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       【关键词】  蓝莓；,,菟丝子；,,益智仁；,,学习记忆
       摘要：目的研究不同组合的蓝莓、菟丝子、益智仁提取物对小鼠学习记忆的影响。方法给小鼠灌胃喂饲不同的提取复合物，给药30 d，Y型电迷宫测定小鼠的学习记忆能力；测定小鼠脑组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione perioxidase, GSH-Px)的活性及丙二醛(malondialdehyde, MDA)的含量。结果蓝莓和菟丝子、益智仁的复合物使小鼠在Y-迷宫训练中达到学会标准的次数显著减少；显著提高脑组织中SOD和GSH-PX的活性，降低了MDA的含量。结论 蓝莓、菟丝子和益智仁的复合物能提高小鼠的学习记忆能力。
       关键词：蓝莓；  菟丝子；  益智仁；  学习记忆
       Effects of Several Traditional Chinese Medicinal Herbal Extracts on Learning and Memory in mice
       DENG Huiling，JIANG Bo，LIU Yuxin， AN Lijia
       （Dalian Light Industry School , Dalian 116023, China; Dalian University of Science and Technology, Dalian 116023, China)
       Abstract：ObjectiveTo investigate the effects of Blueberry, Cuscuta chinensis Lam. and Alpinia oxyphylla Miq. extracts on learning and memory in mice. MethodsThe mice were fed with the three herbal extracts compound for 30 days, learning and memory ability of mice was performed in Y-maze. The  levels of superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-Px) and the content of malondialdehyde (MDA) in brain were determined. ResultsThe compound of three kinds of herbal extracts could increase learning and memory ability of mice, increase the activities of SOD and GSH-PX and decrease level of MDA of brain tissues. ConclusionBlueberry, Cuscuta chinensis Lam. and Alpinia oxyphylla Miq. compounds can improve learning and memory ability of mice.
       Key words：Blueberry ;   Cuscuta chinensis Lam.;  Alpinia oxyphylla Miq.;  Learning and memory
   
　　蓝莓果学名越橘［1］, 富含糖、酶、VC及VA、VE、熊果苷、黄酮类等其他水果中少有的特种成分，具有防止脑神经老化、强心、抗癌、软化血管及增强人体免疫等功能［2］。菟丝子为传统的补益中药，主要含有树脂苷、糖类、黄酮类等化合物, 具有拮抗机体产生和增强免疫功能等作用［3，4］, 可延缓机体衰老［5］。益智是海南四大南药之一，据《中国药典》载, 益智能温脾、暖肾、固气、涩精,其含有粗蛋白、还原糖、维生素B1、维生素B2、维生素C、维生素E及锰、锌、钙等营养成分，益智的主要药用成分为挥发油［6］。现代研究表明益智仁有强心、抗癌、抗过敏、抗衰老、镇静、镇痛等多方面药理作用［7］,益智仁水提取物具有改善学习记忆障碍的作用［8］。我们实验室研究表明以黄酮苷为主要成分的菟丝子提取物不仅能诱导PC12细胞分化、突触延伸，而且还能促进GAP-43的表达［9］；益智仁的提取物对谷氨酸诱导小鼠原代培养的皮层细胞凋亡有保护作用［10］，对过氧化氢引起的PC12细胞损伤有保护作用。为了开发以蓝莓、菟丝子、益智仁为主的保健药品，通过给小鼠灌服不同组合的蓝莓、菟丝子、益智仁复合物，观察其对小鼠学习记忆功能有无促进作用，并对其改善小鼠学习记忆能力的机理进行初步探讨。
       　　1   材料与方法
       1.1  材料
       1.1.1  主要药品及试剂蓝莓榨汁、过滤；菟丝子加8倍水浸泡数小时，至微胀，文火煎两次，每次沸腾后30 min过滤。合并两次提取液浓缩至生药浓度为0.4 g/ml，置4℃冰箱备用。益智仁水提物制备同上，生药浓度为0.15 g/ml。超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、丙二醛(MDA) 试剂盒，购于南京建成生物工程研究所。  
       1.1.2  动物 成年昆明种小鼠，体重20~30 g，由大连医科大学实验动物中心提供。
