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       【关键词】  茅莓,；,,显微鉴定；,,吸收光谱
       摘要：目的对药用植物茅莓进行形态组织学鉴别，为鉴定该药材提供参考依据。方法采用性状鉴定、显微鉴定及光谱鉴定。结果对茅莓根、茎、叶及粉末的显微特征进行了描述和测定，发现茅莓根和叶柄的横切面细胞内、叶肉组织内含有许多草酸钙簇晶，茎表皮、叶柄表皮及叶的上下表皮细胞均含有非腺毛。经光谱扫描发现其总皂苷提取液经显色后在可见区具有明显的吸收峰。结论形态组织学特征及光谱特征可用于茅莓的鉴定。
       关键词：茅莓 ；  显微鉴定；  吸收光谱
       Pharmacognostic Studies on Rubus parvifolius L.
       REN Lingyan， LI Huizhi*, QIU Zongyin， WANG Jisheng
       （Department of Pharmacology，Chongqing University of  Medical Sciences，Chongqing 400016，China）
       Abstract：ObjectiveTo identify medical plant Rubus parvifolius L. by its tissue characters. MethodsMorphological characters and microstructure of this plant were described and illustrated. UV-VIS absorption of the plant extract was examined.ResultsCalcium oxalate prism were found in cells of transverse sections of roots, etioles and  leaves. Non-glandular hairs were observed on surfaces of stem, petiole and leave. Characteristic peak of its total saponins in the UV-VIS spectrum was identified．ConclusionTissue characters and spectrum character can be taken into account of developing basis for quality standard of this medicinal plant．
       Key words：Rubus parvifolius L.；  Microscopic  identification；  UV-VIS spectrum
   
　　茅莓又名红梅消、薅田、薅秧、天青地白草等，系蔷薇科悬钩子属植物茅莓Rubus parvifolius L.的干燥全草。本品为传统民间草药，落叶小灌木，生于山坡、路旁荒地、灌丛和草丛中，适应性强，资源十分丰富，分布几遍全国［1］。茅莓根、茎、叶均可作药用，具有清热凉血、止血、散结止痛、利尿消肿等功效，其中含有皂苷、糖、酚性物质、鞣质、挥发油、微量元素等多种成分［2］。近代药理研究表明，茅莓水提物对于局灶性脑缺血具有预防治疗作用［3］，但有关茅莓生药学方面的研究还未曾有相关报道。为此，本文对茅莓进行了较为系统的形态组织学与光谱鉴别研究，以便为制定该药材的质量标准及新药开发研究提供参考依据。
       1  材料与仪器
       1.1  材料茅莓药材样品采自重庆市璧山县，经重庆市中药研究院生药栽培室李泉森副研究员鉴定为悬钩子属植物茅莓Rubus parvifolius L.。
