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新疆紫草多糖的提取工艺研究
作者:乔秀文,曾宪佳,李洪玲,杜志坚,邵志刚

《时珍国医国药》 2005年 第11期

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       【关键词】  ,紫草
       摘要: 利用正交设计法优选紫草多糖的提取工艺。实验结果表明,紫草多糖超声提取的最佳工艺条件为:提取时间为0.5h,提取次数为3次,固液比1∶12。最佳工艺条件具有重现性、可靠性。
       关键词: 紫草; 紫草多糖; 提取; 正交设计
    
     Study on the Extraction of Arnebia Euchroma Polysaccharides of xingjiang 
       QIAO X iu-wen, ZENG X ian-jia, LI H ong-ling, DU Z hi-jian, SHAO Z hi-gang
   
  (Chemistry,Teachers College,Shihezi University,Shihezi,Xinjiang832000,China and Chemical Engineering Institute.)
        Abstract: Objective:The abstract method of Arnebia Euchroma Polysaccharides was studied with orthogonal design in this paper.The results showed that the optimal conditions were that the time of ultrasonic extraction was0.5h,the of ultrasonic extraction was3time,the rate of solid and liquid was1∶12.Under these conditions,the extraction rate of Arnebia euchroma polysaccharides was high.
    
  Key words: Arnebia euchroma; Arnebia euchroma polysaccharide; Abstract method; Orthogonal design
   
  紫草是传统中药材,其根药用,含多种萘醌类化合物――紫草素及其衍生物,具有显著的抗生育、抗炎、抗肿瘤、杀菌抗病毒和免疫调节等作用。此外,紫草中还含有紫草多糖。研究发现,紫草多糖具有抗病毒活性,能够激活巨噬细胞的吞噬功能,增强T淋巴细胞的数量和活性,抑制DFH强度,促进T淋巴细胞的免疫应答作用,具有促进肌体非特异性免疫和特异性的细胞免疫作用[1,2] 。为促进紫草多糖的应用,本文采用正交设计法对紫草多糖进行提取[3] ,找出提取紫草多糖的最佳工艺条件。
       1 仪器、材料与试剂
    
  1.1 材料
       新疆软紫草[Arnebia euchroma(Royle)Johnst](经石河子大学药学院生药教研室王琪、成玉怀老师鉴定);苯酚(重蒸);硫酸;无水乙醇;丙酮。(均为分析纯)
    
  1.2 仪器
       722光栅分光光度计(上海精密科学仪器厂);电子天平(北京赛多利斯天平仪器厂);HH-S恒温水浴锅();DZKW-C电子恒温水浴(北京光明医疗仪器厂)
         2 方法与结果
    
  2.1 紫草多糖提取工艺的正交设计 根据预试,影响紫草多糖提取率的主要因素有提取的时间、次数和固液比等。故以L9 (34 )正交表进行实验设计,见表1。并以提取的紫草多糖的吸光度作为评价提取率高低的标准。表1 紫草多糖提取因素水平(略)
   
  2.2 回流法提取紫草多糖
       准确称取紫草干燥粉末40.0000g,分别用不同倍量的水浸不同时间,提取不同时间、次数后,抽滤,滤液减压浓缩至100ml加4倍量的无水乙醇沉淀,放置12h以上,抽滤,沉淀蒸干称重。即得1次醇沉后蒸干物。将1次醇沉后多糖粗提物分别加入无水乙醇、丙酮各50ml反复抽吸,抽滤,沉淀物再加100ml蒸馏水溶解,放置后,离心,取上层清液再加入4倍量无水乙醇沉淀,抽滤,沉淀物在60℃烘干至恒重,即2次醇沉后多糖提取物。
    
  2.3 紫草多糖吸光度的测定
       称取相同质量的各次提取的2次醇沉多糖,用水溶解后分别加入6ml苯酚溶液和30ml浓硫酸,30℃恒温30min后,冷水浴冷却至室温,定容到50ml,在490nm处测定吸光度,以不加样为空白。吸光度测定结果见表2,数据方差分析见表3。表2 紫草多糖提取正交试验及吸光度(略)表3 方差分析表(略)
    
  2.4 正交放大实验
       按实验得出的紫草多糖最佳提取工艺,称取紫草100g,加入蒸馏水500ml,于20℃下恒温回流提取2h,过滤后滤渣再次分别加入400ml和300ml蒸馏水,回流提取两次。合并3次提取液,按测定紫草多糖吸光度的方法测定其吸光度值。重复3次,求其平均值。
    
  3 讨论

       从表2中的实验结果表明,紫草多糖提取最佳工艺组合为:A1 C3 D3 ,既提取时间为30min,提取次数为3次,固液比为1:12。提取中各因素对紫草多糖提取率影响次序为C>A>B>D。表3中方差分析结果表明,各因素间无显著性差异,说明几个因素的联合作用对实验结果发生影响。按该最佳工艺组合进行的放大重复实验,也证实了紫草多糖的吸光度值超过正交设计表中的最大值,说明该组合工艺条件较为可行、可靠。
         参考文献:
    
  [1] 董建英,付文萍.紫草多糖对小鼠免疫机能的调节作用[J].中国实验免疫学杂志,1995,7(5):42-44.
        [2] 陈瑞琪,何士勤,施仲贤,等.紫草多糖抗疱疹病毒地方株实验研究[J].江西医学院学报,1987,27(3):13-16.
        [3] 陈海霞,谢笔军.茶多糖不同提取工艺的比较研究[J].食品工业科技,2001,2:18-19.
       作者简介: 乔秀文(1966-),女(汉族),新疆乌鲁木齐人,现任石河子大学师范学院副教授,学士学位,主要从事天然产物化学的研究工作.
       (石河子大学师范学院,新疆石河子 832000)
       收稿日期: 2005-03-24

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