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       【关键词】  四物汤;,,活性成分;,,免疫调节,
       摘要：中医经典良方四物汤及其单药主要活性成分当归多糖、地黄多糖、川芎嗪、芍药苷、阿魏酸等均具有一定的免疫调节作用，反映在对免疫器官骨髓造血和胸腺脾脏功能的改善，活化免疫细胞以及促进细胞因子分泌等方面。该文主要对近年来与其免疫药理相关的文献进行综述。
       关键词：四物汤;  活性成分;  免疫调节
       Progress in the Study on the Immunomodulatory Effect of Siwu Decoction and its Active Components
       LI Chunrong, WANG Shengqi
       (Institute of Radiation Medicine, Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100850, China)
       Abstract:Siwu Decoction and its main active components can improve immune function as traditional decoction. They may regulate hemopoiesis, affect immunocyte activity and promote cytokine secretion as well. This review focuses on the studies of their immunomodulatory effects in recent years.
       Key words:Siwu Decoction;  Active component;  Immunomodulation 
   
　　四物汤是中医经典良方，见于宋代《太平惠民和剂局方》，出自唐・蔺道人《仙授理伤续断秘方》,系《金匮要略》中的胶艾汤减去阿胶、艾叶、甘草而来,由熟地、当归、白芍、川芎四味单药组成。复方主要功用为补血活血。单药中熟地黄可滋阴补血、益精填髓，当归可补血活血，芍药能养血敛阴，川芎可活血行气、祛风止痛。四物汤具有调节机体免疫功能之功效,其作用与单药主要活性成分密不可分，现就其免疫药理研究进展综述如下。
       　　1  对免疫器官的影响
       免疫器官主要包括骨髓、胸腺、腔上囊等中枢免疫淋巴样组织和脾脏、淋巴结、黏膜和皮肤相关的淋巴组织等外周免疫淋巴器官，它们的发育状况直接影响着机体免疫力。中枢免疫器官骨髓、胸腺是免疫细胞的发源地,造血干细胞在此发育分化为各类成熟的免疫细胞，所以四物汤及其单药的免疫调节功能与其补血活血功效密切相关。
       1.1   复方四物汤对免疫器官的影响四物汤能改善造血系统功能，升高血虚证小鼠骨髓有核细胞数及骨髓 DNA量［1］，提高  CD34+细胞在骨髓有核细胞中的比例，显著升高血虚证小鼠或辐射小鼠骨髓造血组细胞集落（CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-mix）形成单位数量［2~5］,提高正常小鼠的脾脏和胸腺指数［6，7］，对抗辐射和环磷酰胺所致的免疫器官脾脏和胸腺重量降低［3］。
       1.2   单药主要活性成分对免疫器官的影响熟地黄可显著促进正常小鼠骨髓造血干细胞（CFU-S）的增殖［8］。其主要有效成分地黄多糖能明显改善骨髓造血功能，拮抗衰老模型小鼠胸腺及脾脏的萎缩［9］,能显著提高经环磷酰胺处理后小鼠 CFU-GM产率，可使经 60Coγ射线照射小鼠的脾结节数明显增加［10］。当归主要活性成分当归多糖和阿魏酸，均能增加正常小鼠和血虚小鼠骨髓有核细胞数量，提高骨髓造血干/组细胞集落生成水平［11］，能促进60Coγ射线照射后小鼠内源性脾结节生成［12］；当归提取液和阿魏酸可明显增加正常小鼠脾脏和胸腺重量［13］；当归多糖能明显提高血淤证大鼠胸腺指数和脾指数，对抗氢化可的松引起的小鼠脾萎缩［14，15］。白芍活性成分主要是一组糖苷类物质，其中90%为芍药苷。梁乾德等［16］利用 HPLC分析四物汤促进造血功能的主要成分即为芍药苷,芍药苷可促进放射线致血虚证小鼠骨髓造血干/组细胞的增殖显著升高。川芎主要成分为川芎嗪和阿魏酸，川芎嗪显著提高急性放射损伤后小鼠骨髓组织中单核细胞数量、巨核细胞数量和造血组织面积［17］。
       2  对免疫功能的影响
       2.1   对特异性免疫的促进作用
