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       【关键词】  阿魏酸；,,生化设备；,,提取率；,,纯化精制
       关键词：阿魏酸；  生化设备；  提取率；  纯化精制
       阿魏酸（ferulic acid）化学名称为4羟基3甲氧基肉桂酸，异名咖啡酸3甲基醚，3O甲基咖啡酸。分子式为C10H10O4。结构式为 易溶于热水、乙醇、乙酸乙脂。阿魏酸主要存在于川芎Aconitum carmichaeli Deber，当归Angelica sinensis(Oliv .)Diels，川牛膝Cyathula officinalis Kuan中，它在不同的植物中以不同的状态存在。阿魏酸由于有抗自由基、保护膜至不受氧化及抑制血小板聚集、血栓形成等作用，在临床上得到广泛的应用。现对中药中阿魏酸的提取精制方法进展进行综述。
       　　1  提取溶剂及提取方法的选择
       在中药材的提取中溶剂和方法的选择至关重要，选择合适的提取溶剂和方法不但可以提高药材的利用率还可以为后续工作带来方便。
       1.1  溶剂的选择胡杰等［1］用水及乙醇回流提取川芎中的阿魏酸并对两个工艺以及影响因素进行比较，实验结果表明影响水回流提取的因素有溶剂量、提取时间和提取次数。最终认为以8倍量的水0.5 h提取3次为最佳，测得阿魏酸含量约为：496.52 mg/g乙醇回流提取的影响因素有乙醇的浓度、提取时间和次数，结论是乙醇浓度以及提取次数对阿魏酸的提取影响最大。最终优化的最佳工艺是8倍70%乙醇提取2次，1.5 h/次，此工艺下提取的阿魏酸含量约为917.41 mg/g。认为乙醇提取的含量明显高于水提取，由于阿魏酸不耐热、水回流提取含糖量较高不利于后续工作所以最后选择了乙醇的提取工艺。白海波等［2］也对川芎中阿魏酸的水和乙醇提取工艺进行过比较。结果为水提取率87%，乙醇提取率97%。因此认为乙醇提取比较完全，考察影响乙醇提取因素对乙醇浓度、用量、次数和时间进行比较。结论确认为80%乙醇10倍量提取2次，1 h/次为最佳工艺。贾晓斌等［3］在对水以及不同乙醇浓度提取川芎中的阿魏酸进行考察，认为水和50%的乙醇提取的比较合适，因为高浓度的乙醇在提取过程中会含有较多的杂质而且在分析时阿魏峰和相临的峰不能得到较好的分离，阿魏酸的峰面积也很小。杨广德等［4］比较了石油醚、乙醚、醋酸乙酯、丙酮乙醇、氯仿、正已烷、甲醇超声处理60 min提取阿魏酸。结果显示乙醇和甲醇提取率较高。考察不同浓度乙醇的提取率，实验结果表明40%乙醇提取最好。根据阿魏酸是酚酸类物质在酸性溶液中较稳定的性质，李琰［5］等对当归中的阿魏酸提取，用甲醇∶乙酸（95∶5）、甲醇、甲醇∶乙酸（35∶65）做溶剂，与时间和溶剂用量进行了三因素三水平的正交实验。对阿魏酸提取率进行方差分析后，结果显示各个因素的影响都不显著。最后用甲醇提取45 min。阿魏酸在川芎和当归中以游离状态存在，而在川牛膝中是以结合态形式存在。耿秋明等［6］利用阿魏酸和碱成盐在用酸酸化游离出来的方法提取川牛膝中的阿魏酸。
