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       【关键词】  生姜油,；,,抗炎；,,迟发性超敏反应,；,,小鼠
       摘要：目的观察生姜油抗炎、抗超敏反应作用。方法用二甲苯引起小鼠耳肿胀，弗氏完全佐剂引起小鼠足肿胀模型来观察生姜油对急性炎症的作用。用2，4二硝基氯苯（DNCB）诱发小鼠迟发性超敏反应来观察生姜油对超敏反应的作用。 结果生姜油抑制二甲苯引起的小鼠耳肿胀，降低弗氏完全佐剂引起小鼠足肿胀和血清中NO水平的升高。对DNCB引起的小鼠迟发性皮肤超敏反应有明显抑制作用。 结论 生姜油有明显的抗炎和抑制超敏反应的作用。
       关键词：生姜油 ；  抗炎；  迟发性超敏反应 ；  小鼠
       Effect  of  Ginger  Oil against Inflammation and Delayed Type Hypersensitivity
       ZHU Lu, WANG GuiLin, YAO Guanping, DENG Yunfan, ZHOU Qingyang
       (College of Medical Science,Yangtze University, Jingzhou 434000,China;  Anhui College of  Chinese Traditional Medicine,Wuhu  241000,China)
       Abstract：ObjectiveTo study the influence of Ginger oil against inflammation and delayed type hypersensitivity.MethodsEar edema induced by dimethylbenzene, paw swelling induced by Freund"s complete adjuvant in mice were used to study the anti-inflammatory effects. Delayed type hypersensitivity induced by 2,4-nitrylchlorobenzene in mice were used to study the antiallergic effect. ResultsGinger oil significantly suppressed xylene-induced ear edema, reduced Freund"s complete adjuvant-induced paw swelling and  the level of NO elevation in serum ,and also markedly inhibited delayed type hypersensitivity induced by 2,4nitrylchlorobenzene in mice. ConclusionGinger oil has some anti-inflammatory and antiallergic effects.
       Key words：Ginger Oil;  Antiinflammatory effect;    Delayed type hypersensitivity;  Mice
   
　　生姜是姜科植物姜（Zingiber officinale Roscoe)的根茎,是一种广泛使用的药食两用植物，具有解表散寒、温中止呕等功效。现代医学工作者通过对姜的化学成分、生物活性和治疗应用的研究，认为姜的功效与它的三大主要成分有关，即挥发油、姜辣素和二苯基庚烷类［1］。现代药理学研究证明生姜具有抗炎、镇吐、抗氧化、抗菌等功效［2］。本文研究了生姜油对某些炎症模型和迟发性超敏反应的作用。
       　　1  材料
       1.1  动物 昆明种小鼠，体重18～22 g，♀♂兼用，由湖北省实验动物研究中心提供。合格证号：SCXK（鄂）2003～0005。
       1.2  药物 生姜油，由芜湖杉杉生物技术有限公司提供，采用超临界二氧化碳萃取，为棕红色油状液体。生姜油相对密度（20/200C）0.925，折光系数（200C）1.499。临用前，按高低剂量组的用量加入吐温80和蒸馏水，碾磨成乳剂使用。
