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       【摘要】 
       目的研究安痛藤活性部位的化学成分，为阐明其活性成分提供依据。方法利用各种色谱技术进行分离，根据化合物的光谱数据（IR,MS,1HNMR,13CNMR）和化学方法鉴定其结构。结果分离并鉴定了5个化合物，分别为岩白菜素（Ⅰ），3,3＇,4＇-三甲氧基鞣花酸（Ⅱ），β-谷甾醇（Ⅲ），没食子酸（Ⅳ），3,3＇-二甲氧基鞣花酸（Ⅴ）。结论化合物Ⅰ，Ⅱ，Ⅴ为首次从该植物中得到，化合物Ⅱ和Ⅴ为首次从该属植物中分得。
       【关键词】  安痛藤 岩白菜素 3,3＇,4＇-三甲氧基鞣花酸; β-谷甾醇 没食子酸 3,3＇-二甲氧基鞣花酸
       Studies on the Chemical Constituents from Cissus assamica(Laws.)
       XIE Yihui，ZHANG Yeqing，DENG Peng，YU Wushuang
       Jiangxi College of TCM,Nanchang 330006,China
       Abstract:ObjectiveTo study the chemical constituents from Cissus assamica (Laws.) and to obtain a more comprehensive understanding of its effective components. MethodsCompounds were isolated by various column chromatographies with silica gel.Their structures were elucidated by spectral analysis(IR,MS,1HNMR,13CNMR) and chemical evidence. ResultsFive compounds were isolated and elucidated as bergenin(Ⅰ)， 3, 3＇,4＇ triOmethyl ellagic acid（Ⅱ），β-Sitosterol（Ⅲ），Gallic acid （Ⅳ），3,3＇di0methyl ellagic acid（Ⅴ）.Conclusion Among these compounds,Ⅰ，Ⅱand Ⅴwere isolated from this plant for the first time,Ⅱand Ⅴwere obtaind from Cissus L. for the first time.
       Key words:Cissus assamica (Laws);  Bergenin;   3, 3＇,4＇tri0methyl ellagic acid;   β-Sitosterol;   Gallic acid; 3,3＇di0methyl ellagic acid
       安痛藤为葡萄科白粉藤属植物苦朗藤Cissus  assamica (Laws.)的藤茎，具有祛风除湿、散淤、拔毒作用，主治风湿痹痛、跌打扭伤、痈疽肿毒。安痛藤主要分布在中南、西南及江西、福建、西藏等地［1］。研究表明，安痛藤有较强的抗类风湿关节炎的作用［2］。为了寻找其活性成分及新的药理活性，更好地利用丰富的植物资源，我们对其进行了化学成分的研究，从抗类风湿关节炎作用较强的醋酸乙酯部分初步分离得到5个化合物：Ⅰ岩白菜素(bergenin),Ⅱ3,3＇,4＇-三甲氧基鞣花酸(3,3＇,4＇-tri-0- methylellagic  acid)，Ⅲβ-谷甾醇（β-Sitosterol），Ⅳ没食子酸(Gallic acid)，Ⅴ3,3＇-二甲氧基鞣花酸(3,3＇-di-0-methylellagic acid)。
       1  材料与方法
       1.1  仪器与材料
       X-4A数字显微熔点测定仪(温度未校正)、DU-650型紫外分光光度计（美国Beckman公司）、Agilent 1100型高效液相色谱仪（美国Agilent公司）、FT-IR2000型红外分光光度计（美国Perkin-Elmer公司）、Mercuryplus400MHz核磁共振仪 (美国varian公司)、Q-Tof mico YA019质谱仪(英国质谱公司)，硅胶均为青岛海洋化工厂产品,柱层析用聚酰胺为浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂,所用试剂均为分析纯。安痛藤采于江西赣南地区，由江西中医学院刘庆华老师采集并鉴定为葡萄科植物苦朗藤Cissus  assamica (Laws.)