       1.2  仪器OLYMPUS-BH2光学显微镜（日本）、UV-2501(PC)S紫外分光光度计（日本岛津公司）、旋涡混合器Vortex (XW-80A)（江苏海门市麒麟医用仪器厂）。实验试剂均为分析纯。
       　　2  方法与结果
       2.1   药材性状本品为灰绿色，地上部分长短不一，枝和叶具小钩刺；枝表面红棕色或枯黄色，稀疏柔毛可见；质坚韧，断面黄白色，中央有白色髓；叶多皱缩破碎，上面黄绿色，下面灰白色，完整叶为奇数羽状复叶，小叶多为3，有时5，顶端小叶菱状圆形至宽倒卵形，侧生小叶较小，边缘浅裂和不整齐粗锯齿，上面稀疏柔毛，下面密生白色绒毛。根长短不等，多扭曲，直径0.4~1.2 cm；上端较粗，呈不规则块状，常附残留茎基；表面灰褐色，有纵皱纹，栓皮有时剥落，露出红棕色内皮；质坚硬，断面淡黄色，有放射状纹理。气微，味微苦涩。
       2.2   组织显微特征
       2.2.1  根（直径约3 mm）横切面木栓层为5~8列呈切向延长的木栓细胞组成，细胞壁厚，呈黄褐色，部分脱落。栓内层为多列扁长方形薄壁细胞，其中部分细胞内含有黄色物质。皮层较窄，由2~4列薄壁细胞组成。韧皮部射线细胞1~4列，外部呈喇叭口。形成层不明显。木质部宽广，导管多单个或2~3个相连，木射线细胞1~3列，径向延长，排列成放射状，木质部除了射线细胞外均木化。中央为初生木质部，木化。薄壁组织中含有众多淀粉粒和草酸钙簇晶。见图1。
       2.2.2  茎（直径约2 mm）横切面表皮为一列排列紧密的细小细胞组成，可见非腺毛，偶见气孔。表皮内侧为2~3列切向延长的厚壁细胞。皮层狭窄，由3~5列薄壁细胞组成。内皮层明显，由一列切向延长的类方形细胞组成，壁较厚。韧皮部外方有纤维束，强烈木化，断续排列成环状。木质部导管较大，木化，多单个散在，偶2~3个相连。髓部宽广，由薄壁细胞组成，靠近木质部的细胞较小。见图2。
       图1  茅莓根横切面详图（略）           
       图2  茅莓茎横切面详图（略）
       2.2.3  总叶柄及小叶柄横切面总叶柄呈圆筒形。表皮为一列小型细胞，可见众多非腺毛，偶见气孔。表皮内侧有2~4列厚角组织细胞，部分细胞内含有棕色物质。皮层薄壁组织含有3个外韧型维管束，其中1个较大，2个相对较小。韧皮部外侧具有维管束鞘纤维，强烈木化，维管束外侧有1列明显的内皮层细胞，排列紧密。薄壁组织中含有草酸钙簇晶。小叶柄上侧中央略凹陷，其余显微组织特征同总叶柄。见图3a,b。
       图3a  茅莓总叶柄横切面简图（略）    
       图3b  茅莓小叶柄横切面简图（略）
       2.2.4  叶主脉横切面叶上、下表皮细胞为一列，类长椭圆形。上表皮可见粗短、直立的单细胞非腺毛，木化。下表皮可见气孔，单细胞非腺毛众多，一种同上表皮非腺毛，粗短、直立、木化，另一种非腺毛细长、弯曲、非木化。栅栏细胞2列，不通过主脉，海绵组织由2~3列薄壁细胞组成，叶肉组织中含有草酸钙簇晶。叶中脉上表面凹陷，下表面凸出，维管束木质部导管木化，放射状排列，韧皮部位于木质部下方，呈新月形，细胞细小，中脉上表皮内侧有3~4列厚角组织细胞，下表皮内侧有1~2列厚角细胞。薄壁组织中含有草酸钙簇晶。见图4。
       2.2.5  叶表面叶上表皮细胞多角形，壁波状弯曲，叶轴处表皮细胞类长方形，无气孔，可见单细胞非腺毛，粗大，呈圆锥状，多直立，部分木化，有的表面有螺纹纹理。叶下表皮细胞比上表皮细胞小，壁略波状弯曲，气孔不等，众多，细小，副卫细胞通常5个；可见两种单细胞非腺毛，一种同上表皮所见的非腺毛，另一种非腺毛细长，常弯曲，非木化。见图5。
       图4  茅莓叶主脉横切面简图（略）        
       图5  茅莓叶表面图（略）
