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       【关键词】  玉米须多糖；,,解热作用；,,利胆作用；,,急性毒性
       摘要：目的研究玉米须多糖（SMPS）的清热利胆作用及急性毒性。方法采用干酵母、2，4二硝基苯酚致大鼠发热的模型观察玉米须多糖（SMPS）的解热作用；采用胆管引流法分别收集并计量给药后0.5，1，1.5，2 ，2.5 h的胆汁的方法观察SMPS对肝脏分泌胆汁的影响；采用测定小鼠胆囊重量的方法观察SMPS对胆囊的影响；对SMPS进行了小鼠急性毒性实验。结果高、中剂量的SMPS对发热大鼠有较好的解热作用；能明显增强胆汁分泌量；促进胆囊收缩，降低胆囊重量；小鼠急性毒性实验表明SMPS毒性低，无法测得LD50。 结论玉米须多糖不仅具有明显的清热利胆作用而且小鼠急性毒性实验表明SMPS毒性低，无法测得LD50。
       关键词：玉米须多糖；  解热作用；  利胆作用；  急性毒性
       Studies on Antipyretic Choleretic Effect and Acute Toxicity of stigma maydis polysaccharide
       DU Juan，XU Qitai
       (College of Pharmacy , Henan University , Kaifeng 475001，China)
       Abstract：ObjectiveTo observe the antipyretic choleretic effect and the acute toxicity of Stigma Maydis Polysaccharide(SMPS).MethodsThe antipyretic activity of SMPS was observed in rats with high temperature induced by dried yeast and 2,4-dinitrophenol; biliary duct cannula bile at 0.5，1，1.5，2，2.5 h after intraduodenal administration in rats was collected and counted to observe the effect of SMPS on biliary secretion;the weight of cholecyst in mice was counted to observe the effect of SMPS on the cholecyst of mice;the acute toxicity test of SMPS was done with mice.ResultsSMPS at the doses of 2 g/ kg and 1 g/ kg showed  antipyretic activity in rats with high temperature induced by dried yeast and 2,4- dinitrophenol;  SMPS could significantly increase the biliary secretion,decrease the weight of cholecyst in mice;the acute toxicity test showed that the acute toxicity of SMPS was too low to measure LD50.ConclusionSMPS shows considerable antipyretic and choleretic effect without obvious toxicity.
       Key words：Stigma Maydis Polysaccharide(SMPS);  Antipyretic effect;  Choleretic effect;  Acute toxicity
   
　　玉米须为禾本科玉蜀属植物玉米Zea mays L.的花柱和柱头,是一种传统的中草药，在《全国中草药汇编》《中药大辞典》等当代中医药典籍中都有记载［1，2］。它含有多种化学成分，如挥发油、皂苷、生物碱、黄酮类、多聚戊糖、尿囊素、有机酸、脂溶性维生素K3、维生素E等［3，4］。其性味甘、平、无毒；有利尿、泻热、止血、平肝、利胆之效。可用于治疗肾炎、胆结石、糖尿病、黄疸、麻疹、乳糜血尿、血崩等症［2］。现代药理研究证明玉米须有显著的利尿［5］、降血糖［6］、抑菌［7，8］、降压［9］、增强免疫［9］、抗癌［10］等功效。但关于玉米须确切的利胆的药理作用未见报道。我国玉米产量居世界第2位, 产量约750 万吨。因此，作为玉米副产物的玉米须的资源十分丰富，但目前对它的开发利用非常有限，仅少量入药外，大部分被白白丢弃。为了进一步开发利用玉米须资源，我们对玉米须的化学成分进行了提取、分离。在对玉米须提取物的有效作用部位进行了大量的筛选工作之后，发现玉米须多糖不仅具有利胆作用，还有解热作用。同时，对玉米须多糖的急性毒性进行了研究，以期为进一步开发利用玉米须提供实验依据。
