文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【关键词】  β
       摘要：目的探讨β细辛醚的平喘作用。方法豚鼠随机分成β细辛醚高、中、低剂量组、阳性药物组（离体实验为氨茶碱，整体实验为地塞米松）和模型空白对照组，以豚鼠离体气管片实验和卵蛋白喷雾致喘整体实验，研究β细辛醚的平喘作用。结果β细辛醚可直接舒张豚鼠离体气管平滑肌；对整体哮喘模型，β细辛醚能延长哮喘发作的潜伏时间，减轻症状发作的严重程度。结论β细辛醚有平喘作用。
       关键词：β细辛醚；  支气管哮喘
       Study on the Effect of βasarone on Bronchial Asthma
       SHI Chen， FANG Yongqi
       (The Central Laboratory of The First Affiliated Hospital of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine, Guangzhou,510405, China)
       Abstract：ObjectiveTo study on the effect of βasarone on bronchial asthma. MethodsThe Guinea pigs were randomly divided into five groups: βasarone of high dose, βasarone of moderate dose, βasarone of low dose, aminophylline in vitro or dexamethasone in vivo, and control. Adopted the Guinea pig"s tracheal slice test in vitro and ovalbumin-induced asthma test in vivo respectively to study the effect of β-asarone on bronchial asthma. Results βasarone with all three doses showed the effect of the relaxation of the contractive tracheal slices in vitro, and the prolongation of the asthma delitescence, mitigate the serious extent of symptoms of asthma in vivo. Conclusionβasarone has positive effect on bronchial asthma.
       Key words： βasarone;   Bronchial asthma
   
　　《本经》中记载石菖蒲“主风寒湿痹，咳逆上气”，2000年《中国药典》收录其具有“开窍豁痰”的功效。我们已报道了石菖蒲及其主要成分β细辛醚对中枢神经系统的作用［1，2］，但β细辛醚对支气管哮喘是否有作用，未见文献报道。本实验通过豚鼠离体气管片实验和整体平喘实验对β细辛醚的平喘作用进行研究。报道如下。
       　　1  材料与方法
       1.1  动物健康Hartly豚鼠，雌雄各半，购自广东省医学实验动物中心，动物合格证号：2004A023。
       1.2  试剂与仪器 氯化乙酰胆碱，上海三爱思试剂有限公司，批号20030115；磷酸组胺，国药集团化学试剂有限公司，批号F20040315；卵蛋白片，中国医药（集团）上海化学试剂公司，批号970612；氢氧化铝，广州化学试剂厂，批号0306012。 BL310生物机能实验仪，成都泰盟电子有限公司；AE200电子分析天平，Mettler；QYWI型药物雾化器，宁波市海曙医疗用器厂。
　　
　　1.3  药物石菖蒲购于广州中医药大学第一附属医院药房，经鉴定为天南星科植物石菖蒲Acorus tatarinowii schott的干燥根茎。实验用药液由本实验中心制备。
