文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【关键词】  银杏叶提取物；,,肠系膜；,,微循环；,,槲皮素
       摘要：目的观察银杏叶提取物(Ginkgo biloba extracts EGB)对家兔动脉血压、心率、心电及其肠系膜微循环的影响。方法采用微循环研究技术，随机分为正常对照组、微循环障碍组(NE)、微循环障碍改善组(生理盐水组、EGB低浓度组和EGB高浓度组)，观察各组给药前，给药后15、30min对毛细血管、微静脉、微动脉的管径、血流速度和血流量变化及动脉血压、心率、心电图的变化。结果EGB各组给药后均表现出家兔肠系膜毛细血管、微动脉和微静脉血管扩张，血液流速加快，血流量增加(P<0.05或P<0.01)，EGB对家兔动脉血压、心率、心电没有显著性影响(P>0.05)。结论EGB能使肠系膜毛细血管、微动脉和微静脉血管扩张、血液流速加快、血流量增加而对家兔动脉血压、心率、心电无显著性影响。
       关键词：银杏叶提取物；  肠系膜；  微循环；  槲皮素
       Effects of Ginkgo biloba Extracts on Blood Circulation in Rabbits
       ZHANG Caizhu，YANG Runsheng，PAN Shengwu，SUN Yanyan, YANG Shengchang*
       ( Department of Biology of Guangxi Normal University, Guilin 541004, China )
       Abstract：ObjectiveTo observe the effects of Ginkgo biloba extracts (EGB) on blood pressure, heart rate, electrocardia and mesenteric microcirculation in rabbits. MethodsThe changes of indexes on blood presure, heart rate, electrocardia and microcirculation parameters in rabbits were observed by the technology of microcirculation research. ResultsCompared with the NE group, Ginkgo biloba extracts could dilate the capillary, arteriole and venule, and increase blood flow velocity and blood perfusion in rabbits (P<0.05 or P<0.01). Ginkgo biloba extracts had no significant effects on blood pressure, heart rate and electrocardia in rabbits (P>0.05). ConclusionWe can see that Ginkgo biloba extracts can dilate the capillary, arteriole and venule, and increase blood flow velocity and blood perfusion. But it has no obvious effects on blood pressure, heart rate and electrocardia in rabbits.
       Key words：Ginkgo biloba extracts;  Mesentery;  Microcirculation;  Quercetin
    
　　近年来，国内外有关学者在银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract EGB)的研究方面，取得了一定的成果，在临床上应用于治疗心脑血管等疾病也取得了较好的疗效［1］。EGB成分复杂，但主要为黄酮类（如槲皮素）、萜类等20多种化合物，25种微量元素和17种氨基酸等有效成分［2］。目前对其化学成分的研究较多，而对血液循环的影响研究报道较少。本文比较全面系统的观察了EGB对家兔动脉血压、心率、心电及肠系膜毛细血管、微动脉和微静脉血管管径、血液流速、血流量等方面的影响，为进一步开发利用EGB提供了较好的理论和实践依据。
       　1  材料
       1.1  药品和试剂EGB (银杏黄酮≥24%，内酯≥6%）（广西师范大学天然植物制品厂）用生理盐水分别配成生药含量为2.5 mg/ml和5.0 mg/ml两种浓度的溶液。重酒石去甲肾上腺素(norepinephrine NE) (上海禾丰制药有限公司），临时用生理盐配制成0.01％的溶液。肝素钠(上海化学试剂厂），临时用生理盐水配制成500单位/ml的肝素溶液。
       1.2  动物及分组实验选用健康成年大耳兔，雌雄不限，体重(2.1±0.2)kg。随机分为5组：正常对照组、微循环障碍组（NE）、微循环障碍改善组(包括生理盐水组、EGB低浓度组和EGB高浓度组) ［3］。每组动物各6只。
