芦荟膏中芦荟苷的含量测定
作者：刘戎 运委 张建苹
《时珍国医国药》 2007年 第11期
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【摘要】
目的建立测定芦荟膏中芦荟苷含量的方法。方法采用KromasilC18柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱 ;流动相为甲醇水0.1%磷酸溶液（45∶50∶0.5）；流速为1.0 ml·min-1，检测波长为356 nm，柱温为25℃。结果芦荟苷线性范围为29.8～596 μg·ml-1；r=0.999 9，精密度实验RSD为1.0%,重复性实验RSD为0.6 %,平均回收率98.3%，RSD为1.0%(n = 5)。结论 该方法简便、可靠、准确，可用于该制剂的含量质量控制。
【关键词】 芦荟膏 高效液相色谱 芦荟苷
芦荟是多年生百合科肉质草本植物，主要药用品种为库拉索芦荟、好望角芦荟、中华芦荟等［1］。其中芦荟在烧伤、烫伤领域的应用在我国已有一千多年的历史［2］。为了保证芦荟在烧伤、烫伤领域应用的质量和疗效，我们建立了芦荟膏中的主要成分芦荟苷的含量控制方法，以期为芦荟膏的质量控制提供实验依据。
1 仪器与试药
美国戴安SUMMITP880型高效液相色谱仪,Chromeleon色谱工作站。
芦荟苷对照品：中国药品生物生物制品检定所,批号0787-200102，含量98.0%；芦荟膏(规格：0.1 g·g-1，湖北省黄石市中医医院)；甲醇为色谱纯，水为二次重蒸且过滤膜水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为Kromasil C18 柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇-水-0.1%磷酸溶液（45∶50∶0.5）；检测波长356 nm；柱温25℃。理论塔板数按芦荟苷峰计算为2113，峰尖锐，对称性好。在此色谱条件下基线平稳，柱效高，分离效果好。
2.2 供试品溶液与对照品溶液的制备
精密称取本品0.15 g,置50 ml量瓶中，加入甲醇适量，置水浴中加热使溶解，放冷，用甲醇稀释到至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得供试品溶液。另取不含芦荟的膏剂0.15 g,依法处理,得缺芦荟阴性样品液。精密称取芦荟苷对照品适量，加甲醇制成每毫升中含0.596 mg的溶液，即得芦荟苷对照品溶液。
2.3 线性关系精密称取对照品溶液0.5, 1，3，5，7，9,10 ml置10 ml量瓶中, 加甲醇稀释至刻度,摇匀；分别进样20 μl，按上述色谱条件测定峰面积,以峰面积积分值为纵坐标，以芦荟苷的浓度为横坐标绘制标准曲线，得回归方程为：
A = 47.26 C + 8.688，r = 0.999 9
结果表明芦荟苷浓度在29.8～596 μg·ml-1范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系。
2.4 精密度实验
取对照品溶液，分别测定6次，峰面积的RSD为1.0% ，表明有良好的精密度。
2.5 稳定性实验
取同一批样品溶液，分别在0,1,3,5,7,9,12 h依法测定,记录色谱峰的峰面积，RSD为0.7%。表明供试品溶液在12 h内稳定。
2.6 重复性实验
取同一批芦荟膏样品6份，按照“2.8”项样品测定法操作，测得芦荟苷含量的RSD为0.6%（n = 6）。结果表明,该方法的重复性良好。
2.7 加样回收率实验 精密称取已知含量为100.3 mg·g-1的芦荟膏5份(约0.075g),分别精密加入芦荟苷对照品溶液(1.51 mg·ml-1)5 ml,按供试品溶液制备及“2.8”样品测定项下操作,测定芦荟苷含量,计算平均加样回收率为98.3 %,RSD为1.0%(n = 5 )。
2.8 样品测定
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μl，注入高效液相色谱仪，依上述色谱条件，以外标法计算含量，测定样品中芦荟苷的含量。3批样品中芦荟苷含量分别为99.8,100.8,100.3 mg·g-1；RSD分别为1.0%,0.9%,0.5%(n=3 )。色谱图见图1。
3 讨论
3.1 流动相选择
我们采用文献方法［2，3］的流动相，发现柱压偏高且峰形不好。经过反复实验，本文选择甲醇-水-0.1%磷酸溶液（体积比为45∶50∶0.5）为流动相时，问题得以解决。
3.2 测定波长选择
在200～700 nm之间，对芦荟苷对照品进行紫外吸收扫描，结果表明在356 nm处有最大吸收，故选择356 nm为检测波长。
结果表明该方法简单，快捷，专属性强，准确度高，具良好的重现性，可用于芦荟膏的质量控制。
【参考文献】
［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2000：129.
［2］石炳娟，陈 波.薄层扫描法测定复方芦荟胶囊中芦荟苷的含量［J］. 潍坊医学院学报，2003，25（6）：474.
［3］毕开顺.高效液相色谱法测定芦荟中芦荟苷的含量［J］. 药物分析杂志，2001，21（6）：387.