/ml。
       2.2  显色剂使用条件的选择
       2.2.1  5%香草醛冰醋酸用量的优选取熊果酸对照品（0.1 mg/ml）0.6 ml 6份，水浴蒸干后各加5%香草醛冰醋酸0.1，0.2 ，0.3 ，0.4 ，0.5 ，0.6 ml，然后再各加高氯酸0.6 ml，于60℃水浴10 min，取出置冰水中冷却，加冰醋酸5 ml，摇匀后在548 nm处测定吸收值。结果见表1。表1   不同5%香草醛冰醋酸用量结果（略）
       2.2.2  高氯酸用量的优选取熊果酸对照品（0.1 mg/ml）0.6 ml 6份，水浴蒸干后各加5%香草醛-冰醋酸0.2 ml，再分别加入高氯酸0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2 ml，于60℃水浴10 min，取出置冰水中冷却，加冰醋酸5 ml，摇匀后在548 nm处测定吸收值。结果见表2。表2  不同高氯酸用量结果高氯酸用量（略）
       2.3  标准曲线的绘制精密吸取熊果酸对照品溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2 ml，按上述优选条件及步骤在548 nm处测定吸收值，以吸收度为纵坐标，熊果酸的微克数做横坐标作标准曲线，回归方程为y = 0.104 5x - 0.004 2，R2 = 0.995 8，表明在0.02~0.12 mg范围内呈良好线性关系。
       2.4  样品含量测定精密称取菌核侧耳子实体粗粉，干燥菌丝粗粉各10 g，用醋酸乙酯在索氏提取器中回流4 h，提取液浓缩至干后，置于100 ml容量瓶中，加95%乙醇溶解并定容至刻度，摇匀，测定吸收值，按回归方程计算含量。结果见表3。表3  样品测定结果（略）
       　　3  讨论
       萜类化合物为药用真菌，植物的主要有效化学成分之一，采用比色法测定总三萜类总成分的含量，已有很多报道［2~5］，此法简便可靠，但其影响因素较多，本实验优选了其显色条件。实验结果表明，菌丝体总三萜比子实体要高，为其液体发酵开发相关的保健产品打下理论基础。
       　参考文献：
       ［1］蔡永敏.中药药名辞典［M］.北京：中国中医药出版社，1996:198.
       ［2］皮文霞，蔡宝昌，郭胜伟，等.分光光度法测定山茱萸制剂中总三萜酸的含量［J］.南京中医药大学学报，2003，19(2):99.
       ［3］王文祥，顾振纶.比色法测定山楂总三萜酸含量［J］.中国野生植物资源，2001，20(5):47.
       ［4］帕丽达，堵年生，丛媛媛，等.比色法测定琐琐葡萄中总三萜类成份的含量［J］.华西药学杂志，2002，17(6):475.
       ［5］赵明文，王晨光，鲍  鹏，等. 不同灵芝菌丝体中三萜与多糖含量的比较 ［J］.中国食用菌，2003，22 (2): 43.
       (东华理工学院， 江西  抚州  344000)
       基金项目：东华理工学院硕士启动基金资助项目(No.DHS-0428)
作者简介：余志坚(1978)，男(汉族)，江西临川人，现任东华理工学院生物系助教，硕士学位，主要从事生物化学的教学研究工作.