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       【关键词】  还阳参；,,止咳平喘；,,活性部位
       摘要：目的比较还阳参不同提取物止咳平喘作用，为寻找确定其止咳平喘有效部位提供实验基础。方法制备还阳参不同提取物，观察其对浓氨引起的小鼠咳嗽以及组胺乙酰胆碱引起的豚鼠哮喘的影响。结果还阳参石油醚提取物的H2-1部位对氨水刺激引起的小鼠咳嗽有明显的止咳作用；正丁醇提取物的HD2部位对组胺和乙酰胆碱引起的豚哮喘有抑制作用。结论 明确了还阳参止咳平喘的物质基础,为还阳参止咳平喘的临床功效提供了科学依据。
       关键词：还阳参；  止咳平喘；  活性部位
       Study on the Active Fraction with Relieving Cough and Asthma from Tibetan Hawksbeard Root
       NI Yan, LIU Zhenquan, KANG Yong, LI Huijuan
       (Shanxi Traditional Chinese Medicine Research Institute, Taiyuan,Shanxi 030012, China; Resource Institute, Beijing Normal University Beijing 100875, China)
       Abstract：ObjectiveTo compare the relieving cough and asthma action of different extract isolated from Tibetan hawksbeard root, and set up foundation for the experiment which is to search and ascertain the relieving cough and asthma action of Tibetan hawksbeard root.MethodsPrepare different extract from Tibetan hawksbeard root, observe the impact of them on the mouse cough caused by deeper ammonia and the guinea pig asthma caused by histamine and acetylcholine.ResultsThe H2-1 fraction in the petroleum ether extraction from Tibetan hawksbeard root had got relieving cough action against mouse cough caused by deeper ammonia; The HD-2 fraction in the n-butyl extraction had inhibition on Guinea pig asthma caused by histamine and acetylcholine.ConclusionAscertain the substance basis of the relieving cough and asthma action of Tibetan hawksbeard root, and supply scientific gist for relieving cough and asthma clinic efficacy of Tibetan hawksbeard root.
       Key words：Tibetan hawksbeard root;  Relieving cough and asthma;  Active fraction
   
　　还阳参为菊科植物屠还阳参Crepis turczaniowii C.A.Mey.的全草，别名屠还阳参、驴打滚儿草，主要分布在山西、内蒙古一带，资源丰富，为当地民间习用草药。文献记载本品味苦，性微寒，具有益气、止嗽平喘、清热降火之功效，用于治疗支气管炎、肺结核等疾病［1］。经文献检索及专利查询，均未发现有关还阳参的研究报道。本f文对还阳参止咳平喘作用的有效部位进行了较为系统的实验研究。现报道如下。
       　　1  材料
       1.1  药品取还阳参药材（采自山西省雁北地区山阴县一带）3 kg，粉碎，70%乙醇提取，提取液滤过，回收乙醇至无醇味，加适量水分散，依次用石油醚，醋酸乙酯、正丁醇萃取，分别减压回收溶剂，干燥，得石油醚提取物（A）、醋酸乙酯提取物（B）、正丁醇提取物（C）及水的提取物（D）。取A提取物上硅胶柱，以石油醚醋酸乙酯（3∶1~1∶1）梯度洗脱及甲醇洗脱，得3个部位，暂命名为H21，H22，H23。经理化鉴别及薄层色谱分析，初步表明H21主要内含三萜及甾体类成分。取C提取物上大孔吸附树脂柱，依次用水、不同浓度的乙醇为洗脱剂进行洗脱，分得四个部位，暂命名为HD1，HD2，HD3，HD4。经理化鉴别及薄层色谱分析，初步表明HD2内含多种苷类成分，主要为三萜苷类（或甾体苷类）及木脂素苷类。浓氨水（太原化肥厂化学试剂厂，批号010108）；磷酸可待因（北京中顺制药厂，批号20000205）；枸橼酸（北京化工厂，批号930305）；磷酸组胺（上海丽珠东风生物技术有限公司，批号0006058）；氯化乙酰胆碱（北京化学试剂公司，批号00602）；氨茶碱（山西临汾民康制药厂，批号000703）。