       　　2  方法
       2.1  家兔动脉血压、心率、心电图和微循环各参数的测定实验时以20％氨基甲酸乙酯(0.5 ml/100 g BW)，耳缘静脉注射麻醉，固定，分离出左侧颈总动脉，行动脉插管术［4］，管内注入肝素溶液抗凝，连接血压传感器和BL-2000多通道生物机能实验系统(成都泰盟科技有限公司研制)，记录动脉血压(blood pressure BP)。以银针插于动物四肢皮下部，同步记录心电图(electrocardiogram，ECG）和心率(heart rate，HR)。腹部剪毛后，在右侧腹直肌旁做长3 cm的纵行切口，钝性分离肌肉，轻拉出盲肠上4～5 cm段回肠及肠袢，置于恒温灌流盒内，持续灌流Locke氏液(NaCl 9.2 g/L，KCl 0.42 g/L，CaCl2 0.23 g/L，NaHCO3 0.67 g/L，葡萄糖(glucose)1.0 g/L，95%O2+5%CO2，pH 7.35)，浴槽温度保持在(37.5±0.5)℃，应用BI-2000微循环图像分析系统(成都泰盟科技有限公司研制)观察和记录，术后稳定10 min再进行实验。在血压、心率和心电图同步监测的情况下，先记录并测量正常状态下肠系膜毛细血管、微静脉、微动脉的管径、血流速度和血流量等参数，然后滴注0.01%NE 50 μl造成局部肠系膜微循环障碍，记录结果，5 min后分别耳缘静脉注射NS，含量为2.5 mg/ml和5.0 mg/ml低、高两种浓度的EGB溶液各0.1 ml/100 g BW，两药静注间隔30 min。观察各组给药前后15，30 min对毛细血管、微动脉、微静脉管径、血流速度和血流量的变化及动脉血压、心率、心电图的变化，并立即测量和记录。
       2.2  统计学分析实验中各指标均用±s表示。应用SPSS11.0统计软件，采用ｔ检验法进行统计学的分析和处理。
       　　3  结果
       3.1  EGB对家兔肠系膜微循环的影响
       3.1.1  对毛细血管管径、血液流速和血流量的影响从表1可见，在正常对照组的基础上，局部滴注0.01%NE 50 μl造成肠系膜微循环障碍，与正常对照组比较，结果为毛细血管管径缩小(P＜0.01)，血液流速减慢(P＜0.01）、血流量下降(P＜0.01）。EGB低、高浓度组与NE障碍组相比，毛细血管管径、血流速度、血流量均有非常显著性差异(P＜0.01)。而相同剂量的NS组，无显著性差异(P＞0.05)。
       表1  EGB对家兔肠系膜毛细血管管径、血液流速、血流量的影响（略）
       与正常对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01;与NE组比较，*P<0.05，**P<0.01
       3.1.2  对微动脉管径、血液流速和血流量的影响从表2可见，结果与毛细血管的类似。EGB低、高浓度组与NE障碍组相比，微动脉管径在低浓度在30 min时有显著性差异(P＜0.05)，低浓度15 min，高浓度15，30 min时有非常显著性差异(P＜0.01)；微动脉血液流速在低浓度15 min，高浓度30 min时有显著性差异(P＜0.05)，在低浓度30 min，高浓度15 min时有非常显著性差异(P＜0.01)；微动脉血流量均有非常显著性差异(P＜0.01)。而相同剂量的NS组，无显著性差异(P＞0.05)。
       表2  EGB对家兔肠系膜微动脉管径、血液流速、血流量的影响（略）
       与正常对照组比较， △P<0.05，△△P<0.01;与NE组比较，*P<0.05， **P<0.01
       3.1.3  对微静脉管径、血液流速和血流量的影响从表3可见，结果也与上述两项相似。EGB低、高浓度组与NE障碍组相比，微静脉管径在高浓度15 min时有显著性差异(P＜0.05),在低浓度15，30 min，高浓度30 min时有非常显著性差异(P＜0.01)；微静脉血液流速在低浓度15 min，高浓度30 min时有显著性差异(P＜0.05)，在低浓度30 min，高浓度15 min时有非常显著性差异(P＜0.01)；微静脉血流量均有非常显著性差异(P＜0.01)。而相同剂量的NS组，无显著性差异(P＞0.05)。
       表3  EGB对家兔肠系膜微静脉管径、血液流速、血流量的影响（略）
       与正常对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01;与NE组比较，*P<0.05，**P<0.01