       1.2   提取与分离
       取安痛藤粗粉,用80%乙醇渗漉至近无色。回收乙醇后加适量水混悬，依次用氯仿，醋酸乙酯 ，正丁醇萃取，各萃取部分均用真空浓缩。取醋酸乙酯萃取部分，上聚酰胺柱。用水洗至无色，浓缩得到水洗浓缩液A, 聚酰胺柱再用95%乙醇洗脱至无成分流出，洗脱液浓缩，得浓缩液B。浓缩液A经硅胶柱分离，以氯仿∶乙醇（5∶2）洗脱得化合物Ⅰ。浓缩液B,经硅胶柱分离，以氯仿∶甲醇（80∶20-0∶1）梯度洗脱，得到结晶Ⅱ～Ⅴ。
       2  结果
       2.1  结晶Ⅰ
       无色棱柱状结晶（MeOH），mp134～136℃。可溶于甲醇和热水。异羟肟铁反应阳性，三氯化铁/铁氰化钾反应显蓝色。UVλmax(nm)：275，220。TOF MS m/z:327.08(M-H),TOF MSMS327.08 m/z:327.08(M-H,11%)，312.07(M-H-CH3,70%)，234.06(M-H-CH3-C2H6O3，90%)，192.04(M-H -CH3-C4H8O4,100%)；ＩＲυmaxcm-1:3 389.96，3251.68(-OH)，2 951.87(-CH3)，2 892.28(-CH2-)，1 704.38 (C=O)，1 612.27，1 528.64，1 464.03(aromatic)，1 343.83，1 234.90 (aromatic C-0)，861.20(C-H)；1H-NMR(TMS，C5D5N,400 MHz)δ:3.99(s,3H,-OCH3)，4.17-4.33(m,3H)，4.5(dd,j=8.6,9.0，1H)，4.65 (t,j=9.78,1H)，4.72(d,j=10.56,1H)，5.27(d,j=10.57,1H)，7.6(s,1H, aromatic-H)；13C-NMR(TMS，C5D5N,400 MHz)δ:119.528(C1)，116.579(C2)，149.402(C3)，141.894 (C4)，152.769 (C5)，111.073(C6)，165.454(C7)，73.876(C1＇)，75.522(C2＇)，81.297(C3＇)，72.089(C4＇)，83.501(C5＇)，62.575(C6＇)，60.283(MeO)。以上数据与文献［2，3］报道一致，结晶Ⅰ与岩白菜素对照品，在TLC和HPLC多种溶剂系统中，Rf值完全一致，保留时间一致，与岩白菜素对照品混合熔点不降低,故推定为岩白菜素（bergenin）。
       2.2  结晶Ⅱ
       淡黄粒状结晶（氯仿+甲醇），mp259～261℃。TOF MS m/z:343.02(M-H), TOF MSMS343.02 m/z: 328.02（M-H-CH3，100%），312.99（M-H-OCH3，90%）；1H-NMR(TMS，C5D5N，400 MHz)δ:3.88（s，3H，4＇-OCH3）,4.17（s，3H，3＇-OCH3）,4.23（s，3H，3-OCH3）,7.85(s,1H,aromatic-H)，8.07(s,1H,aromatic-H);13C-NMR(TMS，C5D5N,400 MHz)δ:56.604（4＇-OCH3）,61.36（3＇-OCH3）,61.592（3-OCH3）,108.065（C-5）,111.864（C-5＇）,112.883（C-4）,113.144（C-4＇）,113.885（C-3）,114.333（C-3＇）,141.37（C-6）,141.778（C-6＇）,141.993（C-1）,142.388（C-1＇）,154.34（C-2）,154.556（C-2＇）,159.207(C=O),159.307(C=O)。以上数据与文献［4，5］报道基本一致，故推定为3,3＇,4＇-三甲氧基鞣花酸（3,3＇,4＇-tri-O-methylellagic acid）。
       2.3  结晶Ⅲ 