       1.3.1  β细辛醚取石菖蒲挥发油，冷冻结晶法精制得到β-细辛醚。经中国广州分析测试中心三大光谱（GC/MS，NMR，IR）检测，证实其成分为β细辛醚，含量99.55%。
       1.3.2  阳性对照药地塞米松磷酸钠注射液，广东邦民制药厂有限公司，批号040205；氨茶碱片，天子福国际药业（江苏）有限公司，批号030121。
       1.4  分组与对照豚鼠随机分为5组：β细辛醚高、中、低剂量组，阳性药物组（氨茶碱或地塞米松）和模型空白对照组。
       1.5  方法
       1.5.1  豚鼠离体气管片法［3］豚鼠50只，体重300~400 g，雌雄各半。每次取1只，击毙，立即分离出气管，自甲状软骨下至气管分叉处剪下全部气管，放入氧饱和的克-亨氏营养液内，并继续通氧，在气管的腹面（软骨环面）纵行切开，每隔3个软骨环横切，每两段气管片的纵切口处用线缝上，相互连成一串。将缝好的气管片标本放入盛有克-亨氏液20 ml的麦氏浴槽内，下端固定于玻璃通气钩，上端以较长的线连至拉力换能器上（负荷约1.0 g），以便记录反应。浴槽内温度恒定在37℃，持续供氧。标本平衡30 min，基线平稳后加等体积生理盐水15 min作为生理盐水对照组，然后给药，每加一药物接触15 min，观察药物反应并记录。每一待测药物使用一片气管片。具体给药步骤为：①1%磷酸组胺0.05 mg・ml1（浴槽内终浓度，下同）造模，观察有无收缩反应，确定标本的功能状况。如标本功能正常，记录反应张力。②以累积法依次加入β细辛醚0.016，0.032，0.064 mg・ml1，分别观察记录药物对气管平滑肌的松弛作用。③冲洗，更换营养液，标本平衡30min。④用2%氯化乙酰胆碱0.1 mg/ml代替磷酸组胺造模，重复①至②步骤。模型空白对照组在造模后以等体积生理盐水代替待测药物。
       1.5.2   豚鼠整体平喘实验（喷雾致喘法） ［3］动物筛选：将体重180~220 g，雌雄各半的豚鼠分别置于气雾装置内（容积2000 ml），以0.08MPa压力恒压喷入4%卵蛋白40 s，观察豚鼠的引喘潜伏期（即从喷雾开始到哮喘发作的时间），一般不超过150 s，超过150 s者认为不敏感，不予选用。将预选合格的50只动物随机分为5组，β细辛醚高、中、低剂量组、地塞米松组和模型空白对照组，每组10只。每只豚鼠两后腿外侧肌内各注射4%卵蛋白生理盐水0.2 ml，同时腹腔注射0.5 ml，和4%氢氧化铝0.5 ml以致敏。致敏第8天开始喷雾给药，给药7 d，2次/d。末次给药后0.5 h，将各鼠分别放入气雾装置内，按预选时的同样条件喷入卵蛋白。观察并记录6 h内引喘潜伏期、跌倒潜伏期。
       1.6  统计学方法 实验数据利用SPSS软件进行t检验。
       　　2  结果
       2.1  β细辛醚对豚鼠离体气管平滑肌的影响   豚鼠离体气管平滑肌加入组胺造模后张力升高值为（1.24±0.68）g，加入乙酰胆碱造模后升高值为（1.58±0.70）g，与生理盐水对照组比较都有显著性差异（P< 0.001）。β细辛醚高、中、低剂量组对组胺和乙酰胆碱所致豚鼠离体气管平滑肌的痉挛有明显舒张作用，且都呈量-效关系。见表1。
       表1  β细辛醚对豚鼠离体气管平滑肌的影响（略）
       与模型空白对照组比较，**P < 0.01，***P < 0.001；与氨茶碱组比较，ΔP< 0.05，ΔΔP < 0.01；n=10
       2.2  β细辛醚对哮喘豚鼠的影响 β细辛醚高、中、低剂量组均能明显延长豚鼠哮喘潜伏时间和哮喘发作后跌倒潜伏时间，且均呈量效关系，高剂量组明显优于地塞米松对照组（ P< 0.01）。见表2。
       表2  β细辛醚喷雾给药对豚鼠的平喘作用（略）
       与模型空白对照组比较，**P < 0.01，***P < 0.001;与地塞米松组比较，ΔΔP < 0.01；n=10)
       　　3  讨论
