文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【摘要】 
       目的通过研究中药对慢性非细菌性前列腺炎动物模型前列腺锌含量和局部免疫功能的影响，进一步探讨锌含量与前列腺局部免疫功能在慢性非细菌性前列腺炎中的作用及其关系。 方法用角叉菜胶建立大鼠慢性非细菌性前列腺炎（CNP）病理模型,用前列泰片进行治疗，利用原子吸收光谱仪检测大鼠前列腺锌含量；观察对病理模型前列腺局部免疫功能的影响，分别利用免疫放射法和酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠前列腺分泌型免疫球蛋白（SIgA）和白介素8（IL-8）水平。结果正常对照组与模型组相比、前列泰治疗组与模型组相比，锌含量差异分别有显著统计学意义(P<0.01，P<0.01)。正常对照组与模型组相比、前列泰治疗组与模型对照组相比，SIgA和IL8水平分别有显著性差异(P<0.05)。 结论 慢性非细菌性前列腺炎发病与锌缺乏和前列腺局部免疫功能下降有密切关系，经过中药治疗后，前列腺锌含量和局部免疫功能得到了改善，结合观察光镜下前列腺形态学的变化，病变的前列腺间质炎症反应减轻促进了病损修复，说明锌含量和局部免疫功能的改变与慢性非细菌性前列腺炎的发生和发展有关，可作为临床治疗的重要参考指标。
       【关键词】  慢性非细菌性前列腺炎 锌含量 免疫功能
       Experimental Study on the Level of Zinc and Local Immunity in Chronic Non-bacterial Prostatitis
       WANG Gang, CHENG Xiaoli, ZHU Jiancheng, YE Fang , MAO Dayong
       1.Department of  Pharmacy, the Affiliated  Taihe Hospital  of  Yunyang Medical College, Shiyan 442000,China;
       2. School for Drug Control, Yunyang Medical College, Shiyan 442000, China
       Abstract：ObjectiveTo study the influence of traditional Chinese medice in treating Chronic Non-bacterial Prostatitis  Model through regulating the level of Zinc and local immunity in the rat"s prostate so as to investigate the effects and relations of Zinc and local immunity in Chronic Non-bacterial Prostatitis.  MethodsThe pathological model of Chronic Non-bacterial prostatitis was established by injecting carrageenan in the rat"s prostate.  And the model was treated with QianLieTai to observe its effects. Examine the level of Zinc in the rat"s prostate by atomic absorb spectrograph .  Examine the level of SIgA and IL-8 in the rat"s prostate respectively by IR and ELISA. ResultsCompare the treatment of  QianLieTai with CNP model, between the normal group and model group, there were significant differences in the level of Zinc ,SIgA and IL8 . Conclusion The development of Chronic Non-bacterial Prostatitis  has marked relationship with the level of Zinc and local immunity  of rat"s prostate，which has been improved by the treatment of traditional Chinese medicine. Observe the changes of prostate histology under light microscop, prostatic tissue has been repaired, and mesenchymal inflammatory reaction has been alleviated. It indicates that the changes of the level of Zinc and local immunity in term of the developing mechanism of Chronic Non-bacterial Prostatitis. We can take it as important referent parameter for clinic treatment .
