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       【关键词】  党参；,,,天麻；,,,抗氧化酶；,,,超氧化物歧化酶；,,,谷胱甘肽过氧化物酶
       摘要：目的观察和探讨党参、天麻对氟哌啶醇诱导老化大鼠抗氧化酶表达作用的影响。方法雄性Wister大鼠40只，随机分为对照组、模型组、实验1组、实验2组。除对照组外，模型组、实验组均用氟哌啶醇建立痴呆症（Alzheimer Disease,AD）动物模型，实验组还分别腹腔注射党参注射液、天麻注射液。测定各组大鼠血、肝、肾、海马、脑皮质中超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPX）含量。结果与对照组、模型组比较，党参注射液和天麻注射液均能使实验大鼠多种组织SOD、GSHPX显著升高，差异有非常显著性意义（P＜0.001）。结论党参和天麻都能增强抗氧化酶表达作用，但在升高SOD和GSHPX的表达值上，二者则无明显差别。
       关键词：党参；   天麻；   抗氧化酶；   超氧化物歧化酶；   谷胱甘肽过氧化物酶
       The Comparison Between Radix Codonopsis Pilosulae and Gastrodia elata Blume on the Expression of Antioxidase of Aging Rat Induced by Haloperidol
       HUANG Liya, YE Siying, LIU Jieshu
       (Medical School, Hubei College of Nationality, Enshi, Hubei 445000,China; Medical College of Jinan University, Guangzhou, Guangdong 510632, China)
       Abstract:ObjectiveTo study the effect of Radix codonopsis pilosulae and Gastrodia elata Blume on the expression of antioxidase of aging rat induced by haloperidol.Methods40 male Wistar rats were randomly divided into control,model,test group 1 and 2.Rat model of Alzheimer Disease induced by haloperidol were employed. Except control group,the rats of test group 1 and 2 were injected with Radix codonopsis pilosulae injection and Gastrodia elata Blume injection respectively and meanwhile concentrations of SOD and GSHPX in serum,liver,kidney,hipocampus and cortex of the animal were detected.ResultsIn contrast with control and groups,concentrations of SOD and GSHPX obviously increased,the differences were statistically significant(P＜0.001).ConclusionRadix codonopsis pilosulae and Gastrodia elata Blume can be in upregulating expression of antioxidase.But the two herbs have similar activities of antioxidation.
       Key words:Radix codonopsis pilosulae;   Gastrodia elats Blume;   Antioxidase;   Superoxide
   
　　用于补气、补肝肾、补血的传统中药，有显著降低老年常见病如高血压、冠心病、中风、老年性痴呆、糖尿病及肿瘤等病患的危险性。经现代医学研究，这类药物有极显著的抗氧化效果，起着强化神经系统功能、改善睡眠和记忆、提高反应灵敏性、增强机体免疫力、促进新陈代谢等作用。中枢神经系统退行性变是机体衰老的关键，尤其与代谢产生的氧自由基慢性损伤或抗氧化酶产生不足密切相关。党参（Radix codonopsitis pilosulas）属多年生草本桔梗科植物，药用部分为其根，有益于治疗和保键的化学成分主要有多糖、皂苷、甾醇类、三萜类及多种微量元素，煎剂、乙醇提取物对动物的学习记忆有改善作用［1］。天麻（Gastrodia elata Blume）为兰科植物的块茎，在我国有悠久用药历史，最早载于《神农本草经》，并被列为传统药物的上品，近年来对改善动物学习记忆作用已被重视［2，3］。鉴此，本研究采用党参注射液和天麻注射液作实验动物腹腔注射，进行比较性研究，通过对各组动物组织SOD、GSHPX含量测定和动物行为学观察，旨在进一步探讨党参、天麻影响抗氧化酶表达作用的效果和差异。
       　　1  材料与方法
       1.1  党参注射液、天麻注射液制备党参、天麻由恩施州中药材生产GAP（质量管理规范）示范基地提供，采用水提醇沉法制成含生药30%的注射液，瓶装密封消毒备用。
       1.2  药品与仪器氟哌啶醇注射液，SOD、GSHPX试剂盒（南京建成生物工程研究所生产），回避反应箱（华中科技大学同济医学院病理生理系提供），GL20 GⅡ型高速低温离心机，UV2450分光光度仪，水浴箱。
       1.3  分组雄性Wister大鼠40只，鼠龄40~50周，体重约300~350 g，由华中科技大学同济医学院动物中心提供。随机分为对照组：生理盐水10只；模型组：氟哌啶醇10只；实验1组：氟哌啶醇+党参注射液10只；实验2组：氟哌啶醇+天麻注射液10只。
