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       【摘要】 
       目的建立强力感冒片中绿原酸的含量测定方法。方法高效液相色谱（HPLC）法测定强力感冒片中绿原酸的含量。采用C18柱,以乙腈-0.4%磷酸（10∶90）为流动相，检测波长为327 nm。结果在0.366～2.196 μg·ml-1范围内线性关系良好（r=0.999 99，n=6），平均回收率为97.5% ，RSD= 0.8% (n=4)。结论 该方法简便、准确，可为标准的修订提供可行的依据。
       【关键词】  高效液相色谱法 强力感冒片 绿原酸 含量测定
       Abstract：ObjectiveTo establish the method of content determination for chlorogenic acid in Qiangliganmao Tablet.MethodsThe content of chlorogenic acid in Qiangliganmao tablet was determined by HPLC with C18 column and acetonitrile-0.4% phosphoric acid(10∶90) as the mobile phase.The detection wavelength was 307 nm.ResultsThere was a good  linear relationship in the range of 0.164～0.984 μg·ml-1（r=0.999 99，n=6）.The average recovery rate was 97.50% ，RSD= 0.8%(n=4).ConclusionThe method is simple and accurate.It can provide a feasible basis for revision of the standard.
       Key words：HPLC;   Qiangliganmao tablet;   Chlorogenic Acid;   Content determination
        强力感冒片是由金银花、牛蒡、连翘等9味中药和对乙酰氨基酚组成的复方制剂，具有辛凉解表、清热解毒、解热镇痛的功效。用于伤风感冒，发热头痛，口干咳嗽，咽喉疼痛等病症，有很好的疗效。是《卫生部药品标准 · 中药成方制剂》［1］第二十册收载的品种，原标准中无主药金银花的有效成分绿原酸的含量测定项目，为了有效控制药品质量，确保该制剂的疗效，本实验以方中主药金银花的有效成分绿原酸为定量控制指标，采用HPLC测定强力感冒片中绿原酸的含量，方法简便、准确。
       1  器材
        Agilent 1100 Series高效液相色谱仪；METTLER AE240电子分析天平；SB3200超声波清洗器。
        绿原酸对照品由中国药品生物制品检定所提供（批号110753-200212，供含量测定用）；流动相所用乙腈为色谱纯；水为重蒸馏水；其它试剂均为分析纯。
        强力感冒片3批（武汉中联药业集团股份有限公司提供，批号为060671，060542，060242）。
       2  方法与结果［2］
       2.1  色谱条件色谱柱：NUCLEOSIL C18(10 μm，4.6 mm×250 mm)；流动相：乙腈-0.4%磷酸（10∶90）；检测波长：327 nm；流速：1.0 ml·min-1；柱温：25℃；进样量：10 μl。
       2.2  溶液的制备与测定
       2.2.1  对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每毫升含60 μg的溶液，即得。
       2.2.2  供试品溶液的制备取重量差异项下的本品，研细，取约0.5 g，精密称定，置50 ml棕色量瓶中，加50%甲醇适量，超声处理（功率250 W，频率33 kHz）20 min，放置至室温，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2 ml，置10 ml棕色量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀滤过，取续滤液即得。
       2.2.3  空白对照溶液的制备以相同的处方比例，制得不含金银花的空白样品。按“2.2.2”项下方法制成空白对照溶液。
       2.2.4  测定分别精密吸取上述3种溶液各10μl，按上述色谱条件分别测定，见图1。结果表明供试品色谱图中呈现与绿原酸对照品保留时间相应的色谱峰，而空白对照无干扰。
       2.3  线性关系考察精密称取绿原酸对照品18.30 mg，置50 ml棕色量瓶中，加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；精密吸取对照品贮备液2 ml，置10 ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密吸取上述溶液5，10，15，20，25，30 μl进样测定，记录峰面积。以浓度（C）对峰面积（A）进行线性回归，得回归方程为A＝89.245 7C-3.895 2(r=0.999 99，n=6)。结果表明绿原酸在0.366～2.196 μg·ml-1范围内线性关系良好。
       2.4  精密度实验精密吸取同一对照品溶液10 μl，连续进样5次，所得峰面积积分值1 039，1 036，1 032，1 030，1 039，结果峰面积平均值为1 035，RSD=0.4%（n=5）。
       2.5   稳定性实验精密吸取上述供试品溶液10 μl，于8 h后测定峰面积，结果峰面积几乎不变，表明供试品溶液至少在8 h内稳定。
       2.6   重复性实验精密量取同一样品（批号为 060671）3份，照“2.2.2”项下操作，测得含量平均值为2.1 mg/片,RSD为0.6%（n=4）,表明本法重复性好。
       2.7  回收率实验精密称取同一已知含量样品（批号为060671）约0.5g共4份，定量加入适量的绿原酸对照品，照“2.2.2”项下操作，并按上述色谱条件测定。结果见表1，平均回收率为97.5%，RSD为0.8%（n=4）。表1  加样回收率实验结果（略）
       2.8  样品测定按上述测定方法对3个不同批号样品中绿原酸含量进行测定。结果见表2。表2  样品测定结果（略）
       3  讨论
        取绿原酸对照品进行紫外扫描（200～400 nm）,结果在327.0 nm波长处有最大吸收，实验选择327 nm作为检测波长。
        方法学研究表明，本文报道的测定方法操作简单，结果准确，重复性好，空白无干扰，可作为强力感冒片质量标准的含量测定方法。
       【参考文献】
         　　［1］中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂第二十册［S］.1998：346.
       
       ［2］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：附录33.