       1.2  方法将预筛选的小鼠共48只，体重18~23 g，随机分成5组。第1组为生理盐水对照组；第2组为蓝莓组；第3组为蓝莓、菟丝子组；第4组为蓝莓、益智仁组；第5组为蓝莓、菟丝子、益智仁组。各组给药剂量分别为每只每次灌服给药0.5 ml，其中蓝莓汁为200 mg/kg，菟丝子为200 mg/kg，益智仁为75 mg/kg。以等体积生理盐水做对照。1次/d，连续30 d灌胃后进行Y迷宫测试［11,12］。将行为学测试结束的小鼠断头取脑，电子天平准确称重后加入预冷的生理盐水制成10%的脑组织匀浆，离心(3 000 r/ min,10 min)后的上清液作为检测MDA，SOD和GSH-Px活性的样本。检测方法按试剂盒说明书进行。
       1.3  统计学处理数据以±s表示, 应用SPSS10.0 统计分析软件，进行t检验及方差分析，以 P＜0.05作为有显著差异。
       　　2  结果
       2.1  对小鼠学习记忆能力的影响Y-迷宫实验与生理盐水组比较，蓝莓、菟丝子、益智仁组小鼠达到学会标准的次数有显著的降低(P＜0.01)，但对记忆的保持力影响不大。结果见表1。
       表1  蓝莓、菟丝子、益智仁对小鼠学习记忆Y-迷宫训练的影响（略）
       与生理盐水组比较，*P＜0.05,** P＜0.01
       2.2  对小鼠脑组织中MDA，SOD ，GSH-Px 影响蓝莓、菟丝子、益智仁复合组明显升高小鼠脑组织中SOD，GSH-Px的活性(P＜0.01),降低MDA的含量 (P＜0.01)。结果见表2。
       表2  对小鼠脑组织中MDA，SOD，GSH-Px 的生成的影响（略）
       与生理盐水组比较，*P＜0.05, ** P＜0.01
       　　3  讨论
       随着人类物质文明和生活水平的不断提高，人的寿命普遍延长，但脑的学习记忆功能却逐渐衰退。近年来由于中药在益智方面具有多途径、多靶点的特点，在益智健脑的保健药物开发上应用非常广泛。Y-迷宫测量动物学习记忆能力是在生理学、药理学及病理生理学实验中的一种经典方法。蓝莓、菟丝子、益智仁复合组小鼠在Y-迷宫训练中达到学会标准的次数显著减少，说明蓝莓、菟丝子、益智仁复合制剂对小鼠学习能力的提高有明显的促进作用, 但研究结果显示各组小鼠的记忆保持率没有显著变化，说明蓝莓、菟丝子、益智仁复合对小鼠学习能力和记忆保持力的影响并不一致。自由基衰老学说认为衰老过程就是活性氧代谢失调，导致自由基累积的过程，而人体内的自由基主要是氧自由基，它对不饱和共价键有特殊的亲和力，能使脂质过氧化。细胞的生物膜中含有类脂质，若自由基在体内积累过多，过剩的自由基就会使类脂质中的不饱和脂肪酸发生过氧化，从而破坏细胞的膜结构，使膜功能失常，导致细胞死亡。同时脂质过氧化的终产物丙二醛(MDA)亦能使膜蛋白、酶发生交联反应，加重细胞的功能结构损害。另外，自由基还可使细胞内的线粒体、溶酶体膜破坏，导致细胞能源生产中断，使细胞自溶。自由基引发的脂质过氧化反应与衰老及许多疾病的发生发展密切相关，防止氧化脂质对组织细胞的破坏对延缓衰老与抵抗疾病有重要意义［13］。近几年的研究表明,生物体主要通过自由基清除酶系来防止自由基损伤。目前已知生物体内的抗氧化酶主要包括SOD，CAT 和GSH-Px等,它们可分别作用于自由基链锁反应的不同环节,在体内担负着中清除自由基的重要任务。SOD是机体内清除自由基的主要酶, 是机体内重要的抗氧化酶，起清除O・     2-的作用。根据自由基链锁反应的典型特征, 仅单纯提高一种抗氧化酶的活力, 即仅改善一个环节的抗氧化能力并不能完全解决问题。GSH-PX能够直接清除H2O2，从而有效地阻止自由基链锁反应［14］。MDA含量及SOD活力都对机体的抗氧化能力起指示作用，MDA含量低,SOD，GSH-Px活力高,都说明机体抗氧化能力增强［15］。实验结果表明，蓝莓、菟丝子、益智仁复合制剂能显著降低小鼠脑组织中MDA 的含量,能显著提高小鼠脑组织中SOD，GSH-Px的活力。综合本文实验结果,可以肯定蓝莓、菟丝子、益智仁的复合制剂能提高小鼠的学习能力，其作用机制可能与提高自由基链锁反应多个环节上抗氧化酶的活力，提高小鼠的抗氧化性有关，这为我们以后开发以蓝莓、菟丝子、益智仁为主的促进学习记忆的保健药品提供了有力依据。
       　　参考文献：
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       ［9］   Liu Jian-hui ．Effect of Cuscuta chinensis glycoside on the neuronal difterentiation of rat pheochmocytoma PC12 cellsIntJ［J］．Devl Neuroscience，2001，21：277.
       ［10］  Xinyu Yu． Neuroprotective effct of Alpinia oxyphylla Miq.fruits against flutamate-induced apoptosis in cortical neurons［J］．Toxicology Letters，2003，144：205.
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       (大连市轻工业学校，辽宁 大连  116023； 大连理工大学，辽宁 大连  116023)