       3.2  EGB对家兔动脉血压、心率、心电图的影响从表4~5可见，局部滴注0.01%NE 50 μl造成肠系膜微循环障碍时，结果为动脉血压升高(P＜0.05)，心率下降(P＜0.01)。EGB低、高浓度组与NE障碍组相比，平均血压稍有降低，但无显著性差异(P＞0.05)；心率也稍有增高，但与NE障碍组相比无显著性差异(P＞0.05)；心电各波段也略有变化，但无显著差异(P＞0.05)。上述实验结果表明：在实验前局部滴注0.01%NE 50 μl造成肠系膜微循环障碍时，对毛细血管、微动脉、微静脉的血管管径、血流速度、血流量均有非常显著性差异(P＜0.01)。用NE造成肠系膜微循环障碍，静注NS后各项观察指标没有显著性差异(P＞0.05)。两种不同浓度的EGB对毛细血管、微动脉、微静脉的血流量均有非常显著性差异(P＜0.01)。两种不同浓度的EGB对毛细血管、微动脉、微静脉的血管管径、血流速度均有显著和非常显著性差异，但给药时间不同，其P值也有所不同。其中低浓度的EGB在给药15 min时对微动脉、微静脉的血流速度；30 min时对微动脉的管径；高浓度的EGB在给药15 min时对微静脉的管径；30 min时对微动脉和微静脉的血流速度表现为显著性差异(P＜0.05)，其它观察项目均为非常显著性差异(P＜0.01)。局部滴注0.01%NE50μl使动脉血压升高(P＜0.05)，心率降低(P＜0.01)。两种浓度的EGB对动脉血压和心率无显著性影响(P＞0.05)。NE和EGB对心电图各波段均无显著性影响(P＞0.05)。
       表4  EGB对家兔血压、心率的影响（略）
       与正常对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01;与NE组比较，*P<0.05，**P<0.01;1 mmHg≈0.133 kPa
       表5  EGB对家兔心电图各波段的影响（略）
       与正常对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01;与NE组比较，*P<0.05，**P<0.01
       　　4  讨论
       据研究表明，毛细血管、微动脉、微静脉的管径、血流速度和血流量等指标是决定微循环功能状态的重要因素［5］。本实验结果表明，EGB能使家兔肠系膜毛细血管、微动脉和微静脉血管扩张，血液流速加快，血流量增加，与NE组比较有显著性和非常显著性差异，提示EGB具有明显改善由NE所引起的肠系膜微循环障碍，改善微循环的功能。李勇敏实验表明，用银杏舒通液能增加狗的心输出量、脑血流量，降低脑血管阻力、外周血管阻力，而对狗的心率、血压及左心室压力无影响；对离体兔基底动脉实验表明，对动脉血管有较好的舒张作用［6］。EGB可以明显降低麻醉狗脑血管阻力，增加脑和后肢的血流量，而血压和心率则未见显著性改变，表明对脑部和后肢血液循环有明显的改善作用［7，8］。本实验研究结果与上述结果基本一致。用银杏叶总黄酮(total flavonoids in Ginkgo leaves TFG)注射到大鼠腹腔发现，对收缩血管物质内皮素(endothelin ET)有明显的抑制作用，说明FG可能是通过抑制ET而使血管扩张的［9］。又有研究揭示，血管的舒张可能与血管内皮细胞有密切关系，一些因素可以通过影响血管内皮细胞释放内皮细胞血管舒张因子而使血管扩张［10］。EGB的化学成份复杂，作用机制不详。据推测，对家兔肠系膜微循环的影响可能有两种主要原因，一是EGB中的FG抑制了ET，使血管扩张，血流速度加快；二是EGB中的槲皮素(quercetin)能促进血管内皮细胞释放内皮细胞血管舒张因子，加速Ca2+ 的活动，促进NO的合成和释放，从而导致血管舒张。EGB对家兔动脉血压、心率、心电图的影响没有显著性差异，其原因可能是EGB不能与心肌细胞中的受体结合等因素有关。
       　　参考文献：
       ［1］  陈维洲，张培智.银杏叶提取物的药理和临床研究进展(下)［J］.中国新药与临床杂志，1999,18(6):393.
       ［2］  姜国芳，谢宗波，乐长高.银杏叶黄酮类化合物的研究进展［J］.时珍国医国药，2004，15(5):306.
       ［3］  陈铎葆.红花总黄素对实验性心肌缺血模型冠脉流量及血流动力学的影响［J］.时珍国医国药，2005，16(9):828.
       ［4］  徐叔云，卞如廉，陈  修.药理实验方法学，第3版［M］.北京：人民卫生出版社， 2001：200.
       ［5］  金惠铭.微循环［J］.中华医学杂志，1997，77(12): 938.
       ［6］  李勇敏.银杏舒通液对心脑血管系统的影响研究［J］.湖南中医杂志，2000，16(1):584.
       ［7］  龙  军，喻  斌，方泰惠.注射用银杏叶(冻干)对麻醉犬脑血液循环的影响［J］.中国微循环，2003,7(3):167.
       ［8］  沈明勤，陆泽安，叶其正.银杏叶提取物对犬脑循环和后肢循环的作用［J］.中药材， 2000，23(12):754.
       ［9］  耿秀芳,庞秀英,李桂芝.银杏叶总黄酮近期研究进展［J］.中国中药杂志, 2003,28(6):448.
       ［10］  Kubota Y, Tanaka N, Umegaki K, et al. Ginkgo biloba extract induced relaxation of aorta is associated with increase in endothelial intracellular calcium level［J］.Life Science,2001,69(20):2327.
       (广西师范大学生命科学学院，广西  桂林  541004)