       2.2.6  粉末显微特征根解离组织及粉末显微特征：具缘纹孔导管，长50~200~320 μm，宽16~24~58 μm。淀粉粒众多，单粒或3~5粒组成复粒，直径2~12 μm；椭圆形、圆形、类圆形，脐点明显，呈人字状、叉状或裂缝状。木化薄壁细胞长方形，长40~60 μm，宽8~24 μm，壁较厚，纹孔明显。草酸钙簇晶散在，棱角较钝，直径16~40 μm。纤维众多，大都断裂，木纤维呈长梭形，纹孔明显，直径8~40 μm，壁略厚。韧皮纤维两端较尖，壁厚，直径4~12~20 μm。可见木栓组织碎块，呈黄褐色，细胞壁较厚。见图6。地上部分解离组织及粉末显微特征：单细胞非腺毛众多，一类［非腺毛(1)］呈圆锥形，粗状，多平直，直径8~24  μm，长40~400(1200) μm，壁木化，有的具单螺状裂纹；另一类［非腺毛(2)］细长，弯曲状，直径仅2~4 μm，长可达1~2 mm，甚至更长，非木化。螺纹、环纹导管细小，直径16~20 μm，偶见具缘纹孔导管。可见维管束鞘纤维及木纤维多断裂，维管束鞘纤维两端尖，平直，直径8~16 μm ,壁厚，强烈木化；木纤维一端斜尖，另一端平齐，直径12~43 μm，壁薄，部分木化。偶见叶上下表皮碎块，下表皮可见小形的椭圆形不定等式气孔。草酸钙簇晶散在，棱角较钝，直径10~30 μm。见图7。
       图6  茅莓根粉末图（略）        
       图7  茅莓地上部分粉末图 （略）
       2.3  吸收光谱研究根据茅莓化学成分预试及文献报道［4，5］，茅莓中含有大量皂苷，故采用总皂苷的传统提取方法，取上述粉末1 g，置100 ml圆底烧瓶中，加60 ml 70%乙醇，水浴加热回流提取2 h，过滤，滤液减压浓缩至无醇味，转移至25 ml容量瓶中，加水定容，摇匀。精密吸取10 ml于分液漏斗中用水饱和的正丁醇萃取3次，10 ml/次，静置，弃去水层。合并正丁醇液，将正丁醇溶液水浴减压蒸干，残渣用甲醇溶解，定量转移至10 ml容量瓶中，即得含生药约0.04 g/ml的样品总皂苷溶液。吸取样品总皂苷溶液0.2 ml稀释至6 ml后，按照紫外-可见分光光度法，在波长200~800 nm范围内扫描，结果仅见200 nm附近有末端吸收。再吸取样品总皂苷溶液0.2 ml于具塞试管中，水浴挥干溶剂后各依次加入0.2 ml新配制的5%香草醛冰醋酸溶液、0.8 ml高氯酸，摇匀，于60℃水浴加热15 min，取出，流水冷却中止反应；加入5 ml乙酸乙酯，摇匀，随行试剂空白，于400~800 nm波长范围内扫描，得吸收光谱图，结果在503 nm处有最大吸收峰。见图8。
       图8  茅莓吸收光谱图（λmax=503 nm）（略）
       　　4  小结
       本文系统研究了茅莓根、茎、叶等各器官的组织构造，全草粉末观察。实验结果表明，茅莓的显微特征明显，在根的薄壁组织、叶柄皮层及叶肉组织中含有众多草酸钙簇晶，根、茎横切面形成层均不明显，茎、叶柄横切面内皮层明显，茎表皮、叶柄表皮及叶的上下表皮均有非腺毛。吸收光谱研究发现，茅莓总皂苷提取液经5%香草醛冰醋酸溶液-高氯酸显色后，在可见光区有强吸收（λmax=503 nm）。上述这些特征可作为茅莓显微鉴别和光谱鉴别的依据，在制定其质量标准时可供参考。
       　　参考文献：
       ［1］  中国植物志编辑委员会．中国植物志，第37卷［M］.北京：北京科学出版社，1985：61.
       ［2］  江苏新医学院．中药大辞典［M］.上海：上海科学技术出版社，1997：2699.
       ［3］  郑永玲，胡常林．茅莓提取物治疗局灶性脑缺血的实验研究［J］.中医药研究，2002，18（2）：37.
       基金项目：重庆市重大科技专项课题资助项目［渝科发计字（2004）27号］
       (重庆医科大学药学院，重庆  400016)