       1.2  动物小鼠（昆明种），清洁（晋动（证）字第A00004号），体重150 ~200 g，均由山西省中医药研究院实验动物室提供。
       1.3  仪器402超声雾化器（上海合力医疗器械厂）。
       　2  方法与结果
       2.1  止咳实验采用浓氨水引咳法［2］。取昆明种小鼠，雌雄各半，体重18~22 g。逐个放入4L的干燥器内，用超声波雾化器以4 ml/min的容量向密闭的干燥器内通入雾化的25%氢氧化铵15 s，迅速转移至倒扣的漏斗下，用带有钟型接头的听诊器在漏斗根部听小鼠的咳嗽潜伏期和2 min内的咳嗽次数，挑选潜伏期在90 s内的敏感小鼠随机分组，24 h后按相应浓度给药1次。给药后1 h，按前法氨水喷雾引咳，观察小鼠的咳嗽潜伏期和2 min内的咳嗽次数［3，4］，以t值检验药物组和对照组统计学差异的显著性，结果见表1。结果表明，与蒸馏水组比较，还阳参石油醚提取物（A）1.0 g/kg能减少小鼠2 min内的咳嗽次数，并能延长小鼠的咳嗽潜伏期，有明显的止咳作用。
       表1  还阳参不同提取部位的止咳实验结果（略）
       与蒸馏水组比较，*P＜0.05；n=10
       从A提取物中进一步分离得到3个部位H21，H22，H33，同法进行止咳实验。结果见表2。表明H21 0.8 g/kg能明显减少小鼠2 min内的咳嗽次数。
       表2  还阳参石油醚提取物不同洗脱部位的止咳实验结果（略）
       与蒸馏水组比较，*P＜0.05，n=10
       进一步取H21 0.8，1.6，3.2 g/kg3个剂量组进行同样的止咳实验，结果均能减少小鼠2 min的咳嗽次数，具有明显的止咳作用。结果见表3。
       表3  不同剂量对小鼠浓氨致咳的止咳作用结果（略）
       与蒸馏水组比较，*P＜0.05，n=10实验结果表明，H21部位为还阳参止咳作用的有效部位。
       2.2  平喘实验采用药物引喘法［5］。取豚鼠，体重150~200 g，雌雄各半。逐个放入4 L密闭的干燥器内，用超声雾化器以0.5 ml/min的容量向密闭干燥器内通入雾化的0.1%磷酸组胺和2%氯化乙酰胆碱混合液（1∶1）10 s，观察豚鼠喘息潜伏期。挑选潜伏期在2 min内的敏感豚鼠，随机分组。间隔24 h，按相应浓度给药1次。给药后1 h，按前法重新引喘，观察给药后豚鼠喘息潜伏期，潜伏期大于6 min者为完全保护［5］。以t值检验药物组和对照组统计学差异的显著性，结果见表4。结果表明，与对照组比较，还阳参正丁醇提取物（C）1.0 g/kg可保护组胺和乙酰胆碱引起豚鼠哮喘。从还阳参正丁醇提取物中分离得到HD1，HD2，HD3，HD4 4个部位，同法进行平喘实验，结果见表5，表明HD-2可延长豚鼠的哮喘潜伏期。进一步取HD2，0.2 ，0.4，0.8 g/kg 3个剂量组进行上述实验，结果3个剂量组均有保护组胺和乙酰胆碱引起的豚鼠哮喘的作用，见表6。由此，可确定还阳参HD2部位为还阳参平喘作用的有效部位。
       表4  还阳参不同提取部位的平喘实验结果（略）
       与蒸馏水组比较，*P＜0.05，n=10
       表5  还阳参正丁醇层不同洗脱部位的平喘实验结果（略）
       与蒸馏水组比较，*P＜0.05，n=10
       表6  HD2不同剂量组的平喘实验结果（略）
       与蒸馏水组比较，*P＜0.05，n=10
       3  结论
       通过上述实验，为还阳参止咳平喘的临床功效提供了科学依据，同时明确了还阳参止咳平喘的物质基础。实验结果表明，还阳参石油醚提取物有明显的止咳作用，为还阳参止咳的主要有效部位；其正丁醇提取物具有明显的平喘作用，为还阳参平喘的主要有效部位。各有效部位的活性成分分离及作用机理探讨另文报道。
       还阳参；  止咳平喘；  活性部位
       ［1］  内蒙古自治区革委会卫生局.内蒙古中草药，第1版［M］.呼和浩特：内蒙古自治区人民出版社，1972：290.
       ［2］  徐叔云，卞如廉，陈  修，等.药理实验方法学，第2版［M］.北京：人民卫生出版社，1991：1165.
       ［3］  卢艳花，戴  岳，王峥涛，等.紫菀祛痰镇咳作用及其有效部位和有效成分［J］.中草药，1999，30（5）：360.
       ［4］  李诗梅.用SO2气诱发小鼠咳嗽模型研究麻黄碱、苦杏仁苷和麻杏石苷汤的镇咳效果［J］.中草药，1988，19（8）：45.
       ［5］  谢强敏，卞如濂，杨秋火，等.艾叶油的呼吸系统药理研究Ⅰ，支气管扩张、镇咳和祛痰作用［J］.中国现代应用药学杂志，1999，16（4）：16.
       基金项目：国家中医药管理局青年课题（No.2000JQ13）
       (山西省中医药研究院，山西 太原  030012；北京师范大学资源学院，北京  100875)