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衰老大鼠细胞免疫功能的变化及中药天年饮的延缓衰老作用
作者:谢红林    
作者单位:承德医学院,河北 承德 067000;

《时珍国医国药》 2007年 第10期

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       【摘要】 
       目的观察D-半乳糖衰老大鼠细胞免疫功能的变化及中药天年饮的延缓衰老作用。方法40只SD大鼠随机分为四组,正常组、衰老模型组、天年饮用药组及阴性对照组,每组均为10只。D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型。采用ELISA方法检测各组大鼠血清IL-2及IL-6的含量,同时检测各组大鼠的胸腺指数和巨噬细胞的吞噬功能。结果衰老大鼠血清IL-2的含量、胸腺指数、巨噬细胞的吞噬功能与正常大鼠相比均明显下降(P<0.05,P<0.01),衰老大鼠血清IL-6的含量与正常大鼠相比明显升高(P<0.01)。天年饮可显著提高衰老大鼠血清IL-2含量、胸腺指数以及巨噬细胞的吞噬功能(用药组大鼠与衰老模型组大鼠比较:P<0.01,P<0.05);天年饮可明显降低衰老大鼠血清IL-6的含量(用药组大鼠与衰老模型组大鼠比较:P<0.01)。结论天年饮可提高衰老大鼠的细胞免疫功能,具有一定延缓衰老的作用。
       【关键词】  天年饮 衰老 细胞免疫
       Study on the Changes of Cellular Immune Function of Aging Rats and the Anti-aging Effects of Traditional Chinese Medicine Tiannianyin
       XIE Honglin, FANG Yanhui, CHEN Zhijie, XUE Jingfeng
       1. Chengde Medical College, Chengde, 067000, China;
       2. The 5th Hospital of Chengde City, Chengde, 067000, China
       Abstract:ObjectiveTo study on the changes of cellular immune function of aging rats and the anti-aging effects of traditional Chinese medicine Tiannianyin.Methods40 SD rats were divided into 4 groups at random: normal group, aging model group, Tiannianyin group and negative control group, each group had 10 rats. The sub-acute aging model rats were made by injecting D-gal into abdominal cavity continually. ELISA was used to detect the IL-2 and IL-6 content in serum, the macrophagic phagocytosis and thymus index were also observed. ResultsCompared with normal rats, the IL-2 content in serum, the thymus index and the macrophagic phagocytosis of aging rats decreased obviously (P<0.05,P<0.01); the IL-6 content in serum increased obviously (P<0.01). Tiannianyin not only significantly increased the IL-2 content, the macrophagic phagocytosis and the thymus index of aging rats (Tiannianyin group compared with aging group: P<0.01, P<0.05); but also significantly decreased the IL-6 content of aging rats (Tiannianyin group compared with aging group: P<0.01).ConclusionsTianninyin can strengthen the cellular immune function of aging rats, so it has fairly anti-aging effects.
       Key words:Tiannianyin;  Aging;  Cellular immunity
        研究表明随着年龄的增长,机体的免疫功能发生紊乱并逐步衰退,由于机体免疫功能的下降,从而导致自身免疫疾病以及癌症发生的增多[1]。中药天年饮由刘河间《宣明论方》何首乌丸加味而成,由何首乌、肉苁蓉、怀牛膝等组成,具有补肝肾、益精血、延年益寿之功效。我们的研究已经发现,天年饮具有延缓性腺衰老、增强机体的抗氧化能力、改善学习记忆功能等多方面的作用[2~4],本文观察了天年饮对D-半乳糖衰老大鼠细胞免疫功能的作用,进一步探讨天年饮延缓衰老的作用机制。
       1  材料与方法
       1.1  动物的选择与分组实验选用SD大鼠40只,雌雄各半,体重180~250 g。将大鼠随机分为4组,正常组、衰老模型组、天年饮用药组和阴性对照组,每组10只。其中模型组、用药组、阴性对照组大鼠均采用D-半乳糖连续腹腔注射(按200 mg/kg给药,1次/d,连续40 d)制作亚急性衰老的动物模型。模型组大鼠造模成功后不再做任何处理;用药组大鼠造模成功后每天用天年饮灌胃,共30 d;阴性对照组大鼠在造模成功后每天灌胃同等剂量的生理盐水,时间同用药组大鼠。
       1.2  药品与试剂天年饮由制何首乌、怀牛膝、肉从蓉、淫羊藿、丹参、茯苓等6味中药组成,熬制后每毫升含生药1.5 g,按16.2 g/kg灌胃给药。
        D-半乳糖(D-gal)由北京化学试剂公司生产(批号:020402)。检测血清IL-2,IL-6含量的ELISA试剂盒由晶美公司提供。
       1.3  指标的检测
       1.3.1  血清IL-2及IL-6含量的检测大鼠经内眦取血,离心后取上清。采用双抗体夹心ELISA法按试剂盒说明进行操作,检测各组大鼠血清IL-2及IL-6的含量。
       1.3.2  胸腺指数的检测大鼠称重后断头处死,取出胸腺,去除脂肪、筋膜后称重,计算胸腺指数:胸腺指数=胸腺重量/体重(mg/10 g)。
       1.3.3  巨噬细胞吞噬功能的检测按文献[5]的方法测定巨噬细胞的吞噬功能,计算吞噬指数和吞噬率。
       1.4  统计分析所有数据以±s表示,采用SPSS 11.0统计分析软件以t检验进行统计处理。
       2  结果
       2.1  大鼠血清IL-2及IL-6含量结果见表1。由表1可见,衰老模型大鼠血清IL-2的含量明显下降、IL-6的含量明显上升(与正常大鼠比较:P<0.01);中药天年饮可显著提高衰老大鼠血清IL-2含量、降低衰老大鼠血清IL-6的含量,用药组与模型组比较差异显著(P<0.01)。表1  各组大鼠血清IL-2和IL-6的含量(略)
       2.2  大鼠胸腺指数结果见表2。由表2可见,衰老大鼠的胸腺指数与正常大鼠相比显著下降(P<0.01);天年饮可提高衰老大鼠的胸腺指数,用药组与衰老组大鼠比较具有明显差异(P<0.05)。
       2.3  大鼠巨噬细胞的吞噬功能结果见表2。由表2可见,衰老大鼠巨噬细胞的吞噬功能明显下降(与正常大鼠比较:P<0.01,P<0.05);天年可明显提高衰老大鼠巨噬细胞的吞噬功能(用药组与衰老组比较:P<0.01,P<0.05)。表2  各组大鼠胸腺指数及巨噬细胞的吞噬功能(略)
       3  讨论
        1977年Basedovsky[6]首次提出“免疫-神经-内分泌网络”(immune-neuroendocrine network)学说;1988年Meites[7]提出,在衰老的过程中,免疫-神经-内分泌网络起着重要作用;许多学者的研究也表明,由于机体免疫功能的随龄下降,从而导致自身免疫疾病以及癌症发生的增多。
        虽然机体的细胞免疫和体液免疫功能均随着年龄的增长发生变化,但老年机体免疫功能的下降主要与T细胞的变化有关[8]。并有研究发现,T细胞功能的降低与胸腺退化密切相关[9]。衰老时随着胸腺形态和功能的变化,胸腺上皮细胞MHC分子表达下降导致T细胞总数减少以及抗原特异性T细胞免疫功能下降。IL-2主要由活化的T细胞产生,在调节免疫应答、抗肿瘤等方面发挥重要作用,是反映机体免疫功能强弱的重要指标,IL-2产生的减少可加速机体的衰老进程[10]。IL-6主要是由单核巨噬细胞、T细胞、B细胞等产生的细胞因子,不仅在免疫系统中具有重要作用,还可作用于神经内分泌系统,从而影响全身各功能系统的活动。在衰老和许多老年疾病发生时,IL-6的水平均有不同程度的升高;由于IL-6的水平异常升高,可导致一系列免疫功能和内分泌功能的紊乱,从而加速机体的衰老进程[11]。
        我国传统医学认为精气虚弱是导致机体衰老的主要原因,因此历代医家多用补肾为主的方药来延年益寿。天年饮是我院中医系教授贾春华博士在刘河间《宣明论方》何首乌丸的基础上加味而成的,何首乌丸本由何首乌、肉苁蓉、怀牛膝组成,能填精补髓、乌发延年,于此基础上加淫羊藿补肾壮阳以强筋骨,丹参活血化淤以通心脉;茯苓健脾利湿以宁心神。诸药相配通调心脾肝肾四脏,而以肾为主。本研究发现,中药天年饮可提高衰老大鼠血清IL-2的含量、降低衰老大鼠血清IL-6的含量,显著提高衰老大鼠的胸腺指数,增强巨噬细胞的吞噬功能。说明,天年饮通过提高机体的细胞免疫功能而发挥延缓衰老的作用。
        