       1.2  提取方法的考察现代科技的不断进步，中药材中有效成分的提取方法也不再仅仅局限在煎煮和回流，相继出现了超声、渗滤、大孔树脂、超临界提取等一系列提取精制的方法。因此对中药的提取方法人们开始进行比较。冀春如等［7］以70%乙醇为溶剂比较渗滤和超声两种方法提取阿魏酸，薄层扫描测定阿魏酸的含量。结果显示超声方法明显优越于渗滤。李琰等［5］对冷浸、热回流和超声三种提取方法进行评价。表明冷浸明显低于热回流和超声。而超声和热回流的提取率接近。杨广德等［4］比较了40%乙醇冷浸、索氏提取、超声、回流4种方法对阿魏酸的提取。结果认为回流提取高于其它3种方法。而刘旭等［8］用75%乙醇为溶剂用60℃热浸提、60℃超声、渗滤、热回流方法提取川芎中的阿魏酸，结果认为热浸和超声方法较好，更适合在工业生产上应用。吴清等［9］用双提法，醇提法，CO2超临界流体萃取法对阿魏酸的提取没有明显的影响，但是双提法所得阿魏酸含量明显低，他们分析原因双提法加热时间过长，阿魏酸在加热过程中受到破坏。
       　　2  纯化方法
       2.1  大孔树脂纯化方法大孔树脂是通过物理吸附的方法从溶液中选择的吸附有机物质，从而达到分离纯化的目的。刘旭等［8］用大孔树脂方法纯化川芎提取液中的阿魏酸，树脂的使用量为原料量的2倍，洗脱时先用5倍量的水，目的是除去产品中的多糖成分，再用30%，5倍量的乙酸洗脱，最后用70%，10倍量的乙醇洗脱，结果回收70%的乙醇，稠膏真空低于60℃干燥5 h。王文祥等［10］在研究川芎的化学成分时用川芎的提取物上大孔树脂，水洗至多糖呈现阴性，用30%乙醇洗脱，回收乙醇，用醋酸乙酯溶解，拌硅胶，再用乙酸乙酯提取，结果得到纯品阿魏酸。
       2.2  超临界流体萃取法SFE有萃取率高、传质速度快、选择性高、提取物干净、省时等特点。张虹等［11］用SFE方法萃取川芎中的阿魏酸并且考察其影响因素，结果显示各个因素的影响为温度＞压力＞流量＞时间.最终确定的最佳工艺为萃取罐温度70℃压力为35 MPa流量为25 kg/h，萃取时间为25 h为最佳条件阿魏酸在此条件下川芎中的含量为0.04%。此外还有上述两种方法的结合。张军等［12］利用超界流体萃取提取低极性挥发性成分的同时，药渣中的热不稳定性成分不受破坏的特点，用乙醇提取药渣中的阿魏酸大孔树脂精制。具体方法是用水洗至无糖后，以4倍柱体积80%的乙醇洗脱，结果测得阿魏酸的保留率为98.2%。
       2.3  离子交换树脂法离子交换法具有产品纯度高、能耗低、提取过程没有相变、操作简单、成本低的优点.依据阿魏酸能够“酸沉碱溶”的原理、易溶于醇类等有机溶剂的特性，选用离子交换树脂法对阿魏酸进行提取纯化。刘子立等［13］麦麸酶降解液为研究对象，确定最佳的离子交换工艺。比较了 D201和717交换树脂，它们的阿魏酸洗脱率为99.01%和78.01%。考虑到吸附和洗脱效果最终选择D201。对层析柱离子交换工艺的考察确定为：麦麸降解液真空浓缩至2 000 ～3 000 mg/L，pH调为9.0，室温1 ml/min。再进行洗脱工艺考察后，确定洗脱工艺为：洗脱剂配比（4 ml盐酸：60 ml无水乙醇：36 ml水）、流速1 ml/min。以上操作工艺使阿魏酸的回收率达到97.7%。再进行酸化结晶即可以得到纯度较高的阿魏酸。
       　　3  生化的方法获得阿魏酸
