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       【关键词】  乌蔹莓；,,平皿法,；,,抗菌效应
       摘要：目的观察乌蔹莓的抗菌效果，为临床治疗提供科学依据。方法通过中药乌蔹莓对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌等化脓菌株采用平皿法进行体外抗菌效应实验，并以中药制剂板蓝根和鱼腥草的注射液作对照。结果乌蔹莓对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌等均有抑菌效果，且抑菌作用强于鱼腥草和板蓝根。结论乌蔹莓具有明显的抗菌效应。
       关键词：乌蔹莓；  平皿法 ；  抗菌效应
       Experimental Observation of the Anti-bacteria Effects of Cayratia japonica Gagnep
       LIN Jianrong, LI Mo, DENG Cuie, LIANG Hong
       (Medical School, Huangshi College of Science and Technology, Huangshi, Hubei 435003, China)
       Abstract：ObjectiveTo observe the anti-bacteria effect of Cayratia japonice so as to provide clinical treatment with scientific basis.MethodsBy applying plating, Anti-bacteria experiment was carried out to see the effectiveness of traditional Chinese medicine Cayratia japonica gagnep on G+ and G-pyogenic bacteria and compare the result of this experiment with that of traditional Chinese medicine isatidis and herba.ResultsThe results of the experiment indicated that cayratia japonica gagnep herb had obvious anti-bacteria effects on Staphylocossus aureus, Staphylococcus epidermidis, Colibacillus, Bacillus pyocganeus, Bacillus proteus, Typhoid bacillus and Dysentery bacillus. And the anti-bacteria effect was more powerful than that of isatidis and herba.ConclusionCayratia japonica gagnep herb has obvious anti-bacteria effects.
       Key words：Cayratia japonica gagnep;  Plating;  Anti-bacteria effects
   
　　乌蔹莓是一种繁殖力很强的野生植物，具有解毒消肿、活血散淤、利尿止血的作用，且易采集和炮制［1］。为了了解乌蔹莓的抗菌效果进行了实验观察，通过对革兰氏阳性菌（金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌）和革兰氏阴性菌（大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌等）等化脓菌 ，采用平皿法进行体外抗菌效应实验，为临床治疗提供科学依据。
       　　1  材料
       1.1  培养基
       1.1.1  牛肉膏培养基用0.5%牛肉膏、0.5%氯化钠、1%蛋白质胨和1%葡萄糖配制成pH 7.6肉汤培养基,经蒸汽高压110磅灭菌20 min ,作为稀释菌液;培养痢疾杆菌时另加1%小牛血清。
       1.1.2  肉琼脂基础培养基于牛肉膏培养基（肉汤）中加入2%琼脂，经蒸汽高压灭菌后作为测定临床分离菌株的敏感性实验。
       1.2  菌和菌液制备由临床上分离的受试菌，分别为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌等，取上述各菌株分别再接种于斜面培养基上经37℃ 18 h孵育后再接种于5 ml肉汤培养基中，再用3 mm 接种环定量分离，制成后每毫升含菌数约为9×108［2］的菌液。
       1.3  药物
       1.3.1  由湖北黄石三九制药厂提供100%（1 ml药液相当于生药1 g ）的乌蔹莓水提取液，进行对倍稀释得500 ，250 ，125 ，62.5， 31.25，15.63 mg /ml等系列浓度的乌蔹莓肉琼脂基础培养基，调整pH至7.6，经蒸气高压灭菌20 min后备用。
       1.3.2  鱼腥草注射液 板蓝根注射液作为阳性对照，用上述方法稀释鱼腥草和板蓝根注射药。
       　2  方法
       将上述系列药物的肉琼脂基础培养基使其溶化,待冷至适当温度(45℃)倒人平器内冷却凝固后,将上述0.05 ml菌液点于多点接种器的点棒上，再接种于含有不同药物浓度的肉膏基础琼脂平皿上,经37℃ 14~18 h培养后, 观察抗菌效应及最低药物抑制浓度(MIC)。抑菌作用判定标准：药物最高稀释度平皿中细菌不生长者，为该药物的最低抑菌浓度；对照平皿不加细菌应无细菌生长，培养基对照平皿加菌应有细菌生长。否则视为实验失败。
       3  结果
       通过3种中草药的抑菌试验对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌等均有抑菌效果，且乌蔹莓的抑菌作用强于鱼腥草和板蓝根。乌蔹莓本身对各菌株的抗菌活性比较，其对革兰氏阳性菌如金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌,MIC分别为250，125 mg /ml，对革兰氏阴性菌如大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌，MIC分别为250 ，125，250，125，250 mg /ml 。结果见表1。
       表1   3种药液最低抑菌浓度（略）
       　4  讨论
       乌蔹莓Cayratia japonica(Thunb.) Gagnep是葡萄科乌蔹莓属的蔓生草本植物，性寒味苦酸,功能清热解毒,利湿消肿,为了开发与利用这一中药自然资源.我们对乌蔹莓抗菌效应进行了实验观察，结果提示乌蔹莓的抗菌谱是较广的,对革兰氏阳性菌如金黄色葡萄球菌、表皮萄球菌及革兰氏阴性菌如大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌等均有抑菌作用，且强于中药鱼腥草和板蓝根，就其本身对各菌株的抗菌活性比较其抗菌活性以表皮葡萄球菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌为强。中草药对细菌的敏感试验影响因素较多，如草药的产地、采集的方法、时令以及炮制方法、药物的pH值等均可影响抑菌效果。中草药的有效成分提取也至关重要，实验方法不同结果也有差别。我们就乌蔹莓的抗菌效应采用平皿法。其他方法的抗菌效果，其抑菌效价有待进一步的实验与探讨。
       　　参考文献：
　　
　　［1］  《中国中草药汇编》编写组.全国中草药汇编，第1版［M］.北京：人民卫生出版社，1983：214.
       ［2］  李其英，徐勉忠，孔祥云.实用临床医学检验，第1版［M］.武汉：湖北人民出版社，1980：517．
       基金项目：黄石理工学院资助课题（No.036）
       （黄石理工学院医学院，湖北 黄石  435003）