       支气管哮喘是由多种细胞及细胞组分参与的气道慢性炎症，以广泛多变的气流阻塞、气道高反应性以及气道炎症为主要特征［4,5］。近年来，随着地球气候的变化，空气污染愈加严重等，其发病率在世界范围内呈增加趋势，全球约有1.55亿患者，我国有1~2千万，以青壮年和儿童居多［4］。所以，对哮喘发病机理及防治方法的研究仍然是当今世界医药界探索的热点。虽然人们一直在探索有效的支气管哮喘治疗途径，但至今尚无理想的治疗药物，目前，仍以吸入糖皮质激素为主，配合β2 - 激动剂等药物作为首要治疗原则，虽能有效控制哮喘症状,改善肺功能，但长期使用糖皮质激素需不断提高剂量，并使患者内分泌和代谢紊乱、免疫功能低下、下丘脑-垂体-肾上腺轴抑制，发生各种感染、高血糖、高脂血症、儿童生长抑制等严重的副作用［4］，且不能抑制支气管气道平滑肌的增生［6］，远期疗效较差，不能治愈哮喘。因此，研究对支气管哮喘有显著疗效且没有上述毒副作用的新药物，具有重要的实用价值和明显的社会效益。α细辛醚具有抗炎、镇痛、解痉的作用［7,8］，临床用于发作期、迁延期或病情加重期的单纯型慢性支气管炎、喘息型慢性支气管炎或支气管哮喘［9］。然而α细辛醚在石菖蒲挥发油中仅占2%~6%，而β细辛醚占60%~80%，我们已成功提取得到β细辛醚单体，得率高，纯度高且生物性状稳定，本实验研究β细辛醚对支气管哮喘的作用，结果表明，β细辛醚对组胺激动平滑肌细胞H1受体导致的支气管平滑肌收缩有明显的舒张作用；对乙酰胆碱激动M受体所致的平滑肌收缩也有作用，且二者都呈一定的量-效关系，提示β细辛醚可直接作用于支气管平滑肌，其机理可能主要是通过拮抗H1受体和M受体起效应。对哮喘豚鼠整体模型，β细辛醚可延缓哮喘发作时间，减轻症状发作的严重程度，且亦呈一定量-效关系。提示β细辛醚对支气管哮喘有整体治疗作用。上述结果为β细辛醚在临床上治疗支气管哮喘提供了药效学依据。以往对β细辛醚的研究主要集中在中枢神经系统，对呼吸系统的作用探索得不多，对其平喘机制如对机体免疫系统的调节、对免疫细胞、细胞因子、炎性介质等的影响更未见报道。我们正在对β细辛醚止喘的机理以及止咳化痰抗炎等方面的作用作进一步的研究。
       　　参考文献：
       ［1］  方永奇，匡忠生，谢宇辉，等. 石菖蒲对缺血再灌注脑损伤大鼠神经细胞凋亡的影响［J］.现代中西医结合杂志，2002，11(17):1647.
       ［2］  方永奇，李  翎，吴启端. β细辛醚对小鼠脑组织基因表达谱的影响［J］.中药材，2003，26(9):650.
       ［3］  徐叔云，卞如濂，陈  修. 药理实验方法学，第3版［M］.北京：人民卫生出版社，2002：1368，1417.
       ［4］  朱元珏，陈文彬. 呼吸病学［M］.北京：人民卫生出版社，2003：854.
       ［5］  Busse WW, Lemanske RF. Advances in Immunology: Asthma［J］.N Engl J Med. 2001, 344:350.
       ［6］   Roth M, Johnson P, Borger P, et al. Dysfunctional interaction of C/EBPalpha and the glucocorticoid receptor in asthmatic bronchial smooth-muscle cells［J］. N Engl J Med. 2004,351:560.
       ［7］  Filho AA,Andrade ML,Carvalho JC, et al. Evaluation of analgesic and anti-inflammatory activities of Nectandra megapotamica (Lauraceae) in mice and rats［J］. J Pharm Pharmacol.2004，56(9):1179.
       ［8］  Belova LF, Alibekov SD, Baginskaia AI, et al. Asarone and its biologicalproperties［J］. Farmakol Toksikol. 1985,48(6):17.
       ［9］  杨  玉.α细辛脑片治疗148 例慢性阻塞性肺部疾病［J］.新药与临床，1986，5(4):210.
       (广州中医药大学第一附属医院，广东 广州  510405)