虎杖中蒽醌类成分提取工艺优选
作者：陈芳，郭锡勇
《时珍国医国药》 2007年 第1期
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【关键词】 虎杖；,,提取工艺；,,均匀设计
摘要：目的考察乙醇含量、药材粒度、超声提取时间及提取次数对虎杖总蒽醌溶出率的影响。方法采用均匀设计法安排实验，测定虎杖总蒽醌成分含量，其数据经微机处理得回归方程，以确定优化工艺。结果总蒽醌最佳提取工艺为：40目药材加95％乙醇超声提取4次，每次10 min。结论该提取工艺设计合理，可作为提取虎杖蒽醌类成分生产工艺的参考。
关键词：虎杖； 提取工艺； 均匀设计
虎杖又名酸汤杆，为蓼科多年生草本植物虎杖Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. 的干燥根茎及根。味苦、性微寒，具有利胆退黄、清热解毒、活血祛瘀、祛痰止咳的功效［1］。临床应用广泛。有不少文献报道了虎杖不同的提取方法，但并未对诸多因素同时考察并进行优选。本实验采用均匀设计法，系统地考察了提取次数、提取时间、乙醇浓度、药材粒度四个因素对虎杖总蒽醌提取率的影响。为生产工艺参数的选择提供实验参考。
1 仪器与材料
1.1 仪器752紫外光栅分光光度计（上海第三分析仪器厂），微量进样器（上海医用激光仪器厂），超声波清洗器（北京医疗设备二厂）。
1.2 试剂均为分析纯。
1.3 对照品大黄素（中国药品生物制品鉴定所）。
1.4 药材自采（经贵阳中医学院刘 教授鉴定为蓼科多年生草本植物虎杖Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. 的根茎及根）。
2 方法与结果
2.1 含量测定
2.1.1 波长选择及线性范围考察按文献方法［2］，大黄素对照品在520 nm波长处有最大吸收峰。大黄素对照品溶液0.004 ～0.012 mg/ml，在520 nm波长处分别测定各对照品溶液的吸收度，经回归处理得直线回归方程：A=0.0064+58.8C，r=0.999 6。
2.1.2 总蒽醌的含量测定分别称取虎杖10 g，用10倍量乙醇浸泡过夜后，按实验安排进行超声提取，将提取液浓缩挥去乙醇，加入2.5 mol/L H2SO4 溶液20 ml，加热回流1 h，稍冷，加入氯仿30 ml，回流2 h，冷却，移至分液漏斗中分取氯仿层，酸液再用氯仿提取2次，每次约8 ml，将氯仿液并入50 ml容量瓶中定容备用［2］。分别取0.5ml氯仿提取液于分液漏斗中，用少量5％NaOH-2％NH4OH混合碱液反复多次萃取，直至氯仿层为无色，收集碱液定容至100 ml容量瓶中，以碱液为空白，用紫外分光光度计在520 nm波长处测其吸收度，将测定结果代入回归方程，计算含量。
2.1.3 回收率测定取浓度为0.1 mg/ml大黄素对照品和氯仿提取液按表1中数据混合后按2.1.2项下测定。结果见表1。
2.2 提取实验
2.2.1 考察因素与水平见表2。
2.2.2 实验安排与结果见表3。
表1 总蒽醌回收率测定（略）
表2 因素与水平（略）
表3 实验安排与结果（略）
表中数据利用均匀设计数据处理软件回归处理，得回归方程为：总蒽醌:Y=12.791 9-8.357 2X2+10.372 4X3+1.686 5X22-1.446 8X32+0.274 0X42+3.154 6X3・X4
2.3 稳定性实验吸取0.1 mg/ml标准液0.8，1，1.2 ml于10 ml容量瓶，加5％NaOH-2％NH4OH混合碱液定容后，以随行液作空白，每隔20 min测1次吸收度，显色在2h内基本稳定，RSD=1.6％；另精密吸取0.1 mg/ml标准液20 μl薄层洗脱后每隔30 min测定1次吸光度，测定结果在6 h内基本稳定，RSD=1.54％。
3 讨论
3.1 为了考察超声波对总蒽醌的提取率,本实验还测定了一组用索氏提取器提取尽后的总蒽醌含量为22.55 mg，第9组数据的总蒽醌提出率达96.1％，可见超声波提取4次后能将总蒽醌基本提尽，时间上比索氏提取节省。
3.2 根据微机处理后的数据统计分析显示，在总蒽醌提出率影响因素中，超声提取时间影响不显著，故选10 min为最佳超声提取时间。根据统计分析结果，最佳工艺为：40目药材加95％乙醇提取4次，每次10 min，预测值Y＝26.331 8 mg/g。
参考文献：
［1］ 黄兆胜.中药学，第1版［M］.北京：人民卫生出版社，2002：218.
［2］ 国家药典委员会. 国家药典，Ⅰ部［S］.广州：广东科技出版社，2000:167.
［3］ 魏凤玲,齐敏超,钟加胜.大黄蒽醌类成分提取工艺优选［J］.中国中药杂志,1998,23(10):609.
(贵阳中医学院，贵州 贵阳 550002)