       生化方法提取制备中药是新兴的技术，可节省资源，一是在阿魏酸与一些小分子的结合物中获得。目前生产高纯度的阿魏酸工业方法是将谷维酸素在90～100℃温度下氢氧化钠或氢氧化钾水解8 h，在用硫酸将pH调到酸性以沉淀出阿魏酸［14］。二是从植物细胞壁上提取阿魏酸。由于碱解法耗时太长，该法过去仅限于分析细胞壁质中的阿魏酸含量。最近，我们通过提高提取温度，并加入适合的保护剂，发现0.5%的氢氧化钠浓度在较短时间内就能将麦麸中大部分阿魏酸游离出来。三是通过组织培养得到阿魏酸。采用植物组织培养法也是获得阿魏酸的一条重要途径。采用筋骨草进行组织培养产生的阿魏酸量高达150 mg/L培养液，而且大部分是游离阿魏酸［15］。另外，对某些植物进行组织培养能使之较高产量的阿魏酸衍生物。对糖甜菜、玉米进行悬浮培养能得到水溶性的阿魏酸葡萄糖酯、阿魏酸蔗糖酯等，含量高的可以达到20.0 mmol/g愈伤组织（干重）［16］。
       　　4  结论
       阿魏酸是极性物质，能溶解在热水、热乙醇中。利用相似原理，大多数实验都采用乙醇做提取溶剂，只是对提取工艺进行优化。在提取工艺中主要是对超声和热回流提取方法进行比较。纯化多选用大孔树脂，近期出现了超临界流体萃取。在中药资源短缺的情况下也有人尝试用生化方法制备阿魏酸，但是具体采用哪个方法还要视具体情况而定。
       　参考文献：
       ［1］  胡  杰，冯丽莉. 当归、川芎中阿魏酸提取研究［J］. 时珍国医国药，2004，15（11）：732.
       ［2］  白海波，王剑飞，宋子荣.川芎提取工艺的优化［J］.中国实验方剂学杂志，2003，9（4）：8.
       ［3］  贾晓斌，施亚芳，黄一平，等.当归和川芎中阿魏酸高效液相色谱测定方法的改进［J］. 中成药，1998，20（6）：37.
       ［4］  杨广德，梁明金，贺浪冲，等. 川芎中阿魏酸的提取方法研究［J］. 中成药，2002，24（6）：418.
       ［5］  李  琰，徐丽珍，林  佳，等.不同产地当归中阿魏酸的含量比较［J］. 中国药学杂志，2003，38（11）：838.
       ［6］  耿秋明，全昌日，王  璇.川牛膝有效成分阿魏酸的分离与测定.中国中医药信息杂志，2000，11（7）：49.
       ［7］  冀春茹，孕  军，郭丽萍. 超声提取对当归流浸膏中化学成分的影响，中成药，1997，19（2）：1.
       ［8］  刘  旭，杨雪梅，徐江平，等.正交试验对川芎提取工艺的筛选研究，广东药学，2003，13（6）：3.
       ［9］  吴  清，李云谷，杜守颍，等.当归、川芎提取工艺的筛选研究，广东药学，2003，13（6）：3.
       ［10］  王文祥，顾  明，蒋小岗，等.张玉杰，当归、川芎提取工艺研究，中国实验方剂学杂志，1999，5（6）：17.
       ［11］  张  虹，柳正良，王洪泉. 超临界萃取法提取川芎中有效成分的研究.中草药，2001，32（12）：1077.
       ［12］  张  军，王风云，詹丽玲，等.川芎化学的超临界CO2萃取大孔树脂吸附工艺的研究，中草药，2005，36（8）：1168.
       ［13］  刘子立，欧仁益，黄雪松，等.离子交换法从酶解液中提取阿魏酸,中药材,2004,27(12):910.
       ［14］  欧仁益.阿魏酸的功能和应用.广州食品工业科技,2002,18:50.
       ［15］  Ma(ulavi DL.)et al.J Agric Food Chem ,1997,45:1506.
       ［16］  Grabber JH et al.Phytoc hem ,1995,40:1077.
       (天津中医药大学，天津  300193)