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       【摘要】 
       目的以牛蒡苷含量为指标评价陕西汉中地区牛蒡子品质。方法采用高效液相色谱法进行分析检测。结果发现汉中地区八县一区牛蒡子中的牛蒡苷含量均大于2000年版《中华人民共和国药典》（一部）规定的标准（≥5％）。结论汉中地区城固、镇巴、宁强、南郑4县牛蒡子中牛蒡苷含量较高，品质较好。
       【关键词】  高效液相色谱法 牛蒡苷 牛蒡子 汉中地区
       Abstract:ObjectiveTo analyse and compare the quality of Fructus Arctii in different regions of Hanzhong.MethodTo measure the arctiin by high performance liquid chromatography.ResultThe content of arctiin in Fructus Arctii from 9 counties of Hanzhong exceeded the standard recorded in China Pharmacopoeia.VolⅠ.2000.(≥5％).ConclusionThe contents of arctiin in Fructus Arctii from Chenggu，Zhenba，Ningqiang，Nanzheng are higher and the quality is better than that in the other regions.
       Key words:HPLC;  Arctiin;  Fructus Arctii;  Hanzhong area
       
       中药材牛蒡子（Fructus Arctii）为菊科植物牛蒡Arctium lappa L.的干燥成熟果实，又称大力子、牛子、恶实、鼠粘子等；呈长倒卵型，略扁，微弯曲，长5～7 mm，宽2～3 mm，表面灰褐色，带紫黑色斑点；味苦后微辛而稍麻舌［1］。牛蒡子含有木脂素类化合物，对多种致病性真菌有不同程度的抑制作用［2］。药理研究表明，牛蒡子粗提取物具有抗肿瘤作用［3］，其有效成分为牛蒡苷［4］。牛蒡苷具有抗肾病变，增强机体免疫功能，具有抗补体活性，钙离子拮抗及抗高血压等药理作用［5］，是牛蒡子的主要有效成分。
        实验采用HPLC法分别对汉中地区城固、南郑、略阳、汉台区、镇巴、宁强、留坝、西乡、佛坪所产牛蒡子中牛蒡苷的含量进行了测定，对汉中产区牛蒡子的品质进行评估。为道地中药材研究和开发、利用汉中地区牛蒡子药材生物资源提供依据。
       1   仪器与试剂
       1.1   仪器Agilent 1100高效液相色谱仪（安捷伦科技有限公司）；色谱柱为Hypersil ODS反向柱（4.6 mm×100 mm,5 μm）；SK-120E超声波提取仪（宁波科生仪器有限公司）；TTL-10A超纯水机（北京同泰联科技发展公司）；302型电热恒温鼓风干燥箱（上海医疗器械厂），FA2004电子天平（上海精密仪器有限公司），干燥器等。
       1.2   试剂甲醇(色谱纯)；乙腈（色谱纯）；甲醇(分析纯)；超纯水；对照品牛蒡苷（110819-200404）购于中国药品生物制品检定所。
       1.3   供试样品供试牛蒡子由陕西省汉中市药品检验所提供，采集于汉中地区各县，并经陕西理工学院生科院植物学教授杨培君先生鉴定。
       2  方法与结果
       2.1  色谱条件色谱柱为Hyperil-C18（4.6 mm×100 mm，5 μm）；流动相：甲醇－0.2%磷酸溶液－乙腈（20∶65∶15）；流速：1.0 ml/min；检测波长280 nm；柱温25℃；检测进样量为10 μl；检测时间为10 min；灵敏度0.02AUFS。
       2.2  标准曲线的制作精密称定干燥至恒重的牛蒡苷对照品5.5 mg置于10.0 ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，使对照品母液浓度为550.0 mg·L-1。分别精密吸取牛蒡苷对照品母液0.5，1.0，2.0，3.0，5.0 ml用甲醇定容于10.0 ml容量瓶，得到27.5，55.0，110.0 ，165.0 ，275 mg·L-1的一组牛蒡苷标准对照溶液。精密吸取上述标准对照溶液各10 μl，分别注入高效液相色谱仪，测定牛蒡苷得色谱峰面积（结果见图1），以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，得回归方程为Y =5.619 11X＋3.289 34，r= 0.999 25。牛蒡苷在0.08～2.75 μg线性关系良好。
       2.3  样品的测定将牛蒡子干燥并粉碎，过40目筛，精密称定粉末0.1 g，置于50 ml具塞三角瓶中,加甲醇30 ml，在超声波发生器内提取约30 min，取出放冷，滤至50 ml容量瓶中，残渣经甲醇洗涤，并人容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。经微孔滤膜（0.45 μm）过滤，精密吸取供试样品液10 μl，注入高效液相色谱仪中，测定牛蒡苷色谱峰面积，用外标法计算样品中牛蒡苷的含量。结果见表1，图2。表1  汉中地区9县（区）所产牛蒡子的牛蒡苷含量（略）
       2.4  加样回收率实验精确称定已知牛蒡苷含量的样品，分别加入牛蒡苷对照品，按2.3项下方法处理，检测。计算回收率。平均回收率为100.13%，RSD=0.75%（n =5）。结果见表2。表2  回收率实验（略）
       2.5  精密度实验在上述色谱条件下，对同一浓度的对照品溶液连续进样测定7次，得峰面积为252.6，RSD=1.15%（n=7）。
       2.6  重现性实验  
        
       按样品测定方法，对城固县产牛蒡子进行5次平行实验，牛蒡苷的平均含量为8.56%，RSD=1.55%（n=5）。
       2.7  稳定性实验在室温条件下，精密吸取同一样品溶液，按色谱条件在0，2，4，6，8，10，12 h时间间隔内分别测定牛蒡苷的峰面积，RSD=1.12%，说明牛蒡苷在12 h内稳定。
       3  讨论
        牛蒡苷作为牛蒡子的主要有效成分及控制指标，由于产地不同，其牛蒡苷含量不尽相同。程新萍［6］报道的15批牛蒡子中牛蒡苷平均含量为8.4%（1998），张涛［7］报道的牛蒡子中牛蒡苷含量为9.96%（2004）。汉中地区的牛蒡子中牛蒡苷含量以上述报道基本相似。《中国药典》2000版（Ⅰ部）规定牛蒡子中牛蒡苷含量不低于5.0%，此9个产地产牛蒡子中牛蒡苷含量均达到药典要求，其中城固、镇巴、宁强、南郑牛蒡子中牛蒡苷含量较高，品质较好。
       【参考文献】
         　　［1］国家药典委员会，中国药典，第2版［S］.北京：化学工业出版社，2000：53.
       
       ［2］中国医学科学院药物研究所，北京医学院药学系，南京药学院，等.中药志，（第3册）［M］.北京：人民卫生出版社，1984：23.
       
       ［3］佐藤昭彦.关于生药类抗肿瘤性的研究——牛蒡子的抗肿瘤性［J］.国外医学·中医中药分册，1987,9（2）：111.
       
       ［4］江苏新医学院.中药大辞典，上册［M］.上海：上海人民卫生出版社,1997：429.
       
       ［5］任常胜，朱庆玲.牛蒡子的研究概况［J］.中国民族医药杂志,2003,（12）增刊：36.
       
       ［6］程新萍,戴 涌,孙文基. 牛蒡子中牛蒡苷的含量考察［J］.西北药学杂志,1998,(3)：139.
       
       ［7］张 涛.牛蒡子不同炮制品中牛蒡苷含量的HPLC测定［J］.中草药,2004,35(4)：406.