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       【关键词】  小叶锦鸡儿；,,,石油醚,；,,黄葵内酯；,,二十四烷酸；,,β
       摘要：目的对小叶锦鸡儿石油醚提取物进行化学成分研究。方法用溶剂法提取，硅胶柱层析法分离得到化合物，通过理化鉴别和光谱法分析化学结构。结果石油醚提取物中分离得到3个单体化合物并确定了其结构。结论 化合物（1）（2）（3）分别为黄葵内酯，二十四烷酸，β谷甾醇。化合物（1）首次在锦鸡儿属植物中分离得到，化合物（2）（3）首次在小叶锦鸡儿中分离得到。
       关键词：小叶锦鸡儿；   石油醚 ；  黄葵内酯；  二十四烷酸；  β谷甾醇
       Study on Chemical Constituents of Petroleum Ether Extract Fraction from Caragana microphylla Lam.
       PIAO Huishun,  JIN Guangzhu
       （College of Pharmacy，Yanbian University，Yanji,Jilin 133000,China）
       Abstract：ObjectiveTo study the chemical constituents of the petroleum ether extract fraction from Caragana microphylla Lam. MethodsThe petroleum ether extract fraction of Caragana microphylla Lam.was extracted by solvent extraction and isolated by the gel column chromatography. Physiochemical properties and spectrum analysis were used to identify the chemical ingredients and elucidate their structure. ResultsThree compounds were isolated from the petroleum ether extract fraction of Caragana microphylla Lam.ConclusionThey were identified as ambrettolide(CJM1)，tetracosanoic acid(CJM2) and β-sitosterol (CJM3), respectively. CJM1 was firstly isolated from Caragana Farb. CJM2 and CJM3 were firstly isolated from Caragana microphylla Lam.
       Key words：Caragana microphylla Lam.;   Petroleum ether;  Ambrettolide;  Tetracosanoic acid;  βsitosterol
   
　　小叶锦鸡儿为豆科锦鸡儿属植物，学名为 Caragana  microphylla  Lam.生于山坡、岸边草地、沙丘地与干燥坡地，广泛分布于东北、华北和内蒙古、山西、陕西、甘肃。吉林省的长白山地区分布较广,尤其是三合、安图、和龙、汪清、珲春等地。锦鸡儿属世界上约有100余种，中国有62种［1］，也可以栽培。朝医称小叶锦鸡儿为骨草（治疗骨髓炎的草药），是民间常用药材。味苦、性寒，具有祛风湿、活血、镇静、强心、利尿、消炎等功效［2］。朝鲜族民间用于治疗骨髓炎、风湿性关节炎、高血压、咽喉炎、妇科疾病等。中华本草中记载，小叶锦鸡儿具有“清热利咽的功能，主治咽喉肿痛” ［3］。多年来对小叶锦鸡儿的研究多集中在植物生态学如防风固沙［4］，改善土壤肥力［5］等方面。近来研究表明，该属植物除具有抗炎作用［6］，降压作用［7］，免疫抑制作用［6］，对血液流变学［8］，呼吸系统［9］均有影响外，还具有较强的抗癌［10］及抗病毒活性［11］，是具有开发价值的民族药材。通过本实验初步研究了小叶锦鸡儿石油醚萃取部分的化学成分，为深入开发小叶锦鸡儿的药用价值提供了依据。
       1  材料与仪器
       1.1  药材 小叶锦鸡儿采集于珲春蜜江，由延边大学药学院生药教研室刘永镇教授鉴定为 Caragana microphylla Lam .的根。
       1.2  仪器   旋转式蒸发仪 RE52（上海青浦泸西仪器厂），HBB95型循环水式多用真空泵（郑州长城科贸有限公司），恒温水浴箱 HHW（金坛市恒丰仪器厂），YLA2000电热鼓风干燥箱（金坛市恒丰仪器厂），X5型精密显微熔点测定仪（北京产），UV5型紫外观测灯（北京智源通生物技术研究所），电子天平 MP200B，质谱用 HP-1100MSD型质谱仪，核磁共振一维谱用 AV300型核磁共振仪(瑞士产)，气-质谱联用仪 QP2010（日本岛津）。
       1.3   实验用试剂与材料  薄层色谱用硅胶 G（中国青岛海洋化工有限公司），95%乙醇（边城酒业有限公司） ，其他实验用试剂均为分析纯。
       　　2  方法与结果
       2.1   提取与分离取小叶锦鸡儿干燥根的粗粉3 kg，用95%食用乙醇加热回流提取3次，提取液趁热过滤，滤液合并，减压回收乙醇并浓缩得浸膏（367.4 g）。加适量蒸馏水成混悬液，依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取。减压回收溶剂，得石油醚萃取物44.36 g，醋酸乙酯萃取物12.54 g，正丁醇萃取物19.00 g。取石油醚部分（20 g），经硅胶柱层析，用石油醚-醋酸乙酯梯度洗脱，100∶5洗脱条件下，收集23～26流份得到黄色油状液体（化合物1）；100∶10洗脱条件下，收集的64，65，66号流份，合并，减压回收溶剂后，用甲醇重结晶，得白色颗粒状结晶（化合物2）；100∶20洗脱条件下，收集的69，70，71，72，73，74号流份，合并，减压回收溶剂后，用丙酮重结晶，得白色针状结晶（化合物3）。每250 ml为一流份。
