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       【摘要】 
       目的通过脉复生对兔动脉内皮细胞的作用研究，探讨脉复生对兔动脉内皮细胞的作用。方法在培养液中加入脉复生制剂的设为实验组，不加则为对照组，经培养后测定羟脯氨酸和糖胺多糖的含量。结果脉复生组中羟脯氨酸和糖胺多糖明显降低。结论脉复生有抑制动脉内皮细胞中羟脯氨酸和糖胺多糖的作用。
       【关键词】  脉复生 内皮细胞 羟脯氨酸 糖胺多糖
        脉复生是广州市中医院用于临床三十余年的经验方，已知它有使纤维蛋白明显缩短溶解时间，能促进纤维蛋白溶解，对ADP诱导的体外血小板聚集有较好的抑制作用［1］。本文观察其对内皮细胞作用前后羟脯氨酸和糖胺多糖的含量的变化。了解其对治疗动脉硬化的机理，为进一步开发中医药治疗动脉血管疾病提供新的依据和途径。
       1  材料和方法
        脉复生为我院制剂室制成的汤剂，无菌条件下取纯种日本大白兔主动脉，减碎成1 mm3的小块。0.1%胶原酶消化方法收集兔动脉内皮细胞，种植于0.2%明胶覆盖的塑料培养皿中，细胞密度为4.5×105个/mm2，加入RPMI×1640培养液（含20%AB型人血清，5 mg/ml内皮细胞生长因子和适当抗生素，在37℃5%CO2培养箱中培养，每48 h换RPMI1640，培养5 d达到融洽期。免疫荧光法检测，细胞Ⅷ因子相关抗原染色阳性，从而证实为内皮细胞，传代待用［2］。
        待内皮细胞传代形成单胞，（使细胞悬浮液中细胞数达106个/ml）；加脉复生制剂，使其在培养液中浓度达250 mg/ml。37℃培养6 h，取1ml细胞悬浮液，1 000 r/min，离心10 min，上浮液作为细胞外液，测定其中的羟脯氨酸和糖胺多糖的含量。
        将上述外液去掉，沉淀细胞加M-199补足1 ml进行冻融，再测定羟脯氨酸和糖胺多糖的含量。
        对照组不加药物培养，测定理化指标同上。
        羟脯氨酸和糖胺多糖的测定方法参照文献［3］。
       2  结果
       见表1。表1  脉复生对兔内皮细胞羟脯氨酸和糖代谢的影响（略）
       
       3  讨论
        一定量糖胺多糖与一定量血清脂蛋白相互作用，形成不溶性复合物，其复合物的脂质部分易沉积于血管内壁上，以致动脉粥样硬化，若改变糖胺多糖的含量就会影响不溶性复合物的形成。羟脯氨酸对使胶原纤维三股螺旋体的机构稳定具有重要的作用，其含量变化能反映胶原纤维代谢的变化。
        脉复生由当归、熟地、岗稔、牛大力、两头尖等主要药物组成，本实验通过其降低内皮细胞中的羟脯氨酸和糖胺多糖的含量，从而了解其对动脉粥样硬化治疗的机理，为本药的治疗机理作进一步的阐述。从而为中医药开发研究治疗动脉血管疾病提供了新的空间。
       【参考文献】
         　　［1］庞健辉，罗甜仪. 脉复生药理作用的研究［J］.广东药学，2001，11(5)：46.
       
       ［2］黄玉兰，陈铁镇.人主动脉内皮细胞长期培养及形态学研究［J］.中华心血管病杂志，1991，12(2)：97.
       
       ［3］李玉瑞.细胞外间质的生物化学及研究方法，第1版［M］.北京：人民卫生出版社，1988：189.