       1.3   主要试剂 二甲苯，湖北沙市化工试剂厂生产，批号：20000304。弗氏完全佐剂，SIGMA公司产品，批号：90078102  。布洛芬，湖北金龙福药业有限公司，批号 ：20050202。醋酸地塞米松片，浙江仙琚制药股份有限公司，批号050450。2.4-二硝基氯苯（DNCB），北京市兴津化工厂，批号：20020402。NO 试剂盒，南京建成生物工程研究所，批号：20051111。
       1.4  仪器 电子天平(AB304S),德国塞多利斯公司产品；酶标仪(KHB ST360)，上海智华医学精密仪器有限公司；千分尺，上海量具刃器厂产品。
       　　2  方法
       2.1   对二甲苯诱发小鼠耳肿胀的影响［3］ 小鼠40只，随机分成4组。即模型对照组、生姜油高低剂量组（1.5，0.75 ml・kg1）、阳性药（布洛芬0.08 g・kg1）对照组, 每组10只。各组小鼠按 20 ml/kg体重ig给药，1次/d，连续3 d，其中模型对照组给等容积蒸馏水。末次给药后1 h在小鼠的右耳正反两面涂0.02 ml二甲苯致炎，左耳不做处理，4 h后颈椎脱臼处死小鼠，剪下双耳，用8 mm的打孔器分别在左、右耳同一部位打下圆耳片，电子天平称重。用左、右耳片重量差值作为肿胀度。并计算肿胀抑制率。 结果见表1。
       2.2  对佐剂性炎症小鼠足肿胀的影响［4］雄性小鼠50只，随机分成5组，即正常组、模型对照组、生姜油高低剂量组（1.0、0.5 ml・kg1）、阳性药（布洛芬0.08 g・kg1）对照组, 每组10只。除正常组外，其他4组小鼠右后足跖皮下注射弗氏完全佐剂0.1 ml致炎。致炎1 h后开始按20 ml/kg体重ig给药，1次/d，连续4 d，正常组和模型对照组给等容积蒸馏水。于致炎24 h和48 h分别用千分尺测定左右后足跖厚度，并计算肿胀度（左右后足趾厚度差值，mm）。结果见表2。
       2.3  对佐剂性炎症小鼠血清NO的影响   分组及给药同1.4.2项，末次给药后1 h，小鼠摘眼球取血，37℃水浴加热1 h后，以3500 r/min离心10 min分离血清，按试剂盒说明书操作，用酶标仪在550 nm波长下测定吸光度A，按说明书公式计算NO含量。 结果见表3。
       2.4  对小鼠迟发性超敏反应的影响［5］小鼠40只，随机分成4组，即模型对照组、生姜油高低剂量组（1.5，0.75 ml・kg1）、阳性药（地塞米松0.02 g・kg1）对照组, 每组10只。小鼠腹部皮肤去毛约3 cm2区域，然后用微量进样器取7% DNCB 0.1 ml，均匀滴加于脱毛区致敏。于致敏当天开始按 20ml/kg体重ig给药，1次/d，连续7 d。末次给药30 min后，用1% DNCB涂于每鼠右耳前后两面。24 h后称体重，颈椎脱臼处死小鼠，分别剪下双耳，用8 mm打孔器在相同部位打下圆耳片，电子天平称重，以左、右耳片重量差值作为肿胀度。取出胸腺和脾脏，电子天平称重，计算胸腺指数和脾脏指数。结果见表4。
       2.5  统计学处理数据统计采用±s表示 ，组间比较采用t检验。 所有统计均在SPSS12.0统计软件上进行。
       　　3  结果
       3.1   对二甲苯诱发小鼠耳肿胀的影响  由表1可见，生姜油1.5，0.75 ml・kg1组肿胀度与对照组比较，差异具有非常显著性意义（P＜0.01）,表明生姜油对二甲苯诱发的小鼠耳肿胀有抑制作用。
 
　　表1  对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响（略）
       与模型对照组比较，**P＜0.01，与模型对照组比较，*P＜0.05；n=10
       3.2  对佐剂性炎症小鼠足肿胀的影响 由表2可见，致炎24 h生姜油1，0. 5 ml・kg1组肿胀度与模型组比较，差异具有非常显著性意义（P＜0.01）, 致炎48 h生姜油1，0. 5 ml・kg1组肿胀度与模型组比较，差异具有显著性意义（P＜0.05），表明生姜油对佐剂性炎症小鼠的足肿胀有抑制作用。
       表2  对佐剂性炎症小鼠足肿胀的影响（略）
       与正常组比较，▲▲P＜0.01，与模型对照组比较；*P＜0.05，**P＜0.01；n=10
       3.3  对佐剂性炎症小鼠血清NO的影响  由表3可见，生姜油1 ml・kg1组肿胀度与模型组比较，差异具有显著性意义（P＜0.05），表明生姜1 ml・kg1组显著的减少了佐剂性炎症小鼠血清NO的含量。生姜0. 5 ml・kg1组虽然也减少了NO的含量，但与模型组比较，差异无显著性意义。
