复方心脑通颗粒提取工艺的优选
作者：徐伯颐，陆兔林
《时珍国医国药》 2005年 第11期
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【关键词】 复方心脑通颗粒
摘要: 目的: 正交实验法优选复方心脑通颗粒提取工艺。 方法: 采用L9 （34 ）正交实验法，以丹参酮ⅡA ，川芎、砂仁挥发油，胆南星中生物碱的溶出量为指标分别进行挥发油提取、醇提、水提工艺优化选择，考察各因素的影响。 结果: 川芎、砂仁的挥发油最佳提取工艺为药材加10倍量水浸泡2h后回流提取6h;丹参醇提最佳工艺为每次加10倍量90%乙醇回流提取3次，1.5h/次:水提确定最佳的工艺为A2 B2 C3 ，即药材加20倍量水分2次煎煮，每次1.5h。 结论: 上述实验结果为复方心脑通颗粒提取工艺的确定提供科学实验依据。
关键词: 复方心脑通颗粒; 提取工艺
复方心脑通颗粒由丹参、胆南星、川芎、砂仁等药物组成，具活血化瘀、理气止痛功效。主要用于治疗冠心病、心绞痛以及其他气滞血瘀证。方中川芎、砂仁挥发油，丹参酮ⅡA ，水溶性生物碱均为主要活性成分。根据各有效成分性质分别进行挥发油提取、醇提和水提工艺的研究，为提高产品质量确保临床治疗效果提供科学理论依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器 BIO-TEK HPLC535，KQ-500E型医用超声清洗器（昆山超声仪器有限公司），电子天平（FAll04），旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）
1.2 试药 丹参酮ⅡA 购自中国药品生物制品检定所（批号:766-9002）复方心脑通颗粒样品自制;丹参、砂仁、川芎、胆南星等药材购自南京市药材公司，经鉴定，符合《中国药典》（2000版Ⅰ部）有关标准;甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 挥发油水提工艺优选 正交实验法优选复方心脑通颗粒处方中川芎、砂仁的挥发油提取工艺。选用L9 （34 ）因素水平表，以提取所得挥发油量为指标，并结合生产实际选择加水量、提取时间、浸泡时间等因素［1］ ，进行提取工艺考察，各因素水平见表1。表1 因素水平（略）
取处方中川芎、砂仁药材，砂仁捣碎，平行称取9份，根据正交实验表2按排进行挥发油提取实验，计算挥发油含量。表中挥发油含量相当于川芎、砂仁药材百分含量。表2 L9 （34 ）正交实验结果（略）
由表3方差分析结果显示，因素A、B、C对提取结果均有极显著性影响。根据方差分析综合考虑多种因素确定复方心脑通颗粒中挥发油最佳提取工艺为A2 B2 C2 ，即以每次10倍量水浸泡2h后回流提取6h为最佳提油工艺。表3 挥发油方差分析（略）
2.2 正交实验法优选复方心脑通颗粒中丹参醇提工艺
2.2.1 色谱条件 色谱柱为Lichrospher C18 （dp5μ4.6mm ID×l5cm）（淮阴汉邦科技有限公司），流动相:甲醇:水（15:5），流速:1ml/min，检测波长:270nm，柱温:室温［2］ 。
2.2.2 对照品溶液的制备以及回归方程 精密称取丹参酮ⅡA 对照品0.552mg置于25ml容量瓶中并定容至刻度，得到浓度为0.02208mg/ml的对照品溶液。按上述条件进行测定得对照品的线性方程为:y=2385007.672x+4987.8622。
2.2.3 样品处理及实验结果 选用L9 （34 ）因素水平表，以丹参酮ⅡA 含量为指标，结合生产实际选择加乙醇量、醇提次数、醇提时间和乙醇浓度为考察因素［3］ ，进行醇提工艺考察，各因素水平见表4。表4 因素-水平因素（略）
将称取的9份丹参药材，按照表5进行正交实验，合并所得醇提液回收乙醇后浓缩成稠膏并称重。从以上所得稠膏中取出1/5（相当于原药材2g），置于锥形瓶中精密加入50ml甲醇，超声处理一次，20min/次。滤过，取续滤液25ml，再从中取出1ml定容至10ml备用。表中丹参酮ⅡA 含量为相当于丹参药材百分含量。表6方差分析结果显示，因素A、B对提取结果有显著性影响，因素C、D无显著性影响。根据方差分析综合考虑多种因素确定复方心脑通颗粒醇提最佳工艺为A3 B1 C2 D2 ，即丹参药材加10倍量的90%的乙醇提取3次，1.5h/次为最佳。表5 L9 （3 4 ）正交实验结果（略） 表6 丹参酮ⅡA方差分析（略）
2.3 复方心脑通颗粒水提工艺优选
2.3.1 方法与结果 选用L9 （34 ）因素水平表，以胆南星中生物碱溶出量为指标，结合生产实际选择加水量、水提次数，水提时间为考察因素，进行水提工艺考察，各因素水平见表7。表7 因素-水平（略）
取胆南星及上述提油、醇提药渣合并，根据正交试验表8安排进行水提实验。合并正交实验所得水溶液并浓缩后进行生碱含量测定［4］ 。表中生物碱含量以胆南星药材计算得百分含量。
结果表明，因素A不同水平之间有显著性差异，结合各因素水同水平相应的Ki值，同时考虑生产实际，确定最佳的工艺为A2 B2 C3 ，即药材加20倍量水分2次煎煮，每次1.5h。
3 讨论与小结
本制剂中丹参、川芎、砂仁、胆南星等均为方中主药，为最大限度提取方中各药物所含有效活性成分，分别采用水提、醇提及水提法，以确保有效组分的提取溶出。选择川芎、砂仁中挥发油，丹参中丹参酮ⅡA 以及生物碱的溶出量为指标，分别优选最佳提取工艺，为复方心脑通颗粒的生产及临床应用提供科学依据。实验结果表明，乙醇浓度、用量、提取次数及时间等因素均对提取结果产生很大影响。表8 L9 （34 ）正交实验（略）表9 水煎煮生物碱方差分析（略）
参考文献:
［1］ 阮 琴，张 颖，胡燕月.不同制备方法对川芎挥发油化学成分的影响［J］.中国中药杂志，2003，28（6）:572-572.
［2］ 国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京:化学工业出版社，2000:58-58.
［3］ 徐淑卿，孙艳秋，陈桂苑.用正交试验法优选丹参脂溶性成分的提取工艺［J］.中成药，1999，21（3）:152-152.
作者简介: 徐伯颐（1956-），男（汉族），江苏姜堰人，现任江苏苏中药业集团股份有限公司高级工程师，硕士学位，主要从事新药研究与开发工作.
（1.江苏苏中药业集团股份有限公司，江苏姜堰 225500; 2.南京中医药大学，江苏南京 210029）
收稿日期: 2005-01-18