       2.1.1  细胞免疫 细胞免疫是细胞介导的一种重要免疫反应，常用检测方法包括体内迟发型超敏反应（DTH）的检测和体外的T细胞计数，T细胞活化试验，细胞毒实验以及混合淋巴细胞反应（MLR）。四物汤能提高小鼠 ANAE阳性细胞的百分率［6］。正常小鼠四物汤灌胃后迟发型超敏反应 DTH值明显增高［7］。四物汤能显著促进自发性和 ConA刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖［18，19］。白芍总苷、川芎嗪、川芎多糖、当归液及阿魏酸、地黄等均能不同程度地促进小鼠淋巴细胞转化和增殖［20~22］。当归多糖对由亚适量 ConA活化的小鼠胸腺细胞有明显促进增殖的作用,且体外可以拮抗氢化可的松对小鼠胸腺细胞增殖的抑制作用［15］，能明显增强小鼠对牛血清白蛋白诱发的迟发型超敏反应 (DTH)［23］。地黄苷A可增强小鼠迟发性变态反应［24］。
       2.1.2  体液免疫体液免疫主要是由 B细胞介导的另一种重要的免疫反应，通过分泌的免疫分子实现免疫功能，能防御细胞外微生物及其毒素。体液免疫功能的检测包括免疫球蛋白定量检测，常见抗体的检测以及B细胞数量和功能的检测。四物汤能提高小鼠抗体产生的滴度［6］。白芍总苷对LPS体外诱导的小鼠脾淋巴细胞(B细胞)增殖和对羊红细胞(SRBC)免疫小鼠脾淋巴细胞的抗SRBC抗体(溶血素)产生呈现低浓度促进和高浓度抑制的双向调节作用，对环磷酰胺引起的抗体减少或者增多有明显的拮抗作用［25］。当归和阿魏酸均能显著增加正常小鼠血清溶血素含量和抗体生成细胞数［13］。当归对辐射小鼠脾脏抗体形成细胞释放溶血素量、血清溶菌酶量、ANAE阳性淋巴细胞比率及红细胞 C3b受体花环率均有不同程度的促进或提高作用。当归多糖对60Coγ射线照射小鼠 ConA诱导的抗体产生能力明显增强［26］。地黄水煎液对类阴虚小鼠的脾脏 B淋巴细胞功能有明显的增强作用［27］。地黄苷A能明显提高小鼠血清溶血素水平［24］。
       2.2    非特异性免疫功能的促进作用
       2.2.1   白细胞及单核巨噬细胞系统 白细胞与单核巨噬细胞系统细胞具有强大的吞噬能力，是参与机体非特异性免疫的重要部分，并能参与机体的特异性免疫。其功能提高主要是通过增加吞噬细胞数量和增强其吞噬能力来实现的。利用小鼠碳廓清试验可测定主体动物吞噬细胞的吞噬功能，也可利用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的数量体外观察其吞噬功能。四物汤能提高巨噬细胞吞噬鸡红细胞的百分率，表明四物汤可显著提高 Balb/c小鼠巨噬细胞吞噬功能［6］。正常小鼠腹腔注射川芎嗪提高小鼠碳粒廓清能力［28］。腹腔注射白芍总苷可以提高小鼠腹腔吞噬百分率和吞噬指数［25，29］。当归多糖或者阿魏酸能明显提高小鼠单核巨噬细胞系统对碳粒（或染料）的廓清速率和腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬能力［13］。
       2.2.2  细胞因子细胞因子是免疫活性细胞、淋巴细胞、单核巨噬细胞和其他相关细胞产生的一类蛋白性物质，在免疫细胞的增殖和活化，调节机体免疫功能中发挥重要作用。免疫相关的细胞因子主要包括白细胞介素类（IL），集落刺激因子（CSF），肿瘤坏死因子（TNF），干扰素（IFN），转化生长因子以及趋化因子等其他细胞因子。郭平等［5］实验发现四物汤能提高放射线致血虚证小鼠骨髓 Epo和G-CSF基因表达，可促进 ConA激活脾淋巴细胞分泌IL-6、IL2［19，30~31］。促进细胞脂多糖 (LPS)激活巨噬细胞产生IL-1因子的活性［18］。高月等［2］利用生物芯片技术发现芍药苷可促进骨髓基质细胞 (G-CSF,GM-CSF,PDGF-α，IL2，IL-9，IL-18)等基因表达,抑制造血抑制因子(MIP)的表达，通过细胞因子调控造血细胞。当归可通过保护和改善造血微环境,直接或间接地刺激造血微环境中的巨噬细胞、淋巴细胞、基质细胞等分泌较高活性的红系造血调控因子,粒单系集落刺激因子(GM-CSF)、IL-3等造血生长因子,促进人早期造血细胞发生［32］。当归对实验小鼠和 60Coγ射线照射后小鼠 ConA诱导的IL2的产生有明显促进作用［33］。在 LPS刺激下,当归多糖能明显提高小鼠腹腔巨噬细胞分泌 TNF-α的功能［34］，当归多糖能诱导腹腔巨噬细胞产生 NO及IL-1［35］。综上，四物汤的物质基础地黄多糖，当归多糖，阿魏酸，芍药苷，川芎嗪等活性成分，均不同程度地表现出免疫调节作用，其机理与促进骨髓造血、增加免疫细胞活性以及促进免疫分子分泌有关，四物汤的免疫调节作用来源于这些活性成分，而又非简单的效用叠加，对四物汤复方的作用机制和分子机理的研究仍待深入。基于中药化学、中药基因组学和蛋白组学理念，利用生物芯片和生物信息学技术，结合现代分子生物学研究手段，寻找中药复方的复合靶标,以求科学诠释中药的作用机理应该是一个可行的思路。
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　　基金项目：国家自然科学基金资助项目（No.30271617）
       
　　　　　　　北京市“248”重大创新工程资助项目（NO.H010210220113）
       (中国人民解放军军事医学科学院放射医学研究所, 北京  100850)