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       【摘要】 
       目的研究巫溪不同产地的款冬所含的芦丁的差异。方法HPLC测定款冬芦丁含量。流动相：甲醇水（0.025 ml/L）磷酸（40∶60）；检测波长360 nm.结果标准曲线为Y=6 934.5X-336 5（r=0.999 9），芦丁在0.040 08～0.400 8 μg范围呈良好的线性关系；平均回收率为99.40%，RSD为2.14%。结论 该方法简便、快捷、准确；巫溪不同产地的款冬花的芦丁含量接近，适合在当地大规模栽培。
       【关键词】  款冬花 巫溪县 高效液相色谱 芦丁
       Abstract：ObjectiveTo determine rutin in buds of Tussilago farfara L. from different areas. MethodsThe content of rutin was determined by HPLC with methanol-water(0.025 mol·ml-1) phosphorous acid（40∶60）as mobile phase，detective wavelength was 360 nm.ResultsThe standard curve for rutin was Y=6 934.5X-3 365 (r =0.999 9)，linear range was 0.040 08～0.400 8 μg，the average extraction recovery was 99.40%．ConclusionThis method is simple，sensitive and rapid，and the contents of rutin in T. farfara from different areas are similar. Tussilago farfara L. is suitable to be planted in Chongqing Wuxi county.
       Key words： Tussilago farfara L.；  Chongqing Wuxi county；  HPLC；  Rutin
        款冬花为菊科款冬属植物款冬Tussilago farfara L．的花蕾。为常用的止咳平喘药，主要含有黄酮类化合物、倍半萜类、生物碱和挥发油等［1］。款冬花的研究文献多为药理和化学方面，巫溪不同产地的成分研究尚未见报道。重庆市巫溪县是款冬花的传统产地，有悠久的栽培历史，1958年因此被国家评为药材生产红旗县［2］。本研究通过对巫溪不同产地的款冬花的芦丁含量进行高效液相测定，为当地的款冬花GAP生产提供质量依据。
       1  仪器与试药
       1.1  仪器Shimadzu  LC2010A(岛津)；（Shimadzu  Classvp工作站）。对照品购自中国药品生物制品检定所；甲醇为色谱纯，水为高纯水，其他试剂为分析纯。
       1.2  材料由作者分别采自巫溪8个GAP栽培实验点和一个药农自己的栽培品，重庆市中药研究院钟国跃研究员鉴定，为菊科植物款冬花（Tussilago farfara L．）的花蕾。不同产地样品见表1。表1  不同产地款冬花试验样品及采收时间（略）
       2  方法与结果
       2.1  色谱条件迪马C18柱（250 mm×4.6 mm×0.5 μm）；流动相：甲醇-水（0.025 mol·ml-1）磷酸，（40∶60）；流速：1 ml·min-1，波长360 nm。柱温室温。芦丁理论塔板数不得低于5 000。
       2.2  对照品溶液的制备精密称取（减压干燥）芦丁对照品5.01 mg,置25 ml量瓶中，甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取1 ml，置10 ml容量瓶中，加甲醇制成0.020 04 mg·ml-1的溶液。
       2.3  供试品溶液的制备取款冬花样品粉碎，（过20目筛），60℃干燥至恒重，分别精密称取上述各样品各1.0 g，置索氏提取器中，加乙醇65 ml，回流提取3 h，滤过，减压回收乙醇，残留物加甲醇少量溶解，并定容于2 ml量瓶中，摇匀，备用，作为样品溶液。 对照品与供试药的HPLC图谱见图1～2。
       2.4  标准曲线的制作精密吸取该溶液2，4，6，8，10，15，20，25 μl进样测定，以峰面积（Y）对样品进样量X（μg）进行线性回归，得芦丁回归方程为Y=6 934.5X-3 365，r=0.999 9，表明芦丁在进样量0.040 08～0.400 8 μg范围呈良好的线性关系。
       2.5  稳定性实验取供试品溶液，室温下每6 h进样分析1次，连续测定5次，芦丁平均峰面积为RSD为1.4%。表明供试品溶液在24 h内稳定。
       2.6  精密度实验精密吸取上述0.020 04 mg·ml-1的对照品溶液，连续进样5次，10 μl/次，芦丁峰面积的RSD为1.01%。结果表明，精密度良好。
       2.7  重复性实验分别精密称取同一批栽培款冬花5份，照“2.9”项下方法操作，测定峰面积并计算，得峰面积值和含量的RSD均小于1.37%。
       2.8  加样回收率精密称取已知含量的同一批次样品5份，每份精密加入芦丁对照品溶液1 ml（0.020 04 mg·ml-1），按“2.3”项方法制备供试液，照上述方法测定；分别测得不同产地的款冬花样品加样回收范围在97.80%～102.8%。结果见表2。表2   不同产地款冬花回收率（略）
       2.9  样品测定分别取9批不同产地的供试品，按“2.3”项下制备供试液，对所有款冬花样品定量提供，取峰面积的平均值，按外标法计算含量，药材样品的含量测定结果见表3。表3  款冬花不同产地试验样品芦丁含量测定（略）
       3  讨论
        对不同产地的款冬花的成分测定，是巫溪款冬花GAP实施的关键，由于2005版《中国药典》［3］没有明确的成分控制指标，参照有关文献［4］，我们选取了芦丁作为质量控制指标。
        巫溪不同产地的款冬花的芦丁含量接近，平均为22.2%，质量易于控制，适合在当地大规模生产。
        由于样品的数量有限，没有省外的样品，今后还要继续完善。
       【参考文献】
         　　［1］阴 健.中药现代研究与临床应用［M］.北京：中医古籍出版社，1995：347.
       
       ［2］陈兴福，刘思勋，刘岁荣，等.款冬花生长土壤的研究［J］.中药研究与信息，2003，5（5）：20.
       
       ［3］国家药典委员会．中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：233.
       
       ［4］李仲葓，郭 玫，余晓晖，等.用高效液相色谱法测定款冬花中芦丁的含量［J］.甘肃中医学院学报，2000，17（3）：20.