       表3  对佐剂性炎症小鼠血清NO的影响（略）
       与正常对照组比较，▲▲P＜0.01，与模型对照组比较，*P＜0.05；n=10
       3.4  对小鼠迟发性超敏反应的影响   由表4可见， 生姜油1.5，0.75 ml・kg1能减轻DNCB致小鼠耳肿胀度，其中生姜油1.5 ml・kg1与对照组比较，差异有显著性意义（P＜0.05）；生姜油1.5，0.75 ml・kg1使DNCB致迟发性超敏反应小鼠的胸腺和脾脏指数明显降低，结果表明生姜油能抑制小鼠迟发性超敏反应。  
       表4  对DNCB致小鼠迟发性超敏反应的影响（略）
       与模型对照组比较，**P＜0.01，与模型对照组比较，*P＜0.05；n=10
       　　4  讨论
       一氧化氮(nitricoxide,NO)是由L2精氨酸(L2arginine,L2Arg)胍基氮经NO合酶(NOsynthase,NOS)的催化发生氧化而形成。研究表明，急、慢性炎症的发生均与NO有关［6，7］。它不仅参与炎症性关节疾病的发病过程，还参与炎症关节损伤。小鼠足趾皮内注射弗氏完全佐剂可诱导产生明显关节炎症［4］，与公认的类风湿性关节炎动物模型（大鼠佐剂性关节炎）在组织学和形态学上有相似特征［8］。本实验采用小鼠佐剂性炎症模型来观察生姜油对弗氏完全佐剂诱导的关节炎症的影响，结果生姜油可明显抑制足肿胀，对血清中NO升高有一定抑制作用，表明生姜油具有抗炎作用。迟发性超敏反应是一种依赖T细胞免疫反应模型，其主要特征是致敏机体在抗原攻击部位出现迟发型炎症反应，又称接触性过敏反应［9］。 DNCB是一种半抗原，将其稀释后涂抹腹壁皮肤，与皮肤蛋白结合成完全抗原，由此刺激T淋巴细胞增殖成致敏淋巴细胞，7 d后再将其涂抹于耳部，使局部产生迟发型变态反应。本实验发现高低剂量的生姜油均明显降低胸腺和脾脏指数，减轻耳肿胀度，表明生姜油对迟发性超敏反应有抑制作用。
       　　参考文献：
       ［1］  卢传坚，欧 明，王宁生.姜的化学成分分析研究概述［J］.中药新药与临床药理，2003，14（3）：215.
       ［2］   朱路，王贵林. 姜的药理作用研究进展［J］.长江大学学报（自科版），2006 ，3（1）：321.
       ［3］  郭淑芳，杨  彤. 用鼠耳肿胀法研究抗炎药实验方法的改进［J］. 实验动物科学与管理 ，2003 ，20（3）：42.
       ［4］  Chillingworth NL, Donaldson LF. Characterisation of a Freund"s complete adjuvant-induced model of chronic arthritis in mice［J］. J Neurosci Methods，2003，128(1，2):45.
       ［5］  李继洪,杨  欣,张志蓉，等. 咳喘清颗粒抗炎、免疫、抑菌作用研究［J］.中药药理与临床，2005，21(5)：49.
       ［6］  IalentiA,IanaroA,MoncadaS,et al . Modulation of acute inflammation by endogenous nitricoxide［J］.EurJPharmacol , 1992,211:177.
       ［7］   IuvoneT,CarnuccioR,Di Rosa M. Modulation of granuloma formation by endogenous nitricoxide［J］.EurJPharmacol , 1994, 265(1 2):89.
       ［8］  Larson AA, Brown DR, el-Atrash S et al. Pain threshold changes in adjuvant-induced inflammation: a possible model of chronic pain in the mouse［J］. Pharmacol Biochem Behav，1986，24(1):49.
       ［9］  徐叔云，卞如濂，陈  修. 药理实验方法学，第3版［M］.北京：人民卫生出版社，2003： 1429.
       （长江大学医学院，湖北 荆州  434000；安徽中医药高等专科学校，安徽 芜湖  241000）