       Key words：Chronic Nonbacterial Prostatitis；  The level of Zinc；  Immunity
        慢性前列腺炎（CP）为男性泌尿系统多发病、常见病，按临床发病分为慢性细菌性前列腺炎和慢性非细菌性前列腺炎。慢性非细菌性前列腺炎，占前列腺炎的64%，其病因目前仍不清楚。可能由一种还不明确的病原体引起，也可能是一种感染性疾病。Nickel等［1］研究发现在一些前列腺液细菌培养阴性，但却发现有泌尿系致病菌抗原的抗体。这一免疫学的证据提示，尽管尿液培养结果阴性但细菌是确实存在的。免疫功能正常者，可不出现炎症或反应较轻，也有反应快速、明显，但经过和结局良好。免疫功能低下者，易发生感染和炎症，炎症反应不很明显，但过程缓慢。认为慢性非细菌性前列腺炎的炎症反应是免疫功能低下的表现。其中微量元素锌与慢性非细菌性前列腺炎的发生和发展有着密切的关系，经研究证实锌是前列腺液中强力抗菌因子(PAF)的主要成分，参与前列腺的抗菌防御机制，锌降低可通过影响机体的免疫功能，导致多方面的生理代谢和功能紊乱性疾病［2］。近年来，有关锌缺乏时，人体免疫系统所发生的各种变化及其机制的文献非常多，本文就微量元素锌与前列腺局部免疫功能之间在慢性非细菌性前列腺炎中的关系，通过中药调节前列腺锌含量与前列腺局部免疫功能的作用的实验研究，进一步探讨前列腺组织中锌含量和局部免疫学与慢性非细菌性前列腺炎之间的关系。
       1  材料与方法
       1.1  动物 
       健康雄性 SD 大鼠，购于华中科技大学同济医学院动物中心。
       1.2  造模试剂与药物 
       1%角叉菜胶生理盐水由郧阳医学院附属太和医院药学部提供。前列泰片由益母草、萹蓄、红花、油菜蜂花粉、黄柏、瞿麦、熟地组成。
       1.3  仪器 
       BH5100  五通道原子吸收光谱仪（北京博辉创新光电股份有限公司生产），FSHⅡ高速电动匀浆器，TGL 高速离心机，SIgA含量测定免疫放射试剂盒（北京北方生物技术研究所生产），大鼠IL-8含量检测试剂盒（德国R&D公司生产）。
       1.4   模型制作分组与治疗 
       分为正常对照组、慢性非细菌性前列腺炎模型对照组、慢性非细菌性前列腺炎前列泰治疗组。腹腔注射10%水合氯醛麻醉大鼠后，固定动物切口，暴露出前列腺，在前列腺两叶分别注入1％角叉菜胶生理盐水各0.1ml，术后缝合，于术后24h即可形成非细菌性前列腺炎的模型。治疗组分别给予相应的中药灌胃，正常对照组、慢性非细菌性前列腺炎模型对照组分别给予等容量的自来水灌胃。各组大鼠每日给药1次，连用4周,4周后麻醉大鼠取前列腺组织。
       1.5   统计学方法SPSS10.0 统计分析软件进行方差分析。
       2  结果
       2.1  对前列腺组织锌含量检测结果用剪刀将前列腺剪碎，按每1 ml/100 mg(前列腺重量)将生理盐水加入小烧瓶中，将小烧瓶放入冰水浴中，然后用匀浆器搅拌充分制成匀浆（注意搅拌时要间断暂停，以防止匀浆过热变性）。将搅拌好的匀浆吸取入离心试管中，用TGL离心机进行离心（3000 r/min）10 min后，取匀浆上清液，用BH5100 五通道原子吸收光谱仪检测锌含量。结果见表1。表1  对角叉菜胶所致前列腺炎大鼠前列腺组织Zn含量改变的影响(略)
        结果表明,与非细菌性前列腺炎模型组比较, 前列泰能显著提高前列腺组织锌含量,与正常组比较，治疗后的平均锌水平与正常组比较无显著性差异，锌水平恢复至正常水平。
       2.2  对前列腺局部免疫学指标检测结果用剪刀将前列腺剪碎，按每1 ml/100 mg(前列腺重量)将生理盐水加入小烧瓶中，将小烧瓶放入冰水浴中，然后用匀浆器搅拌充分制成匀浆（注意搅拌时要间断暂停，以防止匀浆过热变性）。将搅拌好的匀浆吸取入离心试管中，用TGL离心机进行离心（3000 r/min）10 min后，取匀浆上清液，用免疫放射法测定SIgA含量,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠前列腺IL8水平，结果见表2。表2  对角叉菜胶所致前列腺炎大鼠前列腺免疫学指标改变的影响(略)
        结果表明,与非细菌性前列腺炎模型组比较, 前列泰能显著提高前列腺SIgA含量,与正常组比较，前列泰治疗后的平均SIgA水平与正常组比较没有显著性差异。
        与非细菌性前列腺炎模型组比较,前列泰能显著降低前列腺组织因炎症反应而异常升高的IL8水平,两者治疗后的IL-8水平与正常组比较无显著性差异，接近正常水平。