       　　1  材料
       1.1  动物昆明种小鼠，雄性，体重18～22 g；Wistar大鼠，250～300 g，雄性。均购自河南省实验动物中心。
       1.2  用药
       1.2.1  玉米须多糖的提取参照文献中玉米须多糖的提取方法［11］，将玉米须(采自山东省临沭)干粉置于沸水中煎煮1 h，过滤，滤渣再次煎煮；合并两次滤液，浓缩至1∶1，加入3倍体积的95％乙醇静置30 min，3000 r/min下离心10 min，所得沉淀物用95％乙醇、无水乙醇依次洗涤，P.O.中干燥称重。所得沉淀物用苯酚硫酸法鉴定为多糖。主要依据多糖成分在硫酸作用下，先水解成单糖，单糖迅速脱水生成糠醛衍生物，然后和苯酚缩合成有色化合物，该化合物在490 nm波长处有特征吸收。每克玉米须多糖相当于玉米须16.7 g。
       1.2.2  消炎利胆片广东博罗先锋药业集团有限公司生产，批号:050820。
       1.2.3  阿司匹林肠溶片徐州平光制药有限责任公司生产，批号：050706。
       1.2.4  干酵母混悬液的制备［12］称取干酵母（湖北安琪干酵母股份有限公司，生产批号060105）10 g，置于乳钵中，逐渐加入蒸馏水研磨为均匀的悬浆，最后定容为50 ml，此液于临用前配制。
       1.2.5  2，4二硝基苯酚溶液的配制［12］精密称取2，4二硝基苯酚（上海试剂二厂生产， 批号050302）150 mg，置于80 ml左右生理盐水中，滴加5 mol/L NaOH溶液，不断搅拌，待药液澄明变为亮黄色，再加入生理盐水至100 ml。
       1.3  统计分析结果均以+s表示，组间差异性比较采用单因素方差分析，SPSS11.5自动处理，P<0.05为有显著性差异，P<0.01为有非常显著性差异。
       　　2  方法与结果
       2.1  解热作用研究
       2.1.1  对干酵母所致大鼠发热的影响［12］实验前3 d每日测大鼠体温1次，挑选体温变化在37～38.5℃，且自身体温变化低于0.3℃的雄性大鼠60只。实验当日,取3次体温的平均值作为基础体温 ,动物按 10 ml/ kg 皮下注射20%干酵母混悬液。注射干酵母混悬液3 h后体温开始上升 。选取4h后体温上升高于 0. 8 ℃的大鼠50只，随机分成5 组 ,每组10只。分别为：（1）空白对照组;（2）SMPS高剂量组（2 g/kg）；（3）SMPS中剂量（1 g/kg）；（4）SMPS低剂量组(0.5g/kg)；（5）阿司匹林组（0.2 g/kg）。在注射干酵母混悬液后 4h给药1次。（1）～（4）组为腹腔注射，（5）为灌胃给药，给药容积均为10 ml/kg。测定致热后2，3，4，5，7，9 h大鼠体温，并计算体温变化值。结果见表1。实验结果表明，大鼠注射干酵母混悬液后，体温略有下降，到第3小时开始上升，7 h达到高峰。SMPS高、中剂量组对大鼠干酵母混悬液致热有明显的解热作用，作用强度随药物剂量增加而增强。
       2.1.2  对2，4二硝基苯酚致大鼠发热的影响［12］实验前3 d测大鼠体温1次/d，挑选体温变化在37～38.5℃，且自身体温变化低于0.3℃的雄性大鼠50只，将实验动物随机分为5组，每组10只。分别为：（1）空白对照组；（2）SMPS高剂量组（2 g/kg）；（3）SMPS中剂量（1 g/kg）；（4）SMPS低剂量组(0.5 g/kg)；（5）阿司匹林组（0.2 g/kg）。（1）～（4）组为腹腔注射，（5）为灌胃给药，给药容积均为10 ml/kg。给药前测量体温1次，作为0h时基础体温，给药后随即sc0.15％的新配二硝基苯酚10 ml/kg，测量注射给药后1，2，3，4 h时的体温。结果见表2。实验表明，SMPS高、中剂量组对2，4二硝基苯酚致热有明显的解热作用，作用强度随药物剂量增加而增强。
       表1  SMPS对干酵母所致大鼠发热的影响（略）
       与空白对照组比较，*P<0.05,**P<0.01；n＝10
       表2  SMPS对2，4二硝基苯酚致大鼠发热的影响（略）
