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       【摘要】 
       目的探讨杜梨果实热水提取物对H22小鼠的抗肿瘤作用。方法以H22（肝癌实体型）移植小鼠为模型研究杜梨果实热水提取物体内抗肿瘤作用，以及对脾脏、胸腺指数的影响。结果杜梨果实热水提取物对H22有显著的抑制作用，使荷瘤小鼠的脾脏、胸腺指数明显升高。结论杜梨果实热水提取物具有一定的抗肿瘤活性。
       【关键词】  杜梨果实 热水提取物 肝癌H22小鼠 抗肿瘤
       Antitumor Effect of the Hot Water Extract from Fruits of Pyrus betulaefolia Bge. in H22 Hepatoma Mice
       ZHAO Xiaoliang, ZHOU Zhongbo, BAI Hongjin, ZHANG Guofeng
       （Xinjiang Production & Construction Corps Key Laboratory of Protection and Utilization of Biological Resources in Tarim Basin，Tarim University，Alar, Xinjiang，843300, China）
       Abstract:ObjectiveTo investigate the antitumor effect of the hot water extract  water from Pyrus betulaefolia Bge..MethodsH22 tumor-bearing mice model was established and the affection on spleen and thymus index was observed.Results The experiment indicated that the extract by hot water showed significant inhibitory effects on H22, and prominently improved spleen and thymus indexes.ConclusionThe hot water extract from Pyrus betulaefolia Bge. has antitumor activity.
       Key words:Fruits of Pyrus betulaefolia Bge.；  Hot water extract；  H22  hepatoma mice；  Antitumor
       杜梨Pyrus betulaefolia Bge.属蔷薇科（Rosaceae）梨属（Pyrus L.）乔木，在微酸性和碱性土壤中生长良好，尤其能耐盐碱，在瘠薄和干燥土壤中也能生长。其种子发芽率高，能抗病虫害，是防护林及沙荒地造林的珍贵树种。杜梨药用称棠梨，主治功用为敛肺涩肠、止咳止痢。常用于治疗久咳、久泻、久痢等［1］。《本草纲目》记载棠梨（即杜梨）“味酸、甘、涩、寒；无毒。烧熟食用，可治泄泻痢疾。［2］”根据文献检索，目前杜梨主要作为砧木、园林树种以及重要的木材来源广泛分布在我国的北部、东北部和中部各省（区），以黄河流域分布较多［1］。
       