       1.4  动物行为学训练和测试实验装置是30 cm×30 cm回避反应箱，箱底为铜栅，可通刺激电流。另有一高5 cm、顶端直径5 cm的橡胶圆台作避电击平台，固定放置在箱内一角的铜栅上，供大鼠在圆台上停留以回避电击。实验开始后，先将大鼠轻放于回避反应箱内，使其适应3~5 min，消除探究反应。尔后底部铜栅通电（36 V）2 s，大鼠在受电刺激中逐渐学会跳上平台回避电击。多数大鼠可再次或多次跳回铜栅上，受到电刺激后又重新跳上平台，如此训练3 min。记录每只大鼠受电击次数或犯错次数，以此作为学习成绩，如此持续3 d，直至每只大鼠的犯错次数为0~1。剔除犯错次数2次以上的大鼠，再根据学习成绩均分至各实验组。
       1.5  给药途径及剂量实验动物在行为学训练及测试结束后，除对照组外，模型组和实验组均按每克体重Bid腹腔注射0.001 mg氟哌啶醇注射液，持续3 d。尔后各实验组在继续注射氟哌啶醇注射液的同时，再分别按每克体重Bid腹腔注射0.003 ml党参注射液、0.003 ml天麻注射液，持续7 d。对照组每天等量Bid腹腔注射生理盐水，持续7 d。
       1.6  组织SOD、GSHPX测定注射实验结束后，断颈处死各组动物。迅速取血及各种组织，血液离心取血清、组织制成10%匀浆，备用。SOD、GSHPX测定：按试剂盒说明书进行。蛋白定量采用双缩脲法测定。
       1.7  统计学方法所有的检测数据用SPSS11.0统计软件进行统计学处理，计量资料用均数加减标准差表示。在对数据进行比较分析的过程中，发现个别数据不符合ANOVAO比较的要求，而改用非参法进行比较分析。
       　2  结果与分析
       2.1  行为学测试从表1可见，模型组学习记忆能力显著下降，实验组与模型组比较有显著差异，但与对照组比较无明显差异。
       表1  各种行为学测试结果比较（略）
       2.2  SOD，GSHPX测试从表2~3可见，实验组与对照组、模型组比较，党参、天麻确有提高抗氧化酶表达作用，且在血、肝、海马和脑皮质的表达值更突出。实验1组与实验2组比较，天麻除在血中升高SOD，GSHPX的作用比党参强些外，其它方面二者无明显差别。
       表2  各组SOD结果比较（略）
       实验组分别与对照组和模型组相应组织比较，差异有非常显著性意义（P＜0.001）；实验1组和实验2组比较，★差异有显著性意义（P＜0.005），差异无显著性意义（P＞0.005）；n=10
       表3  各组GSHPX结果比较（略）
       实验组分别与对照组和模型组相应组织比较，差异有非常显著性意义（P＜0.001）；实验1组和实验2组比较，★差异有显著性意义（P＜0.005），差异无显著性意义（P＞0.005）；n=10
       　　3  讨论
       衰老（senility）是人体一种全身性生理变化过程，各系统、器官、组织和细胞都会出现这种过程，其机制复杂，且与多种因素有关。现代医学理论认为，氧自由基损伤对人体衰老影响最大［4，5］，包括氧阴离子自由基、羟自由基、脂氧自由基、二氧化氮和一氧化氮自由基、氧化氢等。活性氧自由基具有一定的生理功能，如免疫和信号传导过程。但过多的活性氧自由基就会有破坏性，导致人体正常细胞和组织损坏，从而加速衰老过程，并引起多种疾病，如心脏病、老年痴呆症、帕金森氏病和肿瘤等［5，6］。   
       SOD和GSHPX是机体重要的抗氧化酶系，普遍存在于人体各组织中，包括血液、肝脏、线粒体和细胞质，具有抗自由基损伤和清除氧自由基、降低细胞内H2O2水平，减少自由基和过氧化物蓄积作用。氧自由基被SOD转变为H2O2后，GSHPX可继续作用在H2O2上，使之转变成完全无害的水和氧。因此，SOD、GSHPX表达变化已成为检测衰老最为敏感和可靠的指标［7］。党参和天麻是公认的保健、治疗用药，研究与SOD，GSHPX的关系，对解释其作用机理有重要的理论意义和实践意义。本实验研究，通过氟哌啶醇诱导动物模型，探讨党参和天麻在不同组织对SOD，GSHPX活性和表达量的影响。结果表明：氟哌啶醇对SOD和GSHPX有抑制作用，说明是很好的动物老化造模剂。党参、天麻均能维持实验大鼠学习记忆功能，并显著提高模型大鼠血、肝、肾、海马、脑皮质SOD，GSHPX含量，提示党参、天麻确有提高抗氧化酶的表达作用，且属强抗氧化药物。但在提高SOD，GSH-PX表达量上，天麻除在血中升高SOD，GSHPX的作用比党参强些外，其它方面无明显差别。由此证实，党参、天麻的抗氧化作用基本相当。可以认为，党参、天麻作为常用的抗衰老药物，除其它方面的功效外，与之能提升抗氧化酶表达作用更有关。
       　　参考文献：
       ［1］  朱圆圆,贺庆,王峥涛,等.党参化学成分研究［J］.中国药科大学学报,2001,32(2):94.
       ［2］  孙星运.神农本草经［M］.北京:人民卫生出版社,1982:220.
       ［3］  孙晓芳,王巍,王丹巧,等.天麻及其制剂神经保护机制的研究进展［J］.中国中药杂志,2004,29(4):292.
       ［4］  R.kuciel and A.Mazurkiewicz Formmation and Detoxification of Reactive Oxygen species［J］.Biochem.Educ,May 1,2004,32(3):183.
       ［5］  Zs.-NAGY.Pharmacological Interventions against Aging through the Cell Plasma Membrane:A Review of the Experimental Results Obtained in Animals［J］. Ann.N.Y.Acad.Sci,April 1,2002,959(1):308.
       ［6］  Balaban RS,Nemoto S,Finkel T.Mitochondria,oxidants,and aging［J］.Cell.2005 Feb 25,120(4):483.
       ［7］  Moorthy K,Sharma D,Basir SF,Baquer NZ. Administration of estradiol and progesterone modulate the activitiesof antioxidant enzyme and aminotransferases in naturally menopausal rats［J］.Exp Gerontol.2005,40(4):295.
       (湖北民族学院医学院，湖北 恩施  445000  暨南大学医学院，广东 广州  510632)