       与空白对照组比较，*P<0.05,**P<0.01；n＝10
       2.2  利胆作用研究
       2.2.1  对大鼠胆汁分泌的影响［12］雄性Wistar大鼠50只，体重250～290 g。随机分为5组，每组10只。分别为：（1）空白对照组（2）SMPS高剂量组（2 g/kg）。（3）SMPS中剂量（1 g/kg）。（4）SMPS低剂量组(0.5 g/kg)。（5）消炎利胆组（12 g/kg）。药物用蒸馏水配制，给药量均为10 ml/kg,ig 1次/d，连续给药7 d。末次给药前12 h禁食不禁水，实验以20％乌拉坦（0.5 ml/100 g）腹腔麻醉后，打开腹腔。找到胃幽门部，翻转十二指肠。对着亮处在十二指肠降部肠系膜中可清晰看到有韧性、里面流着黄色液体的胆管。用眼科镊将覆盖在表面的薄膜连续剥离2 cm，以暴露出胆总管。在其下穿2根丝线，结扎乳头部，用5号静脉输液针头向肝脏方向做胆管穿刺，然后拔掉针头（该操作避免了传统用眼科剪作“V”形切口所易导致的胆管断裂现象，提高了实验成功率），从开口处向肝脏方向插入外径1 mm左右的塑料管（外科硬脊膜外麻醉导管在电炉上方加热拉细而成），结扎固定，收集胆汁（实验过程中创面用生理盐水纱布覆盖，并保持湿润）。待胆汁流量稳定后，按表3中分组及剂量从十二指肠进行末次给药（1 ml/100 g）。给药后每隔30 min收集胆汁1次，共5次。记录每30 min胆汁流量，并计算5次胆汁的总流量。结果见表3。研究结果表明：SMPS连续给药7 d，各给药组与空白对照组比较，胆汁流量有显著增加。表明SMPS对大鼠肝脏胆汁分泌有明显的促进作用，该作用随着剂量增大而增强。
       表3  SMPS对大鼠胆汁分泌的影响（略）
       与空白对照组比较，*P<0.05,**P<0.01；n＝10
       2.2.2   对小鼠胆囊重量的影响［13］取体重18～22 g雄性小鼠50只。随机分成5组，按表3剂量给药。给药前禁食16 h。给药后30 min处死。摘出胆囊，称重。计算各组胆囊重量。结果：空白对照组胆囊重（9.7＋4.8）mg，SMPS低剂量组（5.5＋2.0）mg，SMPS中剂量组（4.0＋1.4）mg，SMPS高剂量组（2.2＋0.3）mg，消炎利胆片组（2.3＋0.7）mg。SMPS中剂量组与对照组相比有显著性差异，P<0.05。SMPS高剂量组与对照组相比有非常显著性差异，P<0.01。研究结果表明：SMPS能减轻胆囊重量，推测其可能有加速小鼠胆囊收缩排空的作用。
       2.3  急性毒性测定［12］
       2.3.1  LD50测定预试预试时将SMPS按最大质量浓度（37.5%）和最大灌胃容积（0.4 ml/10 g）给药，观察7 d。结果，SMPS按15 g/kg给小鼠灌胃后均未出现死亡，表明SMPS毒性太低，测不出LD50。
       2.3.2  最大耐受量的测定SMPS毒性低，预试中测不出LD50，故按最大质量浓度（37.5%）和最大灌胃体积（0.4 ml/10 g）给药，测定小鼠最大耐受量。取小鼠20只，雌雄各半，用37.5％的SMPS药液0.4 ml/10 g,即15 g/kg，ig，8 h 1次，共3次，累计剂量45 g/kg。给药后观察7   d。结果，给药小鼠在观察期内未死亡1只，未出现竖毛、躁动、竖尾、兴奋跳跃、蜷缩、多动、对刺激反应迟缓或过敏、也未出现强直、震颤及共济失调等症状。证明小鼠对SMPS的最大耐受量为45 g/kg。
       　　3  讨论
       祖国医学认为：胆石症是由于饮食不节、寒湿不适、郁怒过度等原因使肝失疏泄、脾胃损伤。气滞、湿热、血淤交阻于胆，胆失通降之职，导致胆液郁滞，胆体受损，日久则正虚邪盛，甚则导致阴阳离绝。治疗当以疏肝利胆，清热化湿为主。有文献报道，玉米须多糖有保肝作用。在此基础上，本文进一步探讨了SMPS的清热利胆作用。由上述利胆实验可见：（1）SMPS具有较明显的促胆汁分泌作用，且随剂量增大更加显著。给药后30 min利胆作用即可出现，高峰在给药后90 min左右，可维持150 min左右。（2）SMPS能减轻胆囊重量，推测其可能有加速小鼠胆囊收缩排空，促进胆汁排泄的作用。给药后30 min，就可见小鼠胆汁排泄增加。由上述解热实验可见，一定剂量的SMPS可明显降低发热模型动物的体温。在一定范围内，解热作用随剂量增加而增强。以上结果证实，SMPS具有较好的清热利胆作用，该作用对胆囊炎、胆石症的治疗具有重要意义。
       　　参考文献：
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       (河南大学药学院，河南 开封  475001)