       关于杜梨的研究主要集中在种子萌发与幼苗生长、幼苗根系生长状况，作为砧木嫁接梨树等方面［3～5］，对于杜梨果实活性方面的研究未见相关报道。本实验对杜梨果实热水提取物对H22肝癌荷瘤小鼠抗肿瘤作用进行了研究，为杜梨资源的进一步开发利用提供理论依据。
       1  器材与方法
       1.1  仪器旋转蒸发仪、剪刀、镊子、电子天平、等。
       1.2  材料杜梨果实样品于200511采自塔里木盆地，经鉴定为蔷薇科梨属植物杜梨Pyrus betulaefolia Bge.的果实，自然风干，去除种子及果柄，粉碎后过40目筛备用。
        实验用昆明小鼠，购于长春市实验动物中心，5～6周龄，雄性，体重18～22 g。
       1.3  药品5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-Fu），购于吉林省肿瘤医院；生理盐水、吐温-80等。
       1.4  方法［6～7］
       1.4.1  受试药制备取杜梨果实粉末一定量，加入5倍体积蒸馏水于80℃水浴提取2 h，过滤后滤渣采用同样方法再提取1次，合并两次滤液，40℃减压浓缩至膏状，真空干燥得受试物。
       1.4.2  动物分组实验用小鼠饲养于温度为22～24℃的室内，自由进食和饮水。肿瘤细胞移植后，小鼠被随机分为阳性对照组、阴性对照组和受试药组。阳性对照组腹腔注射5-Fu，阴性对照组和受试药组为灌胃给药。所有用药均为生理盐水配制，并且保证现用现配，给药体积均为0.2 ml/（10 g·bw）。
       1.4.3  药物配制阳性对照：5-Fu（25 mg/kg）。阴性对照：生理盐水（0.2 ml/10g）。受试药：受试药用生理盐水配制成1 000 mg/kg和100 mg/kg两个剂量。
       1.4.4  实验步骤取接种7 d的种鼠腹水癌细胞，用生理盐水制成1×106个/ml的细胞悬液，以每鼠0.1 ml接种于小鼠右腋皮下，24 h 后随机分组，每组10只。同时开始每d灌胃给药，灌胃体积为0.2ml/（10 g·bw）。连续给药7 d，第8天处死小鼠，摘取瘤块、胸腺和脾脏，分别称重。药物的抗肿瘤活性通过比较对照组和受试药组的抑制率来衡量。
       1.4.5  结果计算及统计
       肿瘤抑制率＝（对照组平均瘤重－给药组平均瘤重）/对照组平均瘤重×100％。胸腺指数为每克体重中胸腺的毫克数，脾指数为每克体重中脾脏的毫克数。各数值均以 ±s（平均值±标准差）来表示。通过t检验分析数据的代表性，P<0.05说明在统计学上差异显著， P<0.01说明在统计学上差异非常显著。
       2  结果与分析
       2.1  杜梨果实热水提取物对H22荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用给药结束后，摘取瘤块、称重，计算抑瘤率，结果见表1。表1  生理盐水、5-Fu和杜梨热水提取物对H22荷瘤小鼠的抑瘤率（略）
       从表1可以看出，杜梨热水提取物1 000 mg/kg和100 mg/kg对小鼠肿瘤生长均具有良好的抑制作用（P＜0.05），其中100 mg/kg剂量组效果极为显著（P＜0.01）。
       2.2  杜梨果实热水提取物对H22荷瘤小鼠免疫器官的影响给药过程中每天称量小鼠体重，给药结束后，摘取小鼠胸腺和脾脏分别称重。结果见表2。表2  生理盐水、5-Fu和杜梨果实热水提取物对H22荷瘤小鼠免疫器官的影响（略）
       从表2可以看出，与生理盐水组相比，杜梨热水提取物1 000 mg/kg和100 mg/kg脾指数具有显著的差异（P<0.05）；杜梨热水提取物1 000 mg/kg胸腺指数具有显著的差异（P<0.05）。与5-Fu组相比，杜梨热水提取物100 mg/kg脾指数具有极显著的差异（P<0.01），杜梨热水提取物1 000 mg/kg和100 mg/kg胸腺指数均具有极显著的差异（P<0.01）。
       2.3  生理盐水、5-Fu和杜梨热水提取物各组小鼠体重变化情况见图1。
       从图1可以看出，与生理盐水组相比，各给药组体重增长均有所下降；与阳性对照组相比，杜梨热水提取物1 000 mg/kg和100 mg/kg组体重增长有所升高。
       3  讨论
       与生理盐水组相比，5-Fu、杜梨热水提取物1 000 mg/kg和杜梨热水提取物100 mg/kg对H22荷瘤小鼠均有抑制效果。而杜梨热水提取物剂量为100 mg/kg 时抑瘤率高于剂量1 000 mg/kg，分别为57.63％和40.68％，其原因及最佳给药剂量在进一步实验中。胸腺和脾脏为机体主要免疫器官，一些免疫抑制剂可使胸腺、脾脏萎缩；免疫增强剂可使胸腺、脾脏增重。因此，胸腺和脾脏可作为观察药物对免疫影响的指标之一。因而可推测，杜梨热水提取物对H22荷瘤小鼠肿瘤的抑制主要是通过提高宿主的免疫功能实现的。与生理盐水组相比，各给药组体重增长均有所下降；与阳性对照组相比，给药组体重增长有所升高，可以推测，杜梨热水提取物对小鼠没有毒副作用。因此，杜梨果实热水提取物具有一定的抗肿瘤作用。
       【参考文献】
         　　［1］刘孟军.中国野生果树［M］.北京：中国农业出版社，1999：216.
       
       ［2］李时珍.本草纲目（校实本·下册）［M］.北京：人民卫生出版社，2003：1766.
       
       ［3］程奇，吴翠云，阿依买木.不同处理对梨种子休眠与萌发的影响［J］.塔里木大学学报，2005，17（1）：28.
       
       ［4］刘润进，袁玉清，祝 军.杜梨幼苗根系生长状况观察［J］.莱阳农学院学报，1998，15(3)：180.
       
       ［5］李银芳，黄子蔚，王 东.起苗时间对杜梨生长的影响［J］.干旱区研究，2003，21（4）：300.
       
       ［6］徐叔云.药理实验方法学，第3版［M］.北京：人民卫生出版社，2002：1757.
       
       ［7］李仪奎.中药药理实验方法学［M］.上海：上海科学技术出版社，1991：513.