       【参考文献】
           [1]Weng NP. Ageing of the immune system: how much can the adaptive immune system adapt[J].Immunity, 2006,24(5):495.
       
       [2]陈志宏,高福禄,庞晓静,等. 天年饮对亚急性衰老大鼠睾丸生精细胞增殖与凋亡的影响[J].中国老年学杂志,2004,24(4):347.
       
       [3]陈志宏,宋成军,高福禄. 天年饮调节血脂及抗氧化作用的实验研究[J].时珍国医国药,2006,17(4):528.
       
       [4]陈志宏,高福禄,庞晓静. 中药天年饮对衰老大鼠学习记忆及脑单胺类神经递质含量的影响[J].时珍国医国药,2006,17(1):7.
       
       [5]Salonen JT, Salonen R. Ultrasound B-mode imaging in observational studies of atheroserotic progression[J].Circulation, 1993,87(3 Suppl): Ⅱ56.
       
       [6]Besedovsky H, Sorkin E. Network of immune-neuroendocrine interactions[J].Clin Exp Immunol, 1977,27(1):1.
       
       [7]Meites J. Neuroendocrine biomarkers of aging in the rat[J].Exp Gerontol, 1988, 23(4-5):349.
       
       [8]Pawdec G, Barnett Y, Forsey R, et al. T cells and aging[J].Front Biosci, 2002,7: d1056.
       
       [9]Malaguarnera L, Ferlito L, Imbesi RM, et al. Immunosenescence: a review [J].Arch Gerontol Geriatr, 2001,32(1): 1.
       
       [10]Sawin S, Clise-Dwyer K, Haynes L. Homeostasis and the age-associated defect of CD4 T cell[J].Semin Immunol, 2005,17(5): 370.
       
       [11]Huang H, Pate, DD, Manton KG. The immune system in aging: roles of cytokines, T cell and NK cells[J].Front Biosci, 2005,10: 192.

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