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       【关键词】  正交实验法；,,匙羹藤；,,总皂苷；,,提取工艺
       摘要：目的研究匙羹藤总皂苷的最佳提取工艺条件。方法以匙羹藤总皂苷得率为指标，采用正交实验法考察乙醇浓度、料液比、提取时间、提取次数等4个因素对提取效果的影响。结果匙羹藤总皂苷的最佳提取工艺：乙醇浓度70%，料液比1∶6，提取时间3 h，提取2次。结论此最佳工艺可用于匙羹藤总皂苷的提取。
       关键词：正交实验法；  匙羹藤；  总皂苷；  提取工艺
       Study on the Process of the Total Saponins of Gymnema sylvestre by Orthogonal Design
       HOU Huirong， WU Xiangyang， YANG Liuqing， JIANG Song， FU Haizhen， FAN Qunyan， ZHU Xiaohuan
 
　　(1.Shool of Biology and Environment Engineering ,Jiangsu University ,Zhenjiang 212013, China; 2.Chemistry and Chemical Engineering, Jiangsu University ,Zhenjiang 212013, China; 3.School of Pharmacy, Jiangsu University, Zhenjiang, 212013, China)
       Abstract：ObjectiveTo study the optimum extraction process of the total saponins of Gymnema sylvestre. MethodsThe orthogonal test were used,in which the output of the total saponins was regarded as an examine target and the influence of four factor in the extraction of effective substance were studied.The four factors are the concentration of ethanol,ratio of material to liquid, the time of extraction and the mumber of extraction.ResultsThe optimum extraction process of the total saponins of Gymnema sylvestre has been established as follows：the concentration of ethanol 70%, ratio of material to liquid 1:6, extraction time 3h, 2 times.ConclusionThe optimum process is applicable for extraction of the total saponins of Gymnema sylvestre.
       Key words：Orthogonal test ;  Gymnema sylvestre;  Total saponins;  Extraction process 
   
　　匙羹藤 Gymnema sylvestre (Retz.) Schult. 又称武靴藤、羊角藤、金刚藤，系萝科植物，广泛分布于印度、非洲、越南及我国广东、广西、福建、台湾和云南等省区。全株可药用，研究表明其根具有收敛、健胃、滋补强壮、清热等作用；其叶性平、味苦，具祛风止痛、生肌消肿之功效。近年来国内外学者通过对其化学成分和药理作用的研究，发现其提取物具有降血糖，抗龋齿及抑制甜味反应等作用［1，2］，其有效成分匙羹藤酸（ gymnemic acid，简称 GA ）属齐墩果烷型皂苷，有防治糖尿病和肥胖症作用［3，4］。本文用正交实验法对其提取工艺进行优化，以获得最佳工艺参数。
       　　1  仪器与材料
       1.1  材料和仪器匙羹藤叶购于广西武鸣医药公司，经江苏大学药学院生药学教授张朝晖鉴定系萝科植物Gymnema sylvestre (Retz.) Schult.的叶：于70℃烘箱中干燥，粉碎，贮于干燥器中备用。
       R-200型旋转蒸发器（瑞士Büchi公司）；数控恒温水浴锅（巩义市英峪予华仪器厂）；电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）。
       1.2  试药医用乙醇：浓度95%；其余试剂均为分析纯。
       　　2  实验方法
       2.1  正交实验设计根据预实验结果，选取乙醇浓度、料液比、提取时间、提取次数为考察因素，各取3个水平，选用L9(34)正交表进行实验。以匙羹藤总皂苷得率为指标，每次匙羹藤叶用量为50 g。因素与水平安排见表1。表1  因素水平水平 （略）
       2.2   样品溶液的制备称取匙羹藤干燥碎叶，加入70%乙醇回流提取2次，滤液合并后浓缩，回收乙醇，得浸膏。加适量水溶解离心，上清液用石油醚萃取以除去叶绿素等脂溶性物质，然后用水饱和的正丁醇萃取3次，收集正丁醇层，减压浓缩，烘干，得总皂苷，计算其得率。
       　　3  结果与分析
       3.1  正交实验分析由表2可知，RD＞RA＞RC＞RB，4个因素对总皂苷得率的影响主次顺序为D＞A＞C＞B，即提取次数＞乙醇浓度＞提取时间＞料液比；最佳工艺参数为A3B1C3D2，即乙醇浓度A3=70%，料液比B1=1∶6，提取时间C3=3 h，提取次数D2=2次时，总皂苷得率最高。由k得出优水平为A3B1C3D2与总皂苷得率最高的工艺参数一致。
3.2  方差分析表3是方差分析的结果。由F值可知各因素对实验结果影响的程度是D＞A＞C＞B，即影响最大的是提取次数，其次是乙醇浓度，然后是提取时间、固液比，因素D（提取次数）有显著性差异，这与上面结果分析一致。表2  L9(34)正交实验设计及结果（略）表3  方差分析差异（略）
       　　4  结论
       以总皂苷得率为考察指标，采用正交实验法对匙羹藤总皂苷提取工艺进行优选，得最佳提取工艺为：乙醇浓度70%，料液比1∶6，提取时间3 h，提取次数2次。
       　　参考文献：
       ［1］夏玉凤，刘  欣，余国奠.匙羹藤的开发研究［J］.中国野生植物资源，2000，19（3）：1.
       ［2］ Rutt Suttisri，Ik-Soo Lee，et al.Plant-derived triterpenoid sweetness inhibitors［J］.Journal of Ethnopharmacology，1995，47（4）：9.
       ［3］Jing-Tian Xie，Anbao Wang，Sangeeta Mehendale，et al.Anti-diabetic effects of Gymnema yunnanense extract［J］.Pharmacological Research，2003，47（6）：323.
       ［4］Derek E.Woodgate，MSC，et al.Effects of a Stimulant-Free Dietary Supplement on Body Weight and Fat Loss in Obese Adults:A Six-Week Exploratory Study［J］.Current Therapeutic Research，2003，64（4）：248.
　　
　　［5］甄汉深，陈  勇，黄慧学.匙羹藤叶有效部位提取工艺的研究［J］.中药材，2000，23（9）：570.
       ［6］韦宝伟，施  骞.匙羹藤的研究概况［J］.国外医药・植物药分册，1996，11（3）：107.
       1.江苏大学生物与环境工程学院，江苏 镇江  212013；
 
　　2.江苏大学化学化工学院，江苏 镇江  212013； 
       3.江苏大学药学院，江苏 镇江  212013
       基金项目：江苏大学微纳米科学技术研究开放基金资助项目
       作者简介：侯会绒(1980)，女（汉族），山西运城人，现在读江苏大学食品科学与工程专业硕士研究生，学士学位，主要从事生物资源的研究与开发工作.