       白色针状结晶（石油醚+丙酮），mp139～141℃。TOF MS m/z:397.42（M+H-H2O），TOF MSMS397.30 m/z:397.31(M+H-H2O，40%), 189.08(27%)，175.06(39%)，161.04(78%)，147.02（100%）；1H-NMR(TMS，CDCl3，400 MHz)δ：3.56(1H，m，H-3α)，5.35(1H，br.d，J=5.09 Hz，H-6)，0.6746(3H，t，J=7.43 Hz，H-29)，0.835(3H，d，J=10.95 Hz，H-26)，0.803(3H，d，J=10.96 Hz，H-27)，0.916(3H，d，J=6.26 Hz，H-21)，1.004(3H，s，H-18)，1.565(3H，s，H-19)；13C-NMR(TMS，CDCl3,400MHz)δ: 37.216(C-1)，31.63(C-2)，71.799(C-3)，42.266(C-4)，140.726(C-5)，121.728(C-6)，31.864(C-7)，31.864(C-8)，50.077(C-9)，36.478(C-10)，21.055(C-11)，39.732(C-12)，45.779 (C-13)，56.728 (C-14)，24.286(C-15)，28.238(C-16)，55.998(C-17)，11.965(C-18)，19.392(C-19)，36.128(C-20)，18.999(C-21)，33.897(C-22)，29.078(C-23)，51.216 (C-24)，25.977(C-25)，18.757(C-26)，19.82(C-27)，23.019(C-28)，11.844(C-29)。以上数据与文献［6，7］报道基本一致，结晶Ⅲ与β-Sitosterol对照品，在TLC多种溶剂系统中的Rf值完全一致，与β-Sitosterol对照品混合熔点不降低,故推定为β-谷甾醇（β-Sitosterol）。
       2.4  结晶Ⅳ 
       白色粉末（乙醇），mp242℃～244℃。Molish反应阳性，茴香醛-浓硫酸反应显橙红色，NaOH试液反应显黄色，FeCl3 溶液反应显浅蓝色。取化合物Ⅳ与没食子酸对照品进行红外光谱比较，吸收峰位置与强度基本一致，故可确定化合物Ⅳ为没食子酸(Gallic acid)。
       2.5  结晶Ⅴ
       淡黄粉末（甲醇），mp263～265℃。TOF MS m/z:329.06（M-H），TOF MSMS329.06m/z:314.05（M-H-CH3，100%），299.03（M-H-OCH3，80%）；1H-NMR(TMS，C5D5N，400MHz)δ:8.085（s，2H，aromatic-H）,4.22（s，3H，3"-OCH3）,4.21（s，3H，3-OCH3）； 13C-NMR(TMS，C5D5N,400MHz)δ:112.906(C-1,1＇)，142.135(C-2,2＇)，153.833 (C-3,3＇)，141.4(C-4, 4＇)，110.365(C-5,5＇)，113.474(C-6,6＇)，159.415(C-7,7＇)，61.331(-OCH3)。以上数据与文献［8，9］报道基本一致，故推定为3,3＇-二甲氧基鞣花酸（3,3＇-di-O-methyl ellagic acid）。
       3  讨论
       安痛藤味辛，性平，有着悠久的药用历史，在多部本草著作中均有记载。本实验所分离的岩白菜素，3,3＇,4＇-三甲氧基鞣花酸，3,3＇-二甲氧基鞣花酸均为首次从该植物中提取得到，其中3,3＇-二甲氧基鞣花酸与3,3＇,4＇-三甲氧基鞣花酸为首次从该属植物中得到。文献［10］记载，岩白菜素具有止咳祛痰，抗炎、护肝、抗溃疡、提高免疫等作用。β-谷甾醇具有降低胆固醇、止咳、抗癌及抗炎等作用，临床治疗慢性气管炎，有效率达89.3%［11］。
       本研究结果为安痛藤的药效研究提供了基础资料,为安痛藤资源进一步深度开发和合理利用提供科学依据。安痛藤其它提取部分的成分将继续进行分离鉴定，其生物活性还有待于进一步实验。
       【参考文献】
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