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       【摘要】 
       目的观察复方黄毛豆腐柴搽剂免疫增强作用。方法采用单核巨噬细胞吞噬试验方法，复方黄毛豆腐柴搽剂以2.25 g生药/ml和0.75 g生药/ml剂量分别给小鼠连续腹部涂药5 d。结果复方黄毛豆腐柴搽剂大、小剂量组均能明显提高单核巨噬细胞吞噬指数K值，分别与阴性对照组比较均有统计学意义，P＜0.05。结论复方黄毛豆腐柴搽剂具有显著的免疫增强作用。
       【关键词】  复方黄毛豆腐柴搽剂 免疫增强 单核巨噬细胞
       Experimental Study on Immunoenhancement of Compound Huangmaodaofuchai Liniment in Mice
       PAN Hongping, ZHONG Zhengxian, CHEN Xuefen, LI Yanjing
       1.People"s Hospital of Guangxi Autonomous Region,Nanning，Guangxi 530021，China；
       2.Guangxi Institute of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica,Nanning 530022，China
       Abstract:ObjectiveThe immunoenhancement effect of compound Huangmaodaofuchai liniment was observed.MethodsThe method of  phagocytosis of mononuclear  macrophage test was used.Compound  Huangmaodaofuchai liniment was administrered by external use on mice"s abdomen in dosage of 2.25 g/ml and 0.75 g/ml respectively for consecutive 7 days. ResultsCompound  Huangmaodaofuchai liniment significantly inhanced the index value of phagocytosis in mononuclear macrophages in both dosage of 2.25 g/ml and 0.75 g/ml.ConclusionCompound  Huangmaodaofuchai liniment can inhance the immunity in mice.
       Key words:Compound  Huangmaodaofuchai liniment；  Immunoenhancement；  Mononuclear macrophages
       复方黄毛豆腐柴搽剂主要由广西壮药黄毛豆腐柴与骨碎补、冰片、薄荷脑等配伍制成的乙醇外用透皮搽剂，具有活血化淤、强筋壮骨、驱风止痛之功效。主治腰腿痛、跌打扭伤、风湿性和类风湿关节炎、脊椎炎、肩周炎等症。该药主要通过局部外搽，以发挥其功效。我们对该药进行过豚鼠皮肤刺激性试验及制剂的质量标准研究［1，2］以及抗皮肤损伤和止痛等药效实验［3］。本实验将进一步观察与复方黄毛豆腐柴搽剂抗炎作用相关的免疫增强作用，为该药的疗效提供实验依据。
       1  器材
       1.1  材料
       复方黄毛豆腐柴搽剂由广西壮族自治区人民医院制剂实验室提供, 含生药量为0.75 g/ml, 批号050719；痛肿灵搽剂，广西龙州方略制药有限公司产品，批号061027。75%乙醇消毒液，江西草珊瑚消毒用品公司产品，批号20060908。
       1.2   动物KM种小鼠，18～22 g，雌雄兼用，清洁级动物，由广西医科大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK桂2003-0003。小鼠分性别饲养于空调室内，室温（22±2）℃，湿度（60±5）%，喂标准颗粒饲料，自由饮水和摄食。
       1.3  仪器棱光-722型可见分光光度计，由上海精密科学仪器有限公司生产。
       1.4  统计学分析采用PEMS3.1统计软件分析数据。所得实验数据以±s表示，采用t检验作组间比较差异显著性，P<0.05认为有显著差异，具有统计学意义。
       2  方法与结果
       采用小鼠碳粒廓清法［4,5］。取小鼠48只，雌雄各半，随机分为阴性对照组，阳性对照组（痛肿灵搽剂），复方黄毛豆腐柴搽剂高剂量（2.25 g/ ml）组、低剂量（0.75 g/ ml）组，每组12只。实验前用电剪对小鼠腹部皮肤脱毛，然后用温水擦拭干净。用注射器分别吸取0.3 ml各组药物涂抹于小鼠去毛的皮肤上。阴性对照组给予仅含相同浓度的酒精，阳性对照组外搽痛肿灵搽剂，每天涂药上下午各1次，连续5 d。于末次涂药60 min后，小鼠尾静脉注射20% 印度墨汁0.1 ml／10 g体重，于注入后的2 min和7 min时分别从小鼠眼眶静脉丛用微量吸管取血20 μl，溶于2 ml 0.1%的Na2 CO3 溶液中摇匀，于722分光光度计上650 nm处测定吸光度(O·D值)，按公式:K=(logOD1-logOD2)/(t2-t1)计算吞噬指数K值，进行组间比较t检验,评价药物对单核巨噬细胞吞噬功能。表1  复方黄毛豆腐柴搽剂对单核巨噬细胞吞噬功能的影响（略）
       结果表明，复方黄毛豆腐柴搽剂高低剂量组与阳性药均能显著提高单核巨噬细胞吞噬指数。提示该药具有明显的免疫增强作用。
       3  讨论
       现代医学表明，炎症与免疫反应是一个问题的两个侧面。两者在组织、细胞和分子水平联系密切。许多药物研究也表明，炎症和免疫密切相关。众所周知，炎症是机体对各种致炎因子引起组织损害而产生的一种基本病理过程，也是许多疾病的重要组成部分［6］。由免疫介导的AA大鼠是研究炎症与免疫的常用动物模型，其病理改变与人类的类风湿性关节炎相似，有局部和全身性炎性反应及免疫功能降低或障碍的表现。用此模型，可以系统地观察和分析药物的抗炎免疫作用。为了探讨炎性反应及免疫功能的关系，常用一些颗粒状异物如胶体碳、印度墨汁等静脉注入小鼠或家兔血循环后，迅速被单核吞噬细胞所清除，主要被定居在肝和脾脏的巨噬细胞所吞噬，若将异物量恒定，则从血流中消除的速率可反映单核吞噬细胞的吞噬功能。扶正固本的药物常有免疫增强作用可使K值增加，可观察药物的免疫增强作用。
       
       本文前期研究观察到，复方黄毛豆腐柴搽剂对大鼠有明显的抗炎消肿作用，能减轻或减缓炎性反应，促进炎症区肿胀的吸收和消散。本实验在体外抑菌及皮肤消肿实验的基础上，进一步探讨该药的免疫增强作用。复方黄毛豆腐柴搽剂碳粒廓清试验表明其可提高小鼠单核吞噬细胞的吞噬指数和吞噬活性，提示复方黄毛豆腐柴搽剂对小鼠非特异性免疫功能具有增强作用，能催化、激活机体的免疫系统，提高免疫应答水平，增强免疫功能，从而加强机体的抗炎能力。本研究为临床应用提供了科学依据。
       【参考文献】
         　　［1］潘洪平，王 敏，曹植慧.复方战骨搽剂对皮肤刺激性的实验研究［J］.中国中药杂志，2005，30(8)：625.
       
       ［2］路 玫，潘洪平， 荆树汉.复方战骨搽剂中柚皮素的含量测定［J］.中国药师，2004，7(3)：181.
       
       ［3］潘洪平，荆树汉，陈 英.复方黄毛豆腐柴搽剂的药效学［J］.中国医院药学杂志，26(10)：1196.
       
       ［4］陈 奇．中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1993：757.
       
       ［5］胡 京，黄夏燕，胡继鹰,等.保康中药消毒剂抗炎作用的实验研究［J］.湖北中医学院学报，2006，8(3):13.
       
       ［6］ 唐照亮，宋小鸽，章复清,等.艾灸抗炎免疫作用机制的实验研究［J］.安徽中医学院学报，2003，22（2）：31.