       3  讨论
        20世纪60年代Stamey［3］首先发现前列腺液中有一种低分子的抗菌活性物质，将之称为强力抗菌因子，后来证实这种强力抗菌因子是一种含锌化合物，具有直接杀菌和活化提高组织抗菌能力的作用，是局部免疫防御机制的重要因子。因此普遍认为锌在慢性前列腺炎的发生发展中起重要作用。许多文献已证实慢性前列腺炎患者的前列腺液锌含量明显降低，Anderson［4］报道慢性前列腺炎患者锌（120±24. 8） μg/ml,与正常人锌（352±49）g/ml比较有显著性差异。Bl ack［5］研究发现慢性前列腺炎患者虽然前列腺锌含量降低，但其血浆锌含量正常，说明前列腺液锌含量降低并非由于体内缺锌造成的，而是由于前列腺组织细胞摄取和排泌锌的功能受损造成的。
        本实验结果证实慢性非细菌性前列腺炎模型的前列腺锌含量明显低于正常水平；前列泰能明显改善病理组织局部的炎症反应以及间质水肿程度，但是与正常组比较有显著性差异；前列泰对非细菌性前列腺炎模型动物的锌水平有一定的提高作用，但是没有恢复至正常水平。虽然前列泰能明显改善炎症反应，但是锌含量与正常水平相比仍然很低，这种实验结果与Fair(1979)观察到的临床结果比较接近，因此，我们还认为可以通过测定前列腺液中锌含量来评价慢性前列腺炎的疗效及预后。
        本研究结果显示，慢性前列腺炎时，前炎性细胞因子IL 8水平升高，提示前列腺局部免疫细胞被激活，产生多种炎性介导的细胞因子及免疫性抗体如IgG和IgA等。一方面增强机体对抗致病因子的能力，另一方面也可引起组织细胞损伤、血管通透性升高、腺体细胞及间质水肿，导致前列腺组织内压力升高，产生盆底及会阴区张力性疼痛或不适。促炎性因子与抗炎性因子的平衡与否影响炎症程度。研究发现，前列腺液IL8水平与前列腺液白细胞计数呈正相关，这与IL8的趋化功能相符，趋化性细胞因子诱导白细胞集中于前列腺，产生炎性反应，IL8可能在前列腺炎早期发挥作用。
        本实验结果显示前炎症细胞因子IL-8水平在慢性细菌性前列腺炎的前列腺内明显增高，与相关的研究结果一致，经过中药治疗后，IL8接近正常水平，再次证实了IL8直接参与了前列腺炎的发病机制。慢性前列腺炎病因复杂，临床上尚无理想的特异诊断指标，与临床症状相比，细胞因子的变化可能更早、更准确体现前列腺的炎症状况。根据文献和本研究结果，提示IL8水平变化可作为前列腺炎的诊断参考依据。
        免疫性抗体SIgA是分泌型免疫球蛋白，能合成具有抗菌作用的含锌多肤，在前列腺体局部保护生殖系统免遭细菌和其他病原微生物的侵袭。当CNP局部组织结构破坏，纤维组织增生，分泌能力下降时EPS中IgA的含量则明显降低。若炎症减轻时，免疫功能恢复，IgA含量就增加。所以临床通过复检EPS中IgA的含量。可以作为CNP患者疗效评价指标之一。杜仲尚等［6］报道，用放射免疫法测定慢性前列腺液SIgA浓度，发现部分患者前列腺液SIgA分泌下降，认为这部分患者由于抗原长期刺激的结果，是前列腺免疫细胞不断受到病原破坏、减少所致。
        本实验结果证实慢性非细菌性前列腺炎模型的前列腺SIgA含量明显低于正常水平,而经过中药前列泰治疗后，SIgA含量明显增加，且与正常水平无显著性差异。因此，本文认为前列腺SIgA水平既可作为慢性非细菌性前列腺炎的诊断依据之一，又可作为疗效评价指标之一。
        我们认为，对于病情反复、长期难愈的慢性细菌性前列腺炎患者应检测前列腺液SIgA的含量和IL8水平，用以判定前列腺局部的免疫功能状况。对于前列腺局部免疫功能状况低下的慢性细菌性前列腺炎患者，在治疗方案中，注意采用改善和提高前列腺局部免疫功能的措施，比如采用本文中使用的中药前列泰，组方中所含组分具有改善机体免疫功能的作用，有望能提高部分患者的疗效。
        
       【参考文献】
         　　［1］Nickel JC, Dlson NM, Barabas A, et al. Br J Urol, 1990,66:47.
       
       ［2］马秀玲，耿战辉，李树田，等.应激对缺锌大鼠免疫功能的影响［J］.中国公共卫生，2003，19（1）：7.
       
       ［3］1 Stamey TA. Nature of prostatitis［J］.Invest Urol, 1968,128:444.
       
       ［4］Andemon RU, Fair WR. The pathogeny of prostatitis［J］.Invest Urol,1976,14:137.
       
       ［5］Black NJ, Beavis JP. Prostatitis and related factors fil［J］. Brit J Urol_1974_46:537.
       
       ［6］杜仲尚，杨青峰，王育敏.分泌型免疫球蛋白A放射免疫测定在慢性前列腺炎诊断中的初步应用［J］.中华泌尿外科杂志，1992，13（3）：158.