       2.2  结构鉴定化合物（1）：黄色油状液体，嗅之有特殊的植物清香，无苦、甜味。在紫外灯（254 nm）下呈橘黄色荧光。用气-质联仪确定其分子量为252。1HNMR（CDCl3，300MHz）δ（ppm）：5.39（2H,宽S）,4.23（2H,ddd）,2.32（2H,t）,2.06（4H,m）,1.62（2H，brs）,1.32（16H，宽S）。13CNMR δ(CDCl3,75MHz)（ppm）：172.71（ppm）,130.14（CH=CH）128.20(CH= CH),62.06 （CH2O）,14.22（CH2）,22.54，24.81，25.51，25.60，27.16，29.08，29.14，29.31，29.58，31.50，33.98，34.14（12个-CH2- ）。DEPT测定结果中看到该化合物具有1个季碳、2个双键碳、1个与氧连接的碳及12个亚甲基碳。综合以上信息和该化合物的核磁共振数据与文献［12］一致，因此可推得此该化合物（1）的分子式为 C16H28O2，分子结构为：
       黄葵内酯 (Ambrettolide)化合物（2）：白色颗粒状结晶（甲醇）， mp：84℃～85℃。1H-NMR（CDCl3，300MHz）δ（ppm）：0.87（3H,t,J=6.23Hz,CH3）,1.32［m,40H,(CH2)20］,1.63（2H,t,β-CH2）,2.37（2H,t,αCH2, J=7.69 Hz）13CNMR（CDCl3，75MHz） δ（ppm）：14.07（C24）,22.66（C23）,31.90（C22）,24.69（C3）,33.64（C2）,180.02（C1）。该化合物的核磁共振数据与文献［13］完全一致，因此可推得该化合物分子式 C24H48O2 ，分子结构：
       二十四烷酸(tetracosanoic acid)化合物（3）：无色针状结晶（丙酮），此结晶在冷甲醇中不溶，可溶于氯仿和热甲醇。 mp：137.5℃～139.0℃。LibermannBurchard，Molish反应均呈阳性，在紫外灯（254 nm）下无荧光斑点，喷5%硫酸105℃加热呈橙红色斑点。 根据1H-NMR可知有2个单峰的甲基［（δH 0.69，3H，S），（δH 1.03，3H，S）］，3个双峰的甲基［（δH 0.92，3H，d，J=6.8Hz），（δH 0.81，3H，d，J=7.0Hz），（δH  0.84，3H，t）］,一个不饱和的CH（δH  5.36，1H，dd，J=5.0,2.0Hz）,一个不饱和的含氧碳上的氢（δH 3.53，1H，dddd，J=8.5,8.5,4.5,4.5Hz）。由13C-NMR可知共有29个碳原子，一个双键（δC 140.75, 121.74 ），一个连氧的饱和碳原子（δC 71.81）。1H-NMR（CDCl3，300MHz）δ（ppm）：5.36（1H,dd,J=5.0,2.0Hz）3.52（1H,dddd,J=8.5,8.5,4.5,4.5Hz）,2.29（1H,ddd,J=13.0,4.5,2.0Hz）, 2.01（1H,dt,J=12.5,3.7Hz）,1.85（1H, m）,1.55（2H,dd）,1.54（1H,m）,1.51（1H,m）, 1.50（1H,m）, 1.27（1H,m）,1.16（1H,m）,1.05（1H,m）,1.03（1H,m）,0.95（1H,m）,0.93（3H,d）,0.89（1H,m）,0.84（3H,d）,0.69（3H,s）。13C-NMR(CDCl3，75MHz)δ（ppm）: 140.75(s,C-5), 121.71(d,C6), 71.81(d,C-3), 56.77(d,C14),56.06(d,C17),50.14（d,C9）,45.84（d,C4）,42.31(s,C13)39.78(t,C12),37.25(t,C24),36.50(s,C10),36.13(q,C-1),33.95(t,C22),31.91(t,C8),31.67(t,C7),29.68(d,C2),29.17(d,C16),28.23(t,C11),26.10(t,C15),24.29(t,C23),23.07(t,C27),21.08(t,C28),19.80(q,C19),19.38(q,C21),19.03(q,C25),18.77(q,C29),11.97(q,C26),11.85(q,C18)。综合以上信息可以初步推测该化合物为29个碳甾族化合物。分子式 C29H56O，该化合物的核磁共振数据与文献［14］完全一致，因此可推得此化合物（3）的结构为：
       β谷甾醇（βsitosterol ）
       　3  讨论
       小叶锦鸡儿乙醇提取物石油醚萃取部分经硅胶柱层析，分离得到的三个单体化合物，通过理化性质、熔点测定、波谱解析、文献检索等方法确定了化合物（1）（2）（3）分别为：黄葵内酯 (ambrettolide)、二十四烷酸 (tetracosanoic acid)、β谷甾醇(βsitosterol)。化合物（1）首次锦鸡儿属 (Caragana Farb. )植物中分离得到，化合物（2）和化合物（3）首次从小叶锦鸡儿（Caragana microphylla Lam .）中分离得到。                           
       本课题的研究，使我们对小叶锦鸡儿的化学成分有了较为全面的认识，为进一步开发利用锦鸡儿属植物提供了可靠依据。
       　　参考文献：
       ［1］  刘红霞，林文翰，杨俊山.锦鸡儿属植物化学成分及药理作用研究进展［J］.中国药学杂志，2004，39（5）：327.
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       （延边大